检验仪器.doc

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1、1.灵敏度:检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比,即检验仪器对单位浓度或质量的被检物质通过检测器时所产生的响应信号值变化大小的反应能力,它反映仪器能够检测的最小被测量。2.误差:当对某物理量进行检测时,所测得的数值与标称值(即真值)之间的差异称为误差,误差的大小反映了测量值对真值的偏离程度。3. 噪音:检测仪器在没有加入被检验物品(即输入为零)时,仪器输出信号的波动或变化范围即为噪音。4.最小检测量:检测仪器能确切反映的最小物质含量。最小检测量也可以用含量所转换的物理量来表示。如含量转换成电阻的变化,此时最小检测量就可以说成是能确切反应的最小电阻量的变化量了。5.精度:对检测可靠度或检测

2、结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念,其高低是用误差来衡量的,误差大则精度低,误差小则精度高。6.可靠性:仪器在规定的时期内及在保持其运行指标不超限的情况下执行其功能的能力。它是反映仪器是否耐用的一项综合指标。7.重复性:在同一检测方法和检测条件(仪器、设备、检测者、环境条件)下,在一个不太长的时间间隔内,连续多次检测同一参数,所得到的数据的分散程度。重复性与精密度密切相关,重复性反映一台设备固有误差的精密度。8.分辨率:仪器设备能感觉、识别或探测的输入量(或能产生、能响应的输出量)的最小值。9.测量范围:在允许误差极限内仪器所能测出的被检测值的范围。10.线性

3、范围:输入与输出成正比例的范围。也就是反应曲线呈直线的那一段所对应的物质含量范围。11.响应时间:表示从被检测量发生变化到仪器给出正确示值所经历的时间。12.频率响应范围:为了获得足够精度的输出响应,仪器所允许的输入信号的频率范围。一、名词解释1光学显微镜:简称光镜,是利用日光照明将小物形成放大影像的精密光学仪器,由光学系统、机械装置和照明系统三部分组成。光学系统由物镜和目镜组成,其核心是物镜和目镜中的两组透镜,其放大成像的机理是先由物镜形成放大的实像,再由目镜进一步放大成虚像,最后在人眼中形成实像。2荧光显微镜:荧光显微镜是以紫外线为光源来激发生物标本中的荧光物质,产生能观察到的各种颜色荧光

4、的一种光学显微镜。3相衬显微镜:是把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度,用于观察活细胞和未染色的标本的一种特殊显微镜。4暗视野显微镜:是利用特殊的聚光镜使照明光线斜射而不能直接进入物镜,形成暗视野,那些经过标本散射的光线才能进入物镜放大,在黑暗的背景中呈现标本明亮的轮廓的显微镜。5偏光显微镜:是利用光的偏掁特性,对具有双折射性(即可以使一束入射光经折射后分成两束折射光)的晶态、液晶态物质进行观察和研究的重要光学仪器。6激光扫描共聚焦显微镜:以单色激光作为光源的一种特殊光学显微镜。其物镜和聚光镜互相共焦点,使得只有从标本焦面发出的光线聚焦成像,而焦面以外的漫射光不参

5、加成像,改变焦平面,可获得细胞或原标本不同层次的图像,从而得到样品的三维结构图像。7倒置显微镜:当观测活体标本时,需要把照明系统放在载物台及标本之上,而把物镜组放在载物台器皿下进行放大成像的显微镜,又称生物培养显微镜。13扫描隧道电子显微镜:当原子尺度的针尖在不到一个纳米的高度上扫描样品时,此处电子云重叠,外加电压(2mV2V),针尖与样品之间产生隧道效应而有电子逸出,形成隧道电流,通过隧道电流获取显微图像的电子显微镜。14分辨率:也称分辨本领,指分辨物体细微结构的的能力。15放大率:或称放大倍数是指显微镜经多次成像后最终所成(放大的)像的大小相对于原物体大小的比值。16数值孔径:又叫镜口率,

6、是物体与物镜间媒质的折射率n与物镜孔径角的一半()正弦值的乘积。17显微摄影术:是利用显微照相装置,把显微镜视野中所观察到物件的细微结构真实地记录下来,以供进一步分析研究之用的一种技术。18景深与焦长:在成一幅清晰像的前提下,像平面不变,景物沿光轴前后移动的距离称“景深”。景物不动,像平面沿光轴前后移动的距离称“焦长”。19视野:视野又称视场,是指通过显微镜所能看到的标本所在空间的范围。20. 齐焦:当某一物镜调焦清晰后,变换其它物镜时,也能基本保证焦距适当、成像清晰。21. 像差:光学仪器不可能使物点发出而进入系统的所有光线都是沿着高斯光学的理想光路成像,从而导致成像在形状方面的缺陷,称之为

7、像差。22. 色差: 是一种由白光或复色光在即使严格满足高斯条件下也存在的特殊类型的成像缺陷。当用白光或复色光经透镜成像时,会因各种色光存在着光程差而造成颜色不同、位置不重合、大小不一致的不同成像效果,从而造成像和物体的较大失真。一、名词解释1离心现象:物体远离圆心运动的现象称为离心现象,也叫离心运动。2重力沉降:液体中的微粒受重力的作用,较重的微粒下沉与液体分开,这个现象称为重力沉降。3沉降速度:在强大离心力的作用下,单位时间内物质的运动的距离。6解释沉降系数:是指颗粒在单位离心力场作用下的沉降速度,其单位为秒。一、名词解释1激发光谱:将激发光的光源用单色器分光,连续改变激发光波长,固定荧光

8、发射波长,测定不同波长的激发光照射下,物质溶液发射的荧光强度的变化,以激发光波长为横坐标,荧光强度为纵坐标作图,即可得到荧光物质的激发光谱。从激发光谱图上可找出发生荧光强度最强的激发波长ex。2荧光光谱:选择ex作激发光源,并固定强度,而让物质发射的荧光通过单色器分光,测定不同波长的荧光强度。以荧光波长作横坐标,荧光强度为纵坐标作图,便得荧光光谱。荧光光谱中荧光强度最强的波长为 em 。荧光物质的最大激发波长(ex)和最大荧光波长(em)是鉴定物质的根据,也是定量测定中所选用的最灵敏的波长。3光谱分析:对物质发射辐射能的能谱分析或对辐射能与物质相互作用引起的能谱改变的分析均称为光谱分析。4吸收

9、光谱:光照射到物质时,一部分光会被物质吸收。在连续光谱中某些波长的光被物质吸收后产生的光谱被称作吸收光谱。每一种物质都有其特定的吸收光谱,因此可根据物质的吸收光谱来分析物质的结构和含量。5发射光谱:一部分物质分子或原子吸收了外来的能量后,可以发生分子或原子间的能级跃迁,所产生的光谱称为发射光谱,包括线状光谱、带状光谱及连续光谱。通过测定物质发射光谱可以分析物质的结构和含量。7分光光度计:能从含有各种波长的混合光中将每一单色光分离出来并测量其强度的仪器称为分光光度计。它具有分析精密度高、测量范围广、分析速度快和样品用量少等优点。根据所使用的波长范围不同可分为紫外光区、可见光区、红外光区以及万用(

10、全波段)分光光度计等。8荧光:某些物质吸收光能量后,可发射波长与激发光波长相同或不同的光,当激发光源停止照射试样,再发射过程立即停止,这种再发射的光称为荧光。按照来源不同可分为分子荧光和原子荧光。荧光的发生和强度与物质的分子(或原子)结构有着密切的关系。通过测定物质分子产生的荧光强度可进行物质的定性与定量分析。9朗伯-比尔定律:是比色分析的基本原理,表达了物质对单色光吸收程度与溶液浓度和液层厚度之间的定量关系。当用一束单色光照射吸收溶液时,其吸光度A与液层厚度b及溶液浓度的乘积c成正比,此即朗伯-比尔定律。数学表达式为: Akbc。它适用于分子吸收和原子吸收。10单色器:将来自光源的复合光分解

11、为单色光并分离出所需波段光束的装置,是分光光度计的关键部件。主要由入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜组成。11吸收池:又称为比色皿、比色杯、样品池或液槽等,是用来盛放被测溶液的器件,同时也决定着透光液层厚度,可用塑料、玻璃、石英或熔凝石英制成。在可见光范围内,常用无色光学玻璃或塑料制作;在紫外区,需用能透紫外线的石英或熔凝石英制作。15光电倍增管:利用外光电效应与多级二次发射体相结合而制成的光电元件,由一个表面涂有光敏材料的阴极和若干个(通常为9个13个)二级电子发射极(打拿极)组成,其灵敏度比光电管高200多倍。有三个重要指标:波长效应、灵敏度和噪声水平。28原子化器:原子化器是在原子吸收

12、光谱仪中提供能量将液态试样中的待测元素干燥蒸发使之转变成原子态蒸气的部件。常用的有火焰原子化器和无火焰原子化器两种。火焰原子化器常用的是预混合型原子化器,无火焰原子化器常用的是石墨炉原子化器。31原子发射光谱法:根据处于激发态的待测元素原子回到基态时发射的特征谱线对待测元素进行分析的方法。一、名词解释1色谱法:是一种物理分离技术,实质上是利用混合物中各个组分在互不相溶的两相(固定相和流动相)之间的分配的差异而使混合物得到分离的一种方法。2色谱图: 表明已被色谱柱分离的物质流过检测器的含量与时间的关系。3基线: 是色谱图中与时间轴平行的记录线。16固定相:一种固定在色谱仪中的具有大比表面积的固体

13、或以某种方式固定了的液体。17流动相:色谱仪中一种能携带待分离混合物流过固定相的是气体或液体。19色谱峰:混合物中分离出的各组分进入检测器,色谱流出曲线(色谱图中,检测器随时间绘出的响应信号曲线)就会偏离基线,检测器的输出信号会随流入组分的浓度或质量的变化出现一个个的峰形。一、名词解释1电泳:指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。 3蛋白质的等电点:当溶液的酸碱度处于某一特定pH值时,它将带有相同数量的正、负电荷(即净电荷为零),致使蛋白质分子在电场中不会移动,称此特定的pH值为该蛋白质的等电点。6毛细管电泳技术:是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力

14、,根据样品中各组分之间迁移速度(淌度)和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术。7电泳淌度:带电粒子在毛细管中定向移动的速度与所在电场强度之比。电化学分析法1. 电化学分析法:利用溶液电化学性质将被测物质的浓度转变成电学参数而进行检测的方法。2. 离子选择性电极:用特殊敏感膜制成的、对溶液中特定离子具有选择性响应的电极。3. 电解质分析仪:通常采用离子选择性电极(ISE)测定生物样品中离子浓度的仪器。4. 血气分析仪:利用电极对人全血中的酸碱度(pH)、二氧化碳分压(PCO2)和氧分压(PO2)进行测定的仪器。5. 定标或校准:确定电极系统工作曲线的过程。9. 基流:当PO2的值为零时,

15、电路中存在的微小电流值。10. PO2电极:PO2电极是一种气敏电极,电流的大小与血液样品中PO2值相关。11. PCO2电极:又称为“Severinghaus”电极,主要由玻璃电极、参比电极以及CO2渗透膜组成的,电位值随血液PCO2的大小变化而改变。 一、名词解释1流式细胞仪:是以激光为光源,集流体力学、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术、细胞荧光化学和单克隆抗体等技术为一体的新型高科技仪器。2流式细胞术:应用流式细胞仪对于处在快速直线流动状态中的生物颗粒进行快速的、多参数的定量分析和分选的技术称为流式细胞术。3狭缝扫描流式细胞仪:被检细胞直径大于激光光斑直径,当细胞通过光束时,细胞各

16、部分被依次先后扫描,得到一维的细胞轮廓组方图,可计算出细胞直径大小、核直径大小、核浆比例等一系列的形态学信息的流式细胞仪。4测量区:鞘液流和样品流在喷嘴附近组成一个圆柱流束,自喷嘴的圆形孔喷出,与水平方向的激光束垂直相交,相交点称为测量区。5. 样品流:将特异荧光染料染色的单细胞悬液放人样品管,在气体压力作用下,悬浮在样品管中的单细胞经管道进入流式细胞仪的流动室,沿流动室的轴心向下流动所形成的流束称为样品流。6鞘液流:流动室轴心至外壁的鞘液也向下流动,形成包绕样品流的流束称为鞘液流。7侧向角散射: 侧向角散射是指与激光束正交900方向的散射光信号。11分选速度:分选速度指每秒可提取所要细胞的个

17、数。12分选纯度:分选纯度指要分选的目的细胞占分选出细胞的百分比。13长通滤光片:能使特定波长以上的光通过,特定波长以下的光不能通过的滤光片称为长通滤光片。14短通滤光片:与长通滤光片相反,特定波长以下的光通过,特定波长以上的光被吸收或返回。15带通滤光片:带通滤光片允许一定波长范围内的光通过,一般滤光片上有两个数值,一个为允许通过波长的中心值,另一个为允许通过光波段的范围。如BP500/50表示其允许475nm525nm波长的光通过。一、名词解释1血细胞分析仪:指对一定体积全血内血细胞异质性进行自动分析的临床常规检验仪器。2. VCS技术中V、C、S各代表什么意思:V代表体积,采用电阻抗进行

18、血细胞计数和体积测量;C代表电导,依据细胞可影响高频电流传导的特性,采用高频电磁探针测量细胞内部结构,细胞内核浆比例,质粒的大小和密度,从而区别体积完全相同而性质不同的两个细胞;S代表光散射,对细胞颗粒的构型和颗粒质量有较强的鉴别能力,通过测定单个细胞的散射光强度把粒细胞分开。3复合通道丢失:在血细胞的实际测定中,常有两个或更多的细胞重叠同时进入微孔感应区内,此时,产生一个单一的高或宽振幅脉冲信号,由此引起一个或更多的脉冲丢失,使计数较实际结果偏低,这种脉冲减少称为复合通道丢失。4携带污染率:指不同浓度样品间连续测定的相互影响,主要是指含量高的样本对含量低的样本所产生的影响。1尿干化学分析试剂

19、带:它以滤纸为载体,将各种试剂成分浸渍后干燥,作为试剂层,再在其表面覆盖一层纤维素膜作为反射层。一般把这样一条上面附有试剂块的塑料条叫做试剂带。2试剂带的反射率:R= = 100Tm为试纸快对测量波长的反射强度,Ts为试纸快对参比波长的反射强度。Cs为空白对测量波长的反射强度,Cm为空白对参比波长的反射强度。3尿11项分析仪:可以检测包括尿蛋白、尿葡萄糖、尿pH、尿酮体、尿胆红质、尿胆原、尿潜血、亚硝酸盐、尿白细胞、尿比重、维生素C的尿液分析仪。4尿液分析仪光学系统:包括光源、单色处理、光电转换三部分。光线照射到反应区表面产生反射光,反射光的强度与各个项目的反应颜色成正比。不同强度的反射光再经

20、光电转换器件转换为电信号进行处理。1红细胞沉降率:是指红细胞在一定条件下沉降的速度,简称血沉。2魏氏血沉测定法:是传统的手工检测方法。在血液中加入一定的抗凝剂,置于特定的血沉管中,将管垂直固定于血沉架上,经1小时观察红细胞下降的毫米数。3血沉自动分析仪的检测系统:一般采用光电阵列二极管。其作用是进行光电转换,把光信号转变成电信号。4血沉自动分析仪的数据处理系统:由放大电路、数据采集系统和打印机组成。其作用就是将检测系统的检测信号,经计算机的处理,驱动智能化打印机打印结果。5红细胞沉降曲线:即H-T曲线,是表示血沉管内血浆高度H(mm)与时间T(min)关系的曲线。 一、名词解释1自动生化分析仪

21、:是将生物化学分析过程中的取样、加试剂、去干扰、混合、保温反应、自动检测、结果计算、数据处理和打印报告,以及实验后的清洗等步骤自动化的仪器。2后分光:即光源光线直接透过样品,通过光栅,再进行吸光度的检测,可连续检测不同波长的反应。7离心式自动生化分析仪:将样品和试剂放在特制圆形转头内,装在离心机的转子位置,当离心机开动后,圆形反应器内的样品和试剂受离心力的作用而相互混合发生反应,经过一定时间的温育后比色计算结果。8同步分析:离心式自动生化分析仪在整个分析过程中,样品与试剂的混合、反应和检测等每一步骤,几乎都是同时完成的,称为同步分析。9分立式自动化分析仪:是指按手工操作的方式编排程序,并以有节

22、奏的机械操作代替手工,各环节用转送带连接起来,按顺序依次操作。10顺序分析:分立式自动化分析仪各环节用转送带连接起来,按顺序依次操作,故称顺序分析。6. 临床检验仪器常用的性能指标有哪些?答:一个优良的检验仪器应具有的性能指标有:灵敏度好、精度高;噪音、误差小;分辨率高,可靠性、重复性好;响应迅速;线性范围宽和稳定性好。7. 临床检验仪器有哪些主要部件?答:通常,临床检验仪器有取样装置、预处理系统、分离装置、检测器、信号处理系统、显示装置、补偿装置、辅助装置、样品前处理系统等主要部件。三、简答题1简述光学显微镜的工作原理。答:显微镜是由两组会聚透镜组成的光学折射成像系统,是利用光学原理,把人眼

23、所不能分辨的微小物体放大成像,供人们提取物质微细结构信息的光学仪器。把焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组称为物镜,而焦距较长,靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜。被观察物体位于物镜的前方,被物镜作第一级放大后成一倒立的实像,然后此实像再被目镜作第二级放大, 得到最大放大效果的倒立的虚像,位于人眼的明视距离处。2简述光学显微镜的结构组成。答:基本结构包括光学系统和机械系统两大部分。光学系统是显微镜的主体部分,包括物镜、目镜、聚光镜及反光镜等组成的照明装置。机械系统是为了保证光学系统的成像而配置的,包括调焦系统、载物台和物镜转换器等运动夹持部件以及底座、镜臂、镜筒等支持部件。照明设置的主要部件有光

24、源、滤光器、聚光镜和玻片等。4光学显微镜的性能参数有哪些?这些参数间的影响和制约关系如何?答:显微镜的性能参数主要有放大率、数值孔径、分辨率、视场、景深、镜像亮度、镜像清晰度、工作距离和机械筒长。显微镜的数值孔径与其放大率成正比,与分辨率、景深成反比,它的平方与图像亮度成正比。因此,使用较大数值孔径的物镜,其放大率和分辨本领较高,但视场、景深、工作距离较小。5简述医学检验中常用的荧光显微镜的原理、结构及用途。答:荧光显微镜是以紫外线为光源来激发生物标本中的荧光物质,产生能观察到的各种颜色荧光的一种光学显微镜。荧光显微镜是由光源、滤色系统和光学系统等主要部件组成。荧光显微镜与普通光学显微镜主要区

25、别在于光源和滤光片不同。通常用高压汞灯作为光源,可发出紫外线和短波长的可见光;滤光片有二组,第一组称激发滤片,位于光源和标本之间,仅允许能激发标本产生荧光的光通过(如紫外线);第二组是阻断滤片,位于标本与目镜之间,可把剩余的紫外线吸收掉,只让激发出的荧光通过,这样既有利于增强反差,又可保护眼睛免受紫外线的损伤。光学系统主要有反光镜、聚光镜、目镜、物镜、照明系统等组成。荧光显微镜可用于观察检测细胞中能与荧光染料特异结合的特殊蛋白、核酸等,其标本染色简便、荧光图像色彩鲜亮,而且敏感度较高。6. 简述荧光显微镜的使用注意事项。答:使用荧光显微镜时应注意以下事项:观察对象必须是可自发荧光或已被荧光染料

26、染色的标本;载玻片、盖玻片及镜油应不含自发荧光杂质;选用最好的滤片组;荧光标本一般不能长久保存,若持续长霎时间照射(尤其是紫外线)易很快褪色。因此,如有条件则应先照相存档,再仔细观察标本;启动高压汞灯后,不得在15分钟内将其关闭,一经关闭,必须待汞灯冷却后方可再开启。严禁频繁开闭,否则,会大大降低汞灯的寿命;若暂不观察标本时,可拉过阻光光帘阻挡光线。这样,即可避免对标本不必要的长时间照射,又减少了开闭汞灯的频率和次数;较长时间观察荧光标本时,最好戴能阻挡紫外光的护目镜,加强对眼睛的保护。7简述相衬显微镜的工作原理、结构特点及其主要用途。答:相衬显微镜的基本原理是把透过标本的可见光的光程差变成振

27、幅差,从而提高了各种结构间的对比度,使各种结构变得清晰可见。光线透过标本后发生折射,偏离了原来的光路,同时被延迟了1/4(波长),如果再增加或减少1/4,则光程差变为1/2,两束光合轴后干涉加强,振幅增大或减小,提高反差。相衬显微镜的结构特点:环形光阑(annular diaphragm)位于光源与聚光镜之间,作用是使透过聚光镜的光线形成空心光锥,聚焦到标本上;相位板(annular phaseplate)在物镜中加了涂有氟化镁的相位板,可将直射光或衍射光的相位推迟1/4,并能吸收直射光(背景光)的光强,使直射光与衍射光的光强趋于一致,能更好地突出干涉的效果。相衬显微镜主要用于观察活细胞和未染

28、色的标本。8简述偏光显微镜的结构特点、工作原理及其主要用途。答:是利用光的偏掁特性,对具有双折射性(即可以使一束入射光经折射后分成两束折射光)的晶态、液晶态物质进行观察和研究的重要光学仪器。偏光显微镜是在一般显微镜的基础上增添了使普通光线转变成偏振光和检测偏振光的装置或观察干涉图样的特殊透镜,即光源前有偏振片(起偏器),使进入显微镜的光线为偏振光,镜筒中有检偏器(一个偏振方向与起偏器垂直的起偏器),这种显微镜的载物台是可以旋转的。当载物台无样品时,无论如何旋转载物台,由于两个偏振片是垂直的,显微镜里看不到光线。而放入旋光性物质后,由于光线通过这类物质时发生偏转,因此旋转载物台便能检测到这种物体

29、。移相装置是偏光显微镜在使用过程中不可缺少的附件。全波片、半波片及1/4波片可以使通过波片的偏振光分别延迟2、和/2的相位。而补偿器则可连续调节使通过的偏振光相位发生连续改变。移相装置对观察光的偏振性质是十分必要的。利用偏光显微镜可以清楚地观察到纤维丝、纺锤体、胶原、染色体、卵巢、骨骼、毛发、活细胞的结晶或液晶态的内含物、神经纤维、肌肉纤维等的细微结构等。三、简答题1什么是离心技术,离心技术主要用于哪些方面?答:应用离心沉降进行物质的分析和分离的技术称为离心技术,实现离心技术的仪器是离心机。离心技术主要用于各种生物样品的分离、纯化和制备,在细胞生物学和分子生物学的每一进程中,总可见到离心技术的

30、运用。2离心机的工作原理是什么?答:(1)离心是利用旋转运动的离心力以及物质的沉降系数或浮力密度的差异进行分离、浓缩和提纯生物样品的一种方法。(2)悬浮液在高速旋转下,由于巨大的离心力作用,使悬浮的微小颗粒以一定的速度沉降,从而使溶液得以分离。(3)颗粒的沉降速度取决于离心机的转速、颗粒的质量、大小和密度。(4)微粒在重力场下移动的速度与微粒的大小、形态、密度、重力场的强度及液体的黏度有关。(5)离心机就是利用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力,迫使液体中微粒克服扩散加快沉降速度,把样品中具有不同沉降系数和浮力密度的物质分离开。6什么叫相对离心力?答:是指在离心力场中,作用于颗粒的离心力相当

31、于地球重力的倍数,单位是重力加速度“g”。7什么叫沉降速度?答:指在强大离心力作用下,单位时间内物质运动的距离。8什么叫离心沉降?答:(1)在离心机中,离心管放于离心转头里,当离心机开动时,离心管绕离心转头的轴旋转,作圆周运动,在离心管内的样品颗粒将同样运动。(2)对于离心管而言,样品颗粒由顶位移到了A位,也就是由离心管顶部移到了底部,这与重力场中的由高处落到低处相似。这种颗粒在圆周运动时的切线运动称为离心沉降。18国际上对离心机的分类有几种方法,分成哪些类型?答:通常国际上对离心机的分类有三种方法:按用途分、按转速分、按结构分。按用途可分为制备型、分析型和制备分析两用型;按转速分类可分为低速

32、、高速、超速等离心机;按结构可分为台式、多管微量式、细胞涂片式、血液洗涤式、高速冷冻式、大容量低速冷冻式、台式低速自动平衡离心机等。24低速离心机的大致结构有哪些?答:结构较为简单,由电动机、离心转盘(转头)、调速器、定时器、离心套管与底座等主要部件构成。26离心机转头一般可分为几类、各自用途是什么?答:一般可分为五大类。(1)固定角转头:用于分离沉降速度有明显差异的颗粒样品。(2)甩平式转头:又分为敞开式和封闭式两种。敞开式主要用于样品的初分离。封闭式主要用于线粒体、细胞核等的分离和密度梯度离心。(3)连续流动转头:用于悬浮介质中高速分离较小的颗粒物质。(4)区带转头:用于大容量的密度梯度离

33、心。(5)垂直转头:用于样品在短时间作密度梯度离心。第四章 光谱仪三、简答题1简述光吸收定律的物理意义及使用范围。答:光的吸收定律即朗伯-比尔定律,是比色分析的基本原理,表达了物质对单色光吸收程度与溶液浓度和液层厚度之间的定量关系。其内容是:当用一束单色光照射溶液时,其吸光度A与液层厚度b及溶液浓度c的乘积成正比。即A=kbc。朗伯-比尔定律的适用条件为:入射光为单色光。波长范围越大,单色光纯度越低,对朗伯-比耳定律的偏离越大;溶液中邻近分子的存在并不改变每一给定分子的特性,即分子间互不干扰。当溶液浓度很大时,由于溶液分子的相互干扰,该定律不再成立。2何为吸收光谱和发射光谱?答:在连续光谱中某

34、些波长的光被物质吸收后产生的光谱被称作吸收光谱。每种物质的吸收光谱取决于物质本身的结构,包括分子吸收光谱和原子吸收光谱。物质所发射的光称为发射光谱。物质的发射光谱有三种:线状光谱、带状光谱及连续光谱。线状光谱由原子或离子被激发而发射;带状光谱由分子被激发而发射;连续光谱由炙热的固体或液体所发射。3紫外-可见分光光度计的基本结构及各部分功能是什么?答:紫外-可见分光光度计基本结构由光源、单色器、样品池、检测器和放大显示系统等五部分组成。光源提供入射光,单色器的作用是将来自光源的复合光分解为单色光并分离出所需波段光束。吸收池用来盛放被测溶液,检测器作用是把光信号转换为电信号,信号显示系统是把放大的

35、信号以适当的方式显示或记录下来。5简述原子吸收光谱仪的主要结构、性能指标及特点。答:原子吸收光谱仪主要结构包括光源、原子化器、分光系统及检测系统的四个部件。性能指标包括波长精度、分辨率、对某个元素的特征浓度和检出限等。原子吸收分光光度计能测量近70种金属和半金属元素,从超微量到高浓度都能准确和精确地测定。具有测量灵敏度高、干扰少、测量手续简便等特点。6简述原子发射光谱仪的主要结构及特点。答:原子发射光谱仪主要由光源、分光系统、检测系统三部分构成。原子发射光谱仪灵敏度高、选择性好、分析速度快、用样量少、能同时进行多元素的定性和定量分析,是元素分析最常用的方法之一,目前主要是用来对70余种元素的原

36、子光谱进行分析。但原子发射光谱反映的是原子或离子所发射的特征谱线,与其来源的分子状态无关,只能用来确定被测物质的元素组成与含量,不能给出物质分子的有关信息。7简述荧光光谱仪的主要结构及特点。答:荧光光谱仪属于发射光谱分析仪器。其结构包括五个基本部分: 激光光源,单色器,样品池, 检测器和记录显示系统。主要特点是灵敏度高(可达10-12g数量级);选择性强,有利于分析复杂的多组分混合物;用样量少、特异性好、操作简便。不足之处一是对温度、pH值等因素变化比较敏感,二是应用范围较窄,只能用来测量发荧光的物质,或与某些试剂作用后发荧光的物质。10紫外-可见分光光度计的有哪些基本类型? 答:紫外-可见分

37、光光度计按其光学系统可分为单波长分光光度计(包括单光束和双光束)和双波长分光光度计。11. 单波长单光束分光光度计的特点是什么?答:单波长单光束分光光度计结构简单,使用、维护比较方便,应用广泛。其设计原理和结构具有以下特点:单光束光路,从光源到试样至接收器只有一个光通道,使用中依次对参考样品和待测试样进行测定,然后将二次测定数据进行比较、计算,获得最终结果;仪器只有一个色散元件,工作波长范围较窄;通常采用直接接收放大显示的简单电子系统,用电表或数字显示;结构简单、附件少、功能范围小,不能做特殊试样如浑浊样品、不透明样品等的测定。12. 单波长双光束分光光度计的结构特点是什么?答:单波长双光束分

38、光光度计的光路设计在出射狭缝和样品吸收池之间增加了一个光束分裂器或斩波器,作用是以一定的频率将一个光束交替分成两路,使一路经过参比溶液,另一路经过样品溶液,然后由一个检测器交替接收或由两个匹配器分别接收两路信号;从光源到检测器有试样光路和参考光路两条通路,可同时对检测样品和参考样品进行测定,直接获得检测数据,还可自动补偿检测时因条件的随机变化或样品中非测定组分的干扰所引起的影响;一般采用两个光栅或棱镜加光栅的双单色器,能有效地提高分辨率和降低杂散光;可以自动进行波长扫描、自动记录光谱曲线,也可以外接计算机,实现自动化运行;可装备各种附件,光、电、机紧密结合,功能范围宽。13简述原子吸收光谱仪的

39、工作原理。答:原子吸收光谱仪的结构与普通的分光光度计相似,只是用锐线光源代替了连续光源,用原子化器代替通常的吸收池。其工作原理是测定气态的自由原子对某种特定光谱的吸收。空心阴极灯或无极放电灯发生相应待测元素特征波长的射线,它穿过火焰,把试样的溶液以细粒子流的形式喷射到火焰上,部分射线被吸收。这一部分正比于试样的浓度,测量吸收量将其与标准溶液进行对比,从而确定浓度。14. 简述原子发射光谱仪的测试原理。原子发射光谱仪是根据处于激发态的待测元素原子回到基态时发射的特征谱线对待测元素进行分析的仪器。气态离子或分子受热或电激发时会发生紫外和可见光域内的特征辐射。发射光谱就是提供足够能量的光源,使试样蒸

40、发并将各组分转变成气态原子或离子,然后引起气体中各基本粒子的电激发,被激发的原子或离子回到基态时发射出每个元素的特征谱线,研究特征谱线的波长和强度就可以对被测试样进行定性和定量分析。由于待测元素原子的能级结构不同,因此发射谱线的特征不同,据此可对样品进行定性分析;而根据待测元素原子的浓度不同,因此发射强度不同,可实现元素的定量检测。15荧光光度计与紫外可见分光光度计结构上的区别是什么?答:第一个区别在于光源部分。紫外-可见分光光度计光源的基本作用是在所需波长范围的光谱区域内发射连续光谱,常用的光源有热辐射灯(钨灯、卤钨灯等),气体放电灯(氢灯、氘灯及氙灯等),金属弧灯(各种汞灯)等多种。荧光分

41、光光度计的激光光源用来激发样品中荧光分子产生荧光。常用汞弧灯、氢弧灯及氘灯等。第二个区别在于紫外-可见分光光度计只有一个单色器,而荧光分光光度计有两个。一个是激发单色器,用于选择激发光波长;第二个是发射单色器,用于选择发射到检测器上的荧光波长。16什么是物质的激发光谱和荧光光谱?它们之间有什么关系? 答:激发光谱是将激发光的光源用单色器分光,连续改变激发光波长,固定荧光发射波长,测定不同波长的激发光照射下,物质溶液发射的荧光强度的变化,以激发光波长为横坐标,荧光强度为纵坐标作图,即可得到荧光物质的激发光谱。从激发光谱图上可找到发生荧光强度最强的激发波长ex。荧光光谱是选择ex作激发光源,并固定

42、强度,而让物质发射的荧光通过单色器分光,测定不同波长的荧光强度。以荧光波长作横坐标,荧光强度为纵坐标作图,便得荧光光谱。荧光光谱中荧光强度最强的波长为 em 。荧光物质的最大激发波长(ex)和最大荧光波长(em)是鉴定物质的根据,也是定量测定中所选用的最灵敏的波长。20简述紫外-可见分光光度计的性能评价指标。答:紫外-可见分光光度计分析结果的可靠性取决于仪器的性能是否达标。评价紫外-可见分光光度计的性能指标如下:波长准确度和波长重复性;光度准确度;光度线性范围;分辨率;光谱带宽;杂散光;基线稳定度;基线平直度。第五章 色谱仪1简述色谱仪的工作原理。答:色谱是利用待分离的样品组分在两相中分配的差

43、异而实现分离的。这个过程可以形象地看作是固定相对样品中各组分随流动相移动所产生的流动阻力不同,阻力小的组分跑得快,阻力大的组分跑得慢。经过一段距离后,各组分就可以分开了。2. 色谱仪主要有哪些特点?答:色谱仪的主要特点是可以对混合物进行多组分分析或全分析。具有应用范围广、样品用量少、高选择性、高效能、高速度以及高灵敏度等优点。3常用的色谱仪器有哪两大类,各自有何特点?答:目前比较成熟的色谱仪主要是气相色谱仪与高效液相色谱仪两大类。气相色谱仪具有高分辨率、高速度、高灵敏度及选择性好等优点。但气相色谱仪只能用于被气化物质的分离、检测。液相色谱的样品无需经气化而直接导入色谱柱进行分离、检测,特别适用

44、于气化时易分解的物质的分离、分析。除了在样品的适用面方面的差异外,高效液相色谱仪与气相色谱仪另一个显著差异是在流动相选择上。气相色谱仪仅能用氢气、氮气、氩气或氦气等少数几种气体。由于它们性质相近,对分离条件改善的作用不大。但高效液相色谱仪可供选择溶剂多种多样,其极性、粘性、pH值、浓度等均可改变,这些都能调整样品在两相间分配的差异,进而有效地改善分离条件,达到改善分离的最终目的。4气相色谱仪的主要组成部分有哪些,其工作过程如何?答:气相色谱仪主要由气路系统、进样系统、分离系统(色谱柱)、检测系统、温度控制系统、数据处理、记录系统及电源、电子线路等构成。气源提供的载气减压后,经净化干燥器净化,再

45、通过稳压和稳流环节,以保证得到流动平稳、洁净的载气作流动相,进入色谱柱。当气化室、分离柱、检测器达到操作所需的温度,且载气流量平衡时,将样品由进样器注入,气态样品或经气化室气化了的液态样品被载气带入色谱柱,开始分离过程。由于样品中各组分对两相的分配系数等方面的差异,在色谱柱中经过反复多次吸附脱附或溶解析出的分配过程后,依次离开色谱柱,进入检测器。检测器把流入的组分定量地转换成电信号,经放大处理后,送往显示与记录系统,就可得到被测样品各个组分的色谱图。8对气相色谱仪检测器的要求主要有哪些?答:灵敏度(S)高,同类检测器灵敏度越高,性能也就越好。最小检测量愈低愈好,以适应痕量分析的要求。线性范围要

46、宽。噪音要低、漂移要小。注意检测器的选择性问题。响应时间要快。9气相色谱仪常用的检测器有哪些,主要原理如何?可以分别检测什么样的样品?答:热导检测器,是基于被测样品和载气具有不同的导热系数进行检测的,基本上所有的样品组分都能够检测;氢火焰离子化检测器是样品在电离室里面参与燃烧,增加由于载气的稳定燃烧产生的基流而进行检测的,主要用于含碳有机物(可以燃烧的样品)的检测;电子捕获检测器是利用具有电负性的组分捕获电子,减少载气由于受放射性同位素照射电离而产生的“基流”,主要用于具有电负性组分的检测。第六章 电泳仪1简述电泳、电泳技术的概念。答:电泳是指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反

47、的电极移动的现象。利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫做电泳技术。2简述电泳的基本原理。答:物质分子在正常情况下一般不带电,但是在一定的物理作用或化学反应条件下,某些物质分子会成为带电的离子(或粒子),不同的物质,由于其带电性质、颗粒形状和大小不同,因而在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同,因此可使它们分离。5溶液的Ph值对电泳速度有何影响?答:溶液的pH值决定了带电质点的解离程度,也决定了物质所带电荷的多少。对蛋白质、氨基酸等两性电解质而言,pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越快。反之,则越慢。17简述毛细管电泳基本工作原理和毛细管电泳的特点。答:毛细管电泳基本工作原理:毛细管电泳技术又称高效毛细管电泳(HPCE )或毛细管分离法。溶液中的带电粒子以高压电场为驱动力,沿毛细管通道,以不同速度向与其所带电荷相反的电极方向迁移,并依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离。毛细管电泳的特点:高灵敏度,高速度,高分辨率,样品少,成本低,易自动化,应

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