白细胞五分类 VCS技术.ppt

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1、白细胞五分类VCS技术,从三分群到五分类,三分群:小细胞群中间细胞群粒细胞群,五分类:淋巴细胞单核细胞中性粒细胞嗜酸细胞嗜碱细胞,小细胞35-90fl,单个核细胞90-160fl,粒细胞160-450fl,淋巴,嗜碱,单核,嗜酸,中性粒细胞,五分类VCS技术,运用V、C、S三种探针,在流式通道的某一位点,对通过的单列白细胞,进行逐个的、同时的、三重的检测,以及三维分析,以确定其亚群性质。V-低频波,分析细胞体积;C-高频波,分析细胞核型;S-激光,分析细胞的颗粒特性。,白细胞接近原态的分析,Scatter Pak双试剂系统的作用溶血剂(E-lyse):溶解红细胞终止剂(S-lyse):令溶解作

2、用停止,并使白细胞恢复到“接近原态”,接近原态的WBC分析,接近原态的白细胞,进入流式通道,流体动力聚焦,流体动力聚焦的流式通道单细胞流在鞘液的包裹下呈最适排列通过流式通道将重叠限制到最低限度,正常压力差:标本压力大于鞘流压力,异常压力差I,异常压力差II,VCS检测,八千多个白细胞逐个、直接、同时地在流式通道内接受VCS三重检测,得到各自的三维座标值,VCS,增强型流式通道,VCS增强型流式通道运用三种独立的能量探针来分析细胞,是目前最全面先进的分析工具,体积检测(V),V 是以库尔特原理检测细胞的体积获得的是完全的细胞体积,VCS-DC,细胞内部结构检测(C),C 运用高频探针检测细胞的内

3、部结构获得细胞核复杂程度的信息区分分叶核和非分叶核细胞,VCS-RF,VCS-Laser,S 是运用一个宽角度的散射范围(10-70)来测量细胞的颗粒特性更好地根据颗粒特性区分淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸细胞,细胞颗粒特性检测(S),三维分析技术,将检测过的8,192个细胞分布到一个以V、C、S为三维坐标的空间内,显示出细胞群特征。高智能的计算机软件分析分析细胞群的位置、相对密度、轮廓、和大小。三维坐标的数据分析位点多过 16 106个。,细胞的三维分析,将检测的8,192个细胞分布到一个以V、C、S为三维坐标的空间内,从而完成了白细胞五分类及各异常细胞亚群的区分三维分析的分辨率高达16 106

4、,三维细胞定位,VCS三维分析的技术特点,接近原态的白细胞分析一个分类试剂包增强型流式通道,VCS直接、同时、三重检测分析细胞的视角与手工相似真正的三维检测VCS,汇集最全面的物理检测工具三维分析的高分辨率(256 256 256)白细胞五项分类10多种异常细胞的检测,网织红细胞的检测,网织红细胞是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的不成熟红细胞,通常较成熟红细胞稍大,其胞质中尚残存部分嗜碱性物质(RNA,核糖体),经碱性染料染色后可见深染的网状结构,故名。右图中标记A、B、C的细胞分别代表不同成熟度的网织红细胞的。,新亚甲蓝-VCS检测法,以经典的超活染料新亚甲蓝(NMB)着色网织红细胞内残存的

5、RNA。漂去除红细胞内血红蛋白(酸性试剂)在流式通道,运用VCS三维技术,将网织红细胞与成熟红细胞、白细胞、血小板、和有核红细胞区分开来。,网织红细胞的VCS三维分析,运用VCS三维技术分析染色后的红细胞。低频波检测细胞体积高频波(阻光性)检测细胞的内部成分,可剔除非红细胞颗粒激光散射将网织红细胞与成熟红细胞区分开来(网织红细胞胞浆含较 RNA 物质,散射较多的激光,在散点图上分布于红细胞的右侧)。网织红细胞成熟度越差,在散点图上分布越靠右检测与白细胞分类共享一个流式通道。,网织红细胞VCS三维散点图分析,网织红细胞,网织红细胞参数意义,参数 英文 正常参考网织红细胞百分比 RET%0.5%-2%(成人)2%-6%(新生儿)网织红细胞绝对值 RET#(25 75)109/L网织红不成熟度 IRF 0.2-0.4平均网织红体积 MRV 100-125fl平均球形细胞体积 MSCV 84-100fl高散射网织红百分比 HLR%0.07%-0.7%高散射网织红绝对值 HLR#(3 50)106/L,

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