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1、1,流式细胞术及临床应用,吴林军乐山市中医医院检验科,2,01,流式细胞术的原理,流式细胞术是以高能量激光照射高速流动状态下经荧光标记的单细胞（生物颗粒），通过检测产生的散射光和荧光素发射荧光的强度，从而对细胞进行定性或者定量检测，实现对目的细胞分析或分选的技术。,样本传输与聚焦,信号产生与收集,信号检测与存贮,整体架构的支持和布局,3,FCM 的结构一般分为5 部分：流动室及液流驱动系统；激光光源及光束成形系统；光学系统；信号检测、存贮、显示、分析系统；细胞分选系统,4,流动室及液流驱动系统 液流系统的作用是依次传送待测样本中的细胞到激光照射区，其理想状态是把细胞传送到激光束的中心。而且在特
2、定时间内，应该只有一个细胞或粒子通过激光束。鞘液的作用是将样品流环包，鞘液流是一种稳定流动，操作人员无法随意改变其流动的速度，样品流在鞘液的环包下形成流体力学聚焦，使样品流不会脱离液流的轴线方向，并且保证每个细胞通过激光照射区的时间相等，从而得到准确的细胞荧光信息。如下图。因此，必须在流动室内把细胞注入鞘液流。流动室是液流系统的核心部件。在流动室内细胞液柱聚焦于鞘液中心，细胞在此与激光相交。,5,Flow Cell,Injector Tip,Fluorescence,signals,Focused laser,beam,Sheath fluid,6,7,。高流速适用于定性测量，如免疫表型。样本
3、流变宽，细胞间距离缩短，这样在单位时间内流经激光照射区的细胞数量增加，可以快速获取数据。低流速促使样本流变窄，单个细胞得以依次通过，这样大多数细胞可流经激光束的中心，细胞受激光照射的能量比较均一，因而低流速适用于检测分辨率要求高的实验，如DNA分析,8,激光光源与光束成形系统,目前台式机FCM，大多采用氩离子气体激光器。激光（light amplification by stimulated emission of radiation,Laser）是一种相干光源，它能提供单波长、高强度及稳定性高的光照，是细胞微弱荧光快速分析的理想光源，这是因为由于细胞快速流动，每个细胞经过光照区的时间仅为1
4、微秒左右，每个细胞所携带荧光物质被激发出的荧光信号强弱，与被照射的时间和激发光的强度有关，因此细胞必须达到足够的光照强度。,9,光学系统,FCM 的光学系统是由若干组透镜、滤光片、小孔组成，它们分别将不同波长的荧光信号送入到不同的电子探测器在FCM 的光学系统中主要光学原件是滤光片（Filter），主要分成3 类：长通滤片（long-pass filter,LP）、短通滤片（short-pass filtr,SP）及带通滤片（band-pass filter,BP）。,10,PMT,PMT,PMT,PMT,Dichroic,Filters,Bandpass,Filters,Example Ch
5、annel Layout for Laser-based Flow Cytometry,Laser,1,2,3,4,Flow cell,11,信号检测与分析系统,当细胞携带荧光素标记物，通过激光照射区时，受激光激发，产生代表细胞内不同物质、不同波长的荧光信号，这些信号以细胞为中心，向空间360 度立体角发射，产生散射光和荧光信号。,12,（1）散射光信号：散射光分为前向角散射（forward scatter,FSC）和侧向角散射（sidescatter,SSC），散射光不依赖任何细胞样品的制备技术（如染色），因此被称为细胞的物理参数或称固有参数 前向角散射：前向角散射与被测细胞的大小关，确切说
6、与细胞直径的平方密切相关，通常在FCM 应用中，选取FSC 作阈值，来排除样品中的各种碎片及鞘液中的小颗粒，以避免对被测细胞的干扰。侧向角散射：侧向角散射是指与激光束正交90o 方向的散射光信号，侧向散射光对细胞膜、胞质、核膜的折射率更为敏感，可提供有关细胞内精细结构和颗粒性质的信息。以上两种信号都是来自激光的原光束，其波长与激光的波长相同，目前采用这两个参数组合，可区分裂解红细胞处理后外周血白细胞中淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞三个细胞群体，或在未进行裂解红细胞处理的全血样品中找出血小板和红细胞等细胞群体。,13,Forward Angle Light Scatter前向角,14,90 De
7、gree Light Scatter90度侧向角,15,（2）荧光信号：当激光光束与细胞正交时，一般会产生两种荧光信号。一种是细胞自身在激光照射下，发出微弱荧光信号，称为细胞自发荧光；另一种是经过特异荧光素标记细胞后，受激发照射得到的荧光信号，通过对这类荧光信号的检测和定量分析，就能了解所研究细胞参数的存在与定量,16,流式细胞仪产生的信号,非荧光信号,颗粒度,细胞大小,17,上述两种信号都是来自于激光原光束，目前采用这两个参数组合，可区分不同种类的细胞亚群，同时可获得细胞相关的重要信息，下图（图3-2）为FSC和SSC组成的二维散点图，从图中可以很容易把全血样本中淋巴细胞、单核细胞及粒细胞区
8、分开。,18,19,FCM 测量数据的存贮、显示和分析,目前FCM 数据的存贮的方式均采用列表排队（list mode）方式。因为目前FCM 所采用的都是多参数指标，荧光参数标记物如是4 个，采用list mode 方式可大量地节约内存和磁盘容量。当一个细胞被测4 个参数，那么获取10000 个细胞，所占容量为410000 个（字或双字）。同时当只检测1 个参数时（如DNA），可灵活的关闭其它3 个参数，节省3/4 的空间。数据文件虽然有易于加工处理分析的优点，但缺乏直观性。数据的显示通常有一维直方图、二维点图、等高线图、密度图等几种。,20,FL5(PE-cy7),FL3(PerCP),FL
9、2(PE),FL1(FITC),SS,488/10,530/30,FS,488/10,585/40,670LP,785/60,491/LP,550LP,645LP,660/20,785/60,740LP,488/10,反光镜,FL6(APC-cy7),FL4(APC),反光镜,FL1,FL2,01,流式细胞仪工作原理模拟图,21,流式细胞仪临床应用,22,01,流式细胞术的检测范围及特点,流式细胞术在流动状态中检测细胞或颗粒的各项特性,检测范围样本种类：各种细胞（如外周血，骨髓，细针穿刺，灌洗液，实体组织，悬浮或贴壁培养的细胞）微生物，人工合成微球等;可检测免疫复合物、DNA、RNA、蛋白质、
10、脂质体、细胞器、Ca2+等,特点特异性强、灵敏度高、速度快；并能实现多参数分析；,紫色采血管,血液样本要求：抗凝（EDTA)全血2-3ml样本常温保存不超过24小时进行免疫球蛋白或白蛋白治疗患者，三天内不送检,23,02,流式项目淋巴细胞亚群,24,免疫系统,02,感染性疾病、自身免疫病、过敏性疾病、妊娠失败、移植排斥、恶性肿瘤、衰老与亚健康等都有免疫平衡的异常变化,25,淋巴细胞亚群与免疫功能,02,T4细胞（CD3+CD4+）诱导/辅助性T细胞,T8细胞（CD3+CD8+）抑制/细胞毒性T淋巴细胞,B细胞（CD3-CD19+)分泌抗体,NK细胞（CD3-CD16+CD56+）,T细胞（CD
11、3+）细胞免疫主力军,特异性免疫,体液免疫主力军,非特异性免疫,淋巴细胞亚群（T/B/NK）：淋巴细胞及其亚群的消长最能反映机体在不同条件下免疫功能的变化。主要用于与免疫系统明显相关疾病的辅助诊断、判断病情、评估预后、指导治疗及疗效监测,免疫力指标分析：,26,淋巴细胞亚群分析方法比较,02,淋巴细胞亚群检测方法包括：显微镜法、酶联免疫法和流式细胞术法流式细胞术操作简便、快速、标本用量少，特异性高、稳定性和重复性好，临床实验室检测淋巴细胞亚群的标准方法。,淋巴细胞亚群检测规范,27,淋巴细胞亚群分析肿瘤疾病,02,肿瘤发生、发展与免疫：恶性肿瘤患者常存在免疫抑制现象。受损的免疫系统不能有效识别
12、和杀伤肿瘤细胞。淋巴细胞亚群的分类和计数，能够真实反映肿瘤患者的免疫功能状态，在肿瘤的鉴别诊断、临床分期、疗效监测和预后判断中发挥着重要作用。,1 诊断与鉴别诊断对淋巴细胞恶性增殖性疾病进行初步筛查，如，淋巴瘤，淋巴瘤白血病等。通过淋巴细胞亚群检测有助于良性与恶性肿瘤的鉴别。肺癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌患者常表现为CD3细胞、CD4细胞及CD4/CD8比值降低，CD8细胞升高。肺良性疾病、卵巢良性肿瘤和子宫肌瘤患者与健康对照者的细胞亚群和CD4/CD8比值无明显明显。,28,动态监测免疫功能肿瘤疾病,02,2 临床分期不同发展阶段的肿瘤患者，免疫功能状态也存在很大差异。随病程进展，CD3、
13、CD4、CD4/CD8逐渐降低，CD8逐渐增高。期：CD4、CD8未见明显抑制，CD4/CD8比值基本正常；期：CD4减少明显，CD8增高，CD4/CD8比值下降；-期：CD4显著减少，CD8明显降低，CD4/CD8下降或倒置。,29,动态监测免疫功能肿瘤疾病,02,3 疗效观察监测治疗前后患者免疫功能恢复的动态过程，有助于医生确认治疗方案是否有效。,现代肿瘤医学2010年09月第18卷第09期,4 判断预后恶性肿瘤病人的免疫功能多异常，手术、放疗、化疗等往往造成患者免疫功能进一步低下；导致患者发生感染、肿瘤复发转移或者二次肿瘤的危险增高。临床随访中动态检测免疫功能有助于判断病情的发展状态免疫
14、状态的恢复者，常预后较好，复发或转移几率小免疫状态恶化则预示较高的复发和转移风险，预后差,化疗期间若联合使用免疫增强剂（如干扰素、左旋咪唑等），流式检测淋巴细胞亚群可见患者细胞免疫功能提高，化疗副作用减轻，患者生存质量提高。,30,动态监测免疫功能肿瘤疾病,02,案例：对39例术后化疗的期胃腺癌患者，利用流式细胞术，分别对术前第1天，术后1、3和6个月的静脉血液循环中淋巴细胞亚群（CD3/CD4/CD8/CD19/CD16+56/CD25）进行检测,结果显示，在整个观察期，复发组患者外周血的CD3+和CD4+T细胞和CD4+/CD8+比值始终低于未复发组提示与CD3+和CD4+T细胞减少相关的
15、免疫抑制是III期胃癌患者术后复发的危险因素,31,动态监测免疫功能肿瘤疾病,02,案例：随访研究提示循环系统中CD19+淋巴细胞比例高的胃癌患者较CD19+淋巴细胞比例低的患者预后良好,32,动态监测免疫功能肿瘤疾病,02,5 指导肿瘤免疫治疗 免疫因子制剂(IL-2,干扰素)、胸腺肽、活化的淋巴细胞(CIK,LAK),肿瘤疫苗等是目前临床常用提高肿瘤患者免疫功能的方法,淋巴细胞亚群检测在整个细胞治疗过程中的质量控制和疗效评价环节起到至关重要的作用,33,动态监测免疫功能肿瘤疾病,02,【临床案例】乳腺癌患者，女，52岁，经左乳切除和化疗治疗。停药一年后，肿瘤转移至肺。T淋巴细胞亚群检测：C
16、D4、CD3、CD4/CD8在化疗期间和停药各阶段均明显降低，而CD8则在停药后06月、612月升高，提示该患者细胞免疫功能低下，免疫功能明显受抑制。,治疗（化、放疗等）前后精确检测T淋巴细胞亚群，准确判断患者免疫功能由粗放化向精细化转变,改善治疗：化疗中，同步给予免疫增强剂（如干扰素、左旋咪唑等）后，CD8下降，CD4、CD4/CD8升高，机体自身抗肿瘤免疫效得到有力发挥，患者恢复良好,34,淋巴细胞亚群分析风湿免疫病,02,疾病机理风湿免疫病多由于自身免疫耐受的破坏，机体产生自身反应性淋巴细胞和自身抗体，免疫功能的紊乱，常表现为淋巴细胞亚群不同程度地升高或降低比如：RA活动期常表现为CD4
17、+细胞、CD4/CD8比值，CD8+细胞 SLE活动期常表现为CD4+细胞、CD4/CD8比值，CD8+细胞 非活动期，淋巴细胞亚群与正常人无明显差异，故可根据CD4+、CD8+、CD4/CD8情况判断活性期与非活性期,（Clin Rheumatol.2000,19:270274）,35,淋巴细胞亚群分析风湿免疫病,02,免疫指标疗效监测TBNK检测是疗效观察的重要依据，治疗有效时常表现为CD4、CD8、CD4/CD8比值恢复正常举例：SLE治疗前，CD4/CD8降低；联合使用激素和甲氨蝶呤治疗后，比值恢复正常，,（Clin Rheumatol.2000,19:270274）,36,淋巴细胞亚
18、群分析风湿免疫病,02,风湿免疫病生物治疗的疗效预测监测美罗华（利妥昔单抗）首个以B细胞为靶标治疗RA的药物。还用于SLE和多发性硬化症（MS）等自身免疫性疾病。是全球第一个被批准用于临床治疗非霍奇金淋巴瘤（NHL）的单克隆抗体，用于复发或化疗抵抗性B淋巴细胞型NHL。作用机理自身免疫病的发病与B细胞相关，美罗华可选择性地杀灭B细胞美罗华治疗后，B 淋巴细胞的下降得越早、清除得越彻底（0.1个/L），治疗效果越好,（Arthritis Rheum.2013,65:2783-90）,37,淋巴细胞亚群分析风湿免疫病,02,免疫指标美罗华治疗不良反应的监测美罗华的副作用消除 B 淋巴细胞的同时，部
19、分患者的 T 淋巴细胞也会下降。CD4+低于500个/L，可能导致机会性感染的发生。TBNK检测用于监测美罗华治疗过程中CD4+T细胞的水平。若出现CD4+细胞低于500个/L，需要医生考虑预防性使用抗生素或改变治疗方案,（Arthritis Rheum.2013,65:2783-90）,38,淋巴细胞亚群分析风湿免疫病,02,淋巴细胞亚群在风湿免疫病治疗中不良反应监测中的作用,一些细胞毒药物（具有较强骨髓抑制作用），激素等，也可用于风湿免疫病的治疗。均对免疫功能有较大影响，因此应定期通过TBNK监测病人的免疫状态。若免疫细胞数量低于正常值，临床应考虑预防性使用骨髓刺激药物和抗生素。临床上可以
20、通过白细胞计数、TBNK检测等监测免疫功能的变化。但由于化疗药物主要抑制的是各种淋巴细胞，因此以淋巴细胞亚群作为监测项目更有意义。,常用治疗药物甾体抗炎药：如布洛芬细胞毒药物：如环磷酰胺、甲氨蝶呤、环孢素A糖皮质激素：如泼尼松生物制剂：如美罗华（利妥昔单抗）,39,老年人群的免疫功能评估,02,老年人群中普遍存在免疫老化现象：随年龄增长，机体各器官功能下降，免疫系统功能发生退行性改变，机体对感染性疾病易感性升高。免疫老化所致的免疫紊乱，是导致心脑血管疾病、肿瘤、感染等老年性疾病的重要因素。,40,老年病人手术围手术期免疫监测术前风险评价，预防术后感染,02,心脏手术示例：心脏手术后，年龄越大的
21、老年患者（如75岁）总淋巴细胞数、CD3细胞数和B细胞数更低（与60岁的老年患者比较），该结果提示高龄老年患者术后免疫功能低下，具高度感染的风险,骨关节手术 老年人骨质疏松，易发生骨折。如进行关节成形术的老年患者，当免疫功能低下，易诱发感染。如术后发生肺炎常表现：CD4、CD8和B细胞百分比减少发生泌尿系统感染：CD4细胞、CD8细胞减少。因此淋巴细胞亚群百分比降低是术后感染的一个重要危险指标。不同年龄患者，其B细胞、CD4细胞百分比也呈现不同水平，特别是CD4细胞百分比随着年龄增大逐渐降低。,（Rev Ortop Traumatol(Madr.).2007,51:309-13）,（Journ
22、al of Laboratory and Clinical Medicine.1997,129:592-602）,特点：手术创伤、麻醉、围手术期输血均可产生免疫抑制；,【术前】可预测患者手术预后情况，特别是老年患者（提高老年患者免疫水平，可增加手术安全性）。【术后】及时掌握手术后恢复进程，减少患者手术并发症、术后感染发生率及死亡率（老年患者，术后3d内是并发感染的危险期）。,41,淋巴细胞亚群分析健康体检,02,免疫与健康免疫系统的稳定与平衡是人体抵抗病原微生物的侵袭，保持健康的前提。不良的生活习惯、长期处于竞争激烈、超负荷运转的强压紧张状态中，均容易引起机体免疫功能紊乱，形成亚健康状态。免疫
23、功能紊乱会导致身体抵抗力差，体质变的敏感，不仅容易被细菌或病毒感染，还容易发生过敏反应，甚至出现自体免疫错乱，产生自身免疫病。定期进行体检，监测机体免疫状态，有助于预防疾病的发生。,42,淋巴细胞亚群分析与健康体检亚健康、慢性疲劳综合症,02,慢性疲劳综合症患者可见免疫功能紊乱 慢性疲劳综合症常表现各种不适的自我感觉，但临床各项检查和化验结果常为阴性。淋巴细胞亚群检测可见患者免疫功能紊乱，若不加以干预，免疫力进一步低下会诱发各种疾病。,健康体检与免疫“识别”亚健康人群 一项针对广州市非体力劳动者的亚健康状况的流行病学研究表明，亚健康人群免疫力低下表现为：CD3细胞、CD4细胞百分比和CD4CD
24、8比值显著降低CD4细胞绝对值降低。,43,免疫功能检测与中医药完美结合,02,中医诊病疗特点：辨证论治，从机体整体入手，扶正祛邪中医的重要贡献：治未病（治未病之病）,淋巴细胞亚群：反映机体免疫功能的重要指标，可为中医临床辨证分型和治疗提供客观的免疫学依据。,证候是中医学理论的核心。施治之时，皆据证议法，谴药立方，其着眼点全在于证候。,44,中医药免疫检测与亚健康状态,03,免疫力检测使得这个理念完美结合许多白领、公务员、教师、医生工作繁忙透支生命，处于亚健康状态，这时免疫力处于低下状态。检测 CD 系列细胞数值偏低，中医辨证为“虚证”。虽然未发病（西医无法诊断出疾病），但需要调理和干预，应用
25、中医的理论辩证施治，有明显的效果，起到西医起不到的作用。,“上医治未病”扁鹊曰：上医治未病之病，中医治将病之病，下医治已病之病 中医、中药治未病之病，这是防病、治病的重要理念。,45,中医药免疫监测与亚健康状态,02,女，28岁，主诉疲倦乏力、睡眠不佳，易感冒，无其他器质性疾病。舌淡，苔薄白，表面粗糙，脉浮虚。属正气不足，元气虚弱。辅以T淋巴细胞亚群检测，CD4偏低、CD4/CD8在正常范围下限。治疗：用玉屏风散，生黄芪120克，炒白术180克，防风60克，制成散剂，每日9克，代茶饮。,一疗程后，患者CD4、CD4/CD8显著升高，主诉症状明显改善，感冒次数减少，说明患者正气提升，免疫功能得到
26、有效提高。,论文发表：加味玉屏风汤对提高慢性病患者CD4指标临床观察 上海中医药杂志,2007年第41期第10卷,46,免疫功能与感染性疾病,02,免疫功能紊乱，易引发感染性疾病,感染，同时可直接抑制、干扰和损伤免疫系统,淋巴细胞介导的免疫功能在人体抗感染中发挥重要作用在抗菌或抗病毒时，进行免疫调节，提高疗效，可少用或慎用抗菌素。指导抗菌素的应用。,47,淋巴细胞亚群变迁的意义感染性疾病,02,细菌性感染T4细胞T8或T4/T8比值,病毒/胞内菌/寄生虫感染T8细胞T4或T4/T8比值,上述变化是指感染的初期中期；全身性感染变化幅度大于局部性感染；不同病原微生物感染引起的变化幅度不同；不同个体
27、的淋巴细胞反应性不同，变化幅度有差别；晚期，患者T、T4、T8细胞全线减少。,T淋巴细胞,自身免疫性性疾病B细胞轻微 IgM,细菌性感染B细胞 IgG,变态反应B细胞 IgE,B淋巴细胞,NK细胞,48,淋巴细胞亚群分析与感染性疾病艾滋病,02,艾滋病（1）疾病诊断：CD4细胞与HIV/AIDS诊断AIDS患者CD4+T淋巴细胞计数的进行性减少与疾病恶化进程呈正相关，是HIV感染的特征性变化之一WHO推荐使用CD4+T淋巴细胞计数作为AIDS疾病确诊及病情恶化程度的检验标准。,进行性HIV感染的诊断标准：III期和IV期临床症状 和/或 CD4细胞350/mm3。成人及15岁以上青少年符合以下
28、一项者即可诊断为艾滋病CD4细胞200/mm3有成人艾滋病指征性疾病（C组临床表现）15岁一下儿童符合以下一项者即可诊断为艾滋病CD4细胞25%（11月龄），或20%（12-35月龄），或15%（36-59月龄），或 200/mm3（5-14岁）有小儿艾滋病指征性疾病（F组临床表现）,（WS 293-2008 艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准，2008）,49,淋巴细胞亚群分析与感染性疾病艾滋病,02,CD4细胞与HIV/AIDS治疗启动治疗时机成人：CD4细胞500/mm31-5岁儿童：CD4细胞500/mm3或25%III期和IV期临床症状 和/或 CD4细胞350/mm3合并活动性结核；合
29、并活动性HBV，需要抗HBV治疗；妊娠；配偶或固定性伴侣中HIV阳性的一方1岁婴儿,治疗监控病毒学监测：HIV RNA拷贝免疫学监测：CD4细胞,治疗失败、更换治疗方案病毒学失败：HIV RNA拷贝免疫学失败：CD4细胞下降到或低于基线水平，或降低至峰值的50%，或持续低于100/mm3临床失败：机会性感染或肿瘤,50,淋巴细胞亚群分析与感染原发性免疫缺陷病,02,流式检测淋巴细胞亚群可作为原发性免疫缺陷病常规筛查项目,免疫指标原发性免疫缺陷病分型和辅助诊断,51,淋巴细胞亚群分析与感染性疾病传染性单核细胞增多症,02,细胞免疫传染性单核细胞增多症（IM）血象中异型淋巴细胞增多（多为T淋巴细胞
30、，且以CD8+T细胞为主）。B细胞是EBV的靶细胞异淋手工镜检操作时间长，易受主观影响TBNK检测可辅助传单的诊断：CD3、CD8细胞明显 CD4、CD4/CD8、B细胞显著,【案例一】某女孩，11岁诊断传单，CD4细胞减少，占8%左右，未进行干预治疗，康复后一直没有回升，16岁并发NK细胞瘤。【案例二】某男孩，16岁诊断传单，CD4细胞减少，12%左右；临床给予积极治疗，康复复查24%左右，至今还是24%。,IM有转化成血液病的风险加用免疫调节药物促进疾病的恢复，随访监测淋巴细胞亚群。,52,淋巴细胞亚群分析与感染性疾病反复呼吸道感染,02,广东医学,2012,33（4）,通过检测CD3、C
31、D4、CD8了解RRTI患儿用药前后免疫功能变化，从而判断药效，指导选药方案。,三者联合应用，能明显提高患儿免疫功能，减少呼吸道感染发生率，安全无不良反应。,玉屏风颗粒联合铁剂和锌剂，可提高反复呼吸道感染患儿免疫功能。,儿童反复呼吸道感染（RRTI）免疫功能低下，与患儿反复呼吸道感染的发生密切相关：患儿的CD3、CD4、CD4/CD8比值均明显低于正常儿童适当应用免疫调节剂增强，改善免疫功能，打破免疫功能紊乱的恶性循环，增强机体淋巴细胞对抗原的免疫应答能力，从而提高体内免疫球蛋白的水平，是治疗和预防RRI的关键。,53,淋巴细胞亚群参考范围,02,0-12岁中国汉族儿童外周血淋巴细胞亚群正常值
32、参考范围,成人外周血淋巴细胞亚群正常值参考范围,54,03,流式项目HLA-B27,55,HLA-B27简介及相关疾病,03,HLA-B27：是人体白细胞抗原，是HLA-B27基因（属于型MHC基因）表达的产物，基本上在机体中所有有核的细胞上均表达，尤其是淋巴细胞的表面有丰富的含量。,HLA-B27与相关疾病的易感性,56,HLA-B27与脊柱关节病,03,脊柱关节病（Spondyloarthritis,SpA）SpA属于风湿性疾病的范畴，主要包括五个亚型：强直性脊柱炎(AS)，发病率0.20%-0.4%银屑病关节炎 炎症性肠病关节炎 反应性关节炎 未分化SpA 中医认为：该病属“伤筋”、“痹
33、证”范畴,因风、寒、湿三气夹至,气血瘀滞、脉络受阻、筋脉失和所至。,早期诊断、早期治疗,将影响脊柱关节病的远期预后。,57,HLA-B27脊柱关节病诊断标准,03,脊柱关节病诊断标准的变迁2009年国际脊柱关节病评估工作组（ASAS）中轴SpA诊断标准增加HLA-B27和MRI作为重要的诊断指标，使早期患者确诊的敏感性大幅提升,影像学提示骶髂关节炎+至少一项SpA临床表现,HLA-B27阳性+至少两项SpA临床表现,或,SpA临床表现：（1）炎性背痛；（2）关节炎；（3）起止点炎（跟腱）；（4）眼葡萄膜炎；（5）指（趾）炎；（6）银屑病；（7）克罗恩病或溃疡性结肠炎；（8）对非甾体抗炎药（NSAIDS）反应良好；（9）SpA家族史；（10）HLA-B27阳性；（11）C反应蛋白（CRP）升高。,58,脊柱关节病强制性脊柱炎,03,强直性脊柱炎（AS）,脊柱强直性脊柱炎早期以慢性双侧骶髂关节炎为特征；晚期骨突关节融合，韧带赘形成，脊柱韧带钙化，导致脊柱从颈到骶骨完全强直。,腰背痛骶髂部疼痛晨僵腰椎胸颈等脊椎疼痛活动受限脊柱畸形坐骨神经痛 外周关节炎,骨科,外周关节炎跖底筋膜炎跟腱炎肌腱末端炎银屑病 炎性肠病,风湿免疫科,59,HLA-B27在强制性脊柱炎鉴别诊断中的应用,03,与类风湿关节炎（RA）的鉴别诊断,与弥漫性特发性骨肥厚综合征的鉴别诊断,60,谢谢,
