植物组织培养分析课件.ppt

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1、专题3 植物的组织培养技术课题1 菊花的组织培养,授课人:武汉市第49中学 刘海艳,1958年,美国科学家斯图尔德将胡萝卜韧皮部的一些细胞进行培养,由于细胞分化而最终发育成完整的新植株。,植物组织培养的过程,一、植物组织培养的基本过程,细胞分化,概念:在植物个体发育的过程中,细胞在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程叫做细胞分化。,一、植物组织培养的基本过程,脱分化:,愈伤组织:,定义:由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程,称作植物细胞的脱分化或者去分化。,定义:离体的植物组织或细胞,培养一段时间后,会通过细胞分裂形成愈伤组织。,一、植物组织培养的基本过程,愈伤组织特点:细胞排列

2、疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞。,愈伤组织:,一、植物组织培养的基本过程,再分化,定义:脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成根或芽等器官,这个过程称作再分化。,植物组织培养的流程图,一、植物组织培养的基本过程,理论基础:植物细胞的全能性,已经分化的植物细胞,仍然具有发育成完整个体的潜能。,思考1:细胞为什么具有全能性?,每一个活细胞中都包含本物种的全部遗传信息。,思考2:在生物体内,细胞能否表现出全能性?为什么?,不能。在生物体内,基因选择性表达。,思考3:植物细胞在什么情况下才能表现出全能性?,首先要离体,菊花的组织培养视频1,二、影响植物组织培养的因素,

3、MS培养基成分及含量,大量元素:N、P、K、Ca、Mg、S,微量元素:Fe、Mn、B、Zn、I,微量元素:Mo、Cu、Co,生长因子,碳源、氮源、维持渗透压,凝固剂,二、影响植物组织培养的因素,矿质营养(大量元素、微量元素)有机营养(甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖),激素,(使用顺序,二、影响植物组织培养的因素,1、相对特殊的营养、激素、环境,矿质营养(大量元素、微量元素)有机营养(甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖),激素,(使用顺序,生长素,细胞分裂素 mmol/L,mmol/,、用量比例等),环境因素(如pH:5.8),外因,二、影响植物组织培养的因素,2、植物材料的选择,不同的植物组织

4、培养的难易程度差别很大,枸杞愈伤组织的芽诱导较难,同一种植物材料,材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。,未开花的菊花植株,选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝,内因,菊花的组织培养视频2,制备MS固体培养基,外植体消毒,接种,培养,栽培,移栽,三、实验操作,用于离体培养的植物器官或组织片段,体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液,无菌,无菌箱,高度分化的植物细胞全能性表达的条件:,离体 营养物质(无机物、有机物)激素诱导 适宜的环境(pH、温度、光照)无菌操作,四、结果分析与评价,请分析培养瓶中出现菌斑的原因。,污染原因:1、培养基及接种器具灭菌不彻底;2、外植体消毒不彻底;3、接种操作没有做到严格无菌;4、培养环境不清洁。,四、结果分析与评价,请分析图中培养容器内愈伤组织只分化出根,难以形成试管苗的原因。,再分化阶段,生长素用量大于细胞分裂素用量,利于根的分化,抑制芽的形成。,一般来说,容易进行无性繁殖的植物,也容易进行组织培养。,五、课题延伸,

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