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1、高效液相色谱常见故障的判定故障可能原因解决方法（一） 保留时间变化1 柱温变化柱恒温，必要时需配置恒温箱2 等度与梯度间未能充分平衡至少用10倍柱体积的流动相平衡柱3 缓冲液容量不够用25mmol/L的缓冲液4 柱污染每天冲洗柱5 柱内条件变化稳定进样条件，调节流动相6 柱快达到寿命采用保护柱（二） 保留时间缩短1 流速增加检查泵，重新设定流速2 样品超载降低样品量3 键合相流失流动相PH值保持在37.5检查柱的方向4 流动相组成变化防止流动相蒸发或沉淀5 温度增加柱恒温（三） 保留时间延长1 流速下降管路泄漏，更换泵密封圈，排除泵内气泡2 硅胶柱上活性点变化用流动相改性剂，如加三乙胺，或采用
2、碱至钝化柱3 键合相流失同前（二）34 流动相组成变化同前（二）45 温度降低同前（二）5（四） 出现肩峰或分叉1 样品体积过大用流动相配样，总的样品体积小于第一峰的15%2 样品溶剂过强采用较弱的样品溶剂3 柱塌陷或形成短路通道更换色谱柱，采用较弱腐蚀性条件4 柱内烧结不锈钢失效更换烧结不锈钢，加在线过滤器，过滤样品5 进样器损坏更换进样器转子（五） 鬼峰1.进样阀残余峰每次用后用强溶剂清洗阀，改进阀和样品的清洗2.样品中未知物处理样品3.柱未平衡重新平衡柱，用流动相作样品溶剂 （尤其是离子对色谱）4.三氟乙酸（TFA）氧化（肽谱）每天新配，用抗氧化剂5.水污染（反相）通过变化平衡时间检查水
3、质量，用HPLC级的水（六） 基线噪声1 气泡（尖锐峰）流动相脱气，加柱后背压2 污染（随机噪声）清洗柱，净化样品，用HPLC级试剂3 检测器灯连续噪声更换氘灯4 电干扰（偶然噪声）采用稳压电源，检查干扰的来源（如水浴等）5 检测器中有气泡流动相脱气，加柱后背压（七） 峰拖尾1 柱超载降低样品量，增加柱直径采用较高容量的固定相2 峰干扰清洁样品,调整流动相3 硅羟基作用加三乙胺，用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度，降低流动相PH值，钝化样品4 同前（四）4同前（四）45 同前（四）3同前（四）36 死体积或柱外体积过大连接点降至最低，对所有连接点作合适调整，尽可能采用细内径的连接管7 柱效下降用较低腐蚀条件，更换柱，采用保护柱（八） 峰展宽1 进样体积过大同（四）12 在进样阀中造成峰扩展进样前后排出气泡以降低扩散3 数据系统采样速率太慢设定速率应使每峰大于10点4 检测器时间常数过大设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的10%5 流动相粘度过高增加柱温，采用低粘度流动相6 检测池体积过大用小体积池，卸下热交换器7 保留时间过长等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱8 柱外体积过大将连接管径和连接管长度降至最小9 样品过载进小浓度小体积样品
