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1、CTAB法所需溶液配置CTAB法所需溶液配置 一、 提取液的配置 1、1M Tris-Hcl 10ml 称121.1g Tris溶于800ml水中，搅拌条件下加入浓盐酸。待接近所需PH时，用稀Hcl准确调PH值至所需值，加入重蒸水至总体积1L，分装，高压灭菌。 注：如调PH 7.4则大约加浓盐酸70ml，PH 7.6加60ml，PH8.0加42ml 2、5M Nacl 14ml 称292.2g Nacl，溶于800ml蒸馏水中，此时已接近饱和，所以溶解较慢，完全溶解后用蒸馏水定容至1L，分装，高压灭菌。 3、0.5M EDTA溶液 10ml 称186.1g EDTA-Na22H2O加入800m
2、l重蒸水，用磁力搅拌器搅拌，加入NaOH调PH至8.0，重蒸水定容至1L，灭菌。 调PH值：用固体NaOH约20g左右 用10mol/L的NaOH溶液约70ml 10M NaOH的配置：称取40gNaOH溶于蒸馏水后定容至100ml 4、CTAB 1g 5、ddH2O 65ml 6、2M -巯基乙醇 4 保存 1ml 方法：1 、2、 3、4、 5加热溶解后加入6 二、 氯仿/异戊醇：贮于棕色瓶中 取氯仿480ml，再在瓶中加入异戊醇20ml，摇匀 注：最好现配现用 三、 RNase 1） 称取100mg RNase溶于10ml 10mmol/LTris-cl，15mmol/L Nacl中，于
3、100加热15min，缓慢冷却至室温，分装后于-20保存。 2） 25mg加2.5ml TE缓冲液，于100水浴，加热15min，缓慢冷却至室温，不要贴底，否则会产生絮状沉淀。 注：水浴锅达不到100，用电炉子放上闷罐，水多些，放帖底。 3） 用水溶解RNase，终浓度10mg/ml，煮沸20min，缓慢冷却，分装，于-20下保存。 四、 TE：有7.4、7.6、8.0三种TE溶液 分别由1ml的PH7.4、7.6、8.0的1mol/LTriscl缓冲液与0.2mlPH8.0的0.5mol/LEDTA溶液混合后，用重蒸水定容至100ml 五、 异戊醇：-20冰柜保存 六、 70% 乙醇 70ml无水乙醇加30ml ddH2O
