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1、初级检验技师考试血小板聚集试验(PAgT) 原理: 采用浊度法和电阻法来进行测定。 参考值: 知道。 临床意PAgT义: 高: PAgT低: 增反映血小板聚集功能增强。见于心肌梗死、心绞痛、糖尿病、脑血管病变、妊娠高血压综合征、静脉血栓形成、肺梗死等。 减反映血小板聚集功能减低,见于尿毒症、肝硬化、MDS、原发性血小板减少性紫癜、急性白血病等。 注意事A:采血顺利,避免反复穿刺将组织液抽到注射器内,或将气泡混入; 项: B:抗凝剂采用枸橼酸钠抗凝,不能以EDTA作为抗凝剂; C:阿司匹林、潘生丁、肝素、华法令等药物均可抑制血小板聚集,故采血前不应服用此类药物; D:测定应在采血后3h内完成,时
2、间过长会导致聚集强度和速度降低。 血小板释放反应产物测定:-血小板球蛋白和血小板第四因子其特有蛋白。 主要搞清其原理: 参考值: 临床意义: 它也是血小板活化的重要检测指标。 知道。 增高见于血栓前状态和血栓性疾病,如心肌梗死、脑血管病变、尿毒症、妊高征、糖尿病、肾病综合征、弥散性血管内凝血、静脉血栓形成等。 注意事项: 注意避免血小板体外被活化,否则导致假阳性。另外,当肾脏排泄功能异常、血小板破坏过多时,血浆-TG和PF4也可增高,因此,在评价其临床意义时应去除外影响因素。 血浆血栓烷B2测定: 要搞清其原理。 参考值: 增高: ng/L 见于心肌梗死、心绞痛、糖尿病,动脉粥样硬化、妊高征等
3、。减低见于环氧酶或TX合成酶缺乏、服用抑制环氧酶或TX合成酶的药物。 注意事项: 应避免血小板体外被活化,否则导致假阳性。 血小板膜糖蛋白(GP)测定 1页 要搞清其原理。CD62P又称P-选择素,GMPl40、CD62P和CD63在质膜上高表达被视为血小板活化的特异性分子标志物。目前多采用流式细胞术准确测定血小板GP。 例题:GMPl40在膜上表达是什么细胞活化的标志: A血小板 B粒细胞 C红细胞 D巨核细胞 E淋巴细胞 答案:A 参考范围:见书中表2-29-2。 临床意义: A:血小板功能缺陷:GPb缺乏见于巨大血小板综合征;GPb/a缺乏见于血小板无力症;活化后CD62P表达减低或缺乏
4、见于血小板贮存池缺陷病。 B:血栓前或血栓性疾病:如急性心肌梗死、心绞痛、急性脑梗死、DM、高血压和外周动脉血管病等。 注意事项:分析血小板活化时必须注意体外激活,避免出现假阳性。 血块收缩试验(CRT): 要搞清其原理。 参考范围: 临床意义: 血块收缩率48%64%。 减低:常见于原发性血小板减少性紫癜、血小板增多症、血小板无力症、红细胞增多症等。增高:见于先天性因子X缺乏症等。 5凝血因子的检测 血浆纤维蛋白原含量测定: 原理: 有凝血酶凝固法、比浊法和免疫学方法。 参考范24g/L。 围: 临床意增高见于糖尿病、急性心肌梗死、急性传染病、结缔组织病、急性肾炎、多发性骨义: 髓瘤等。降低
5、见于先天性低或无FIB血症、遗传性FIB异常、DIC、原发性纤溶症、重症肝炎和肝硬化等。 2页 方法学评Clauss法和PT衍生法测定的是纤维蛋白原的功能;免疫学方法测定的是纤维蛋白价: 原的含量,但此法特异性不强。 例题:下列检测方法属于凝血因子检测的是: A血小板生存时间 B血浆纤维蛋白原含量测定 C血块收缩试验 D抗凝血酶测定 E血浆蛋白S测定 答案:B 血浆因子、和的促凝活性测定 原理: 一期法:将待测血浆分别与乏F、F、F和F基质血浆混合,进行APTT测定。 临床意增高见于静脉血栓形成、肺栓塞、妊高征、晚期妊娠、口服避孕药等。 义: F: F: F: F: C减低见于血友病A、血管性
6、血友病、DIC; C减低见于血友病B、肝脏病、维生素K缺乏症、DIC、口服抗凝药物; C减低见于因子缺乏症、肝脏疾病、DIC等; C减低见于先天性因子缺乏症、肝脏疾病、DIC和某些血栓性疾病等。 注意事项: A:F:C增高时主要在急性相反应时和严重肝实质损伤时有明显升高。F:C减低时,需与vWF含量同时测定,以筛选出vWF缺陷的可能。 B:目前认为,凝血因子促凝活性测定不必等待逐级筛选,可以在单纯APTT延长时检测。 C:受检标本检测凝固时间不在标准曲线范围可稀释后检测。 血浆因子、V、和X的促凝活性测定 原理: 将待测血浆分别与F、FV、F和FX基质血浆混合,进行PT测定,作出标准曲线。 临
7、床意增高:见于血栓前状态和血栓性疾病。 义: 减低:见于维生素K缺乏症(FV除外)、肝脏疾病、DIC等。目前因子F:C、FV:C、F:C和FX:C的测定主要用于肝脏受损的检查。 血浆因子定性试验 3页 原理: 在钙离子作用下因子能使溶解于尿素溶液的可溶性纤维蛋白单体变为不溶性纤维蛋白。 参考范围: 临床意义: 24h内纤维蛋白凝块不溶解。 在临床上若发现伤口愈合缓慢、渗血不断或怀疑有因子X缺陷者,可首选本试验。若纤维蛋白在24h内完全溶解,表示因子缺乏,见于先天性因子缺乏或获得性因子缺乏。 血浆因子亚基抗原测定 原理: 凝血因子由两个亚基和构成。检测方法是免疫火箭电泳法。 参考范围: 临床意义
8、: 6抗凝物质测定 抗血浆抗凝血酶原理为发色底物法。参考范围:108.5%5.3% 凝血酶活性测定: 抗原检测: B、参考范围:0.290.06g/L 测定 C、临床意义:增高见于血友病、白血病和再生障碍性贫血等的急性出血期以及口服抗凝药物治疗过程中。减低见于先天性和获得性AT-缺乏症。 D、评价:标本不能用肝素抗凝;AT-抗原和活性测定最好同时检测,以利于进行先天性AT-缺乏的分型;在疑难DIC诊断时,AT-水平下降具有诊断价值。 血浆蛋白C(PC)测定 血浆蛋白C活性采用发色底物法,结果显色的深浅与受检血浆中PC的含量成平行关系。根据(PC:A)测定原理: 标准曲线计算出含量。 血浆蛋白C
9、抗原采用免疫火箭电泳法。 (PC:Ag)测定原临床意义: 理: 减低见于先天性PC缺陷:根据PC:A和PC:Ag可分为I型(PC:Ag与PC:A均减低)和型(PC:Ag正常而PC:A减低);获得了解。 同血浆因子定性试验。 4页 性PC缺陷:DIC、肝功能不全和呼吸窘迫综合征等。 血浆蛋白S测定 血浆总蛋白S血浆总蛋白S(TPS)包括游离PS(FPS)和与补体C4结合的PS(C4bp-PS)。常用免测定原理: 疫学方法(火箭电泳、酶联免疫法)来检测。 临床意义: 减低见于先天性和获得性PS缺陷症,后者见于肝脏疾病、口服抗凝药物等。 血浆游离蛋白采用凝固法。受检者凝固时间可从标准曲线中计算出FP
10、S的含量。 S(FPS)测定原理 临床意义: 同上 例题:临床上血浆总蛋白S降低常见于: A系统性红斑狼疮 B先天性PC缺陷 C获得性PS缺陷症 D血小板减少症 E白血病 答案:C 7病理性抗凝物检测 狼疮抗凝物 筛检试验原理: 在脑磷脂和激活剂存在的条件下,检测血浆凝固时间(即质(LAC)测定 临床意义: APTT)。若被检血浆中有狼疮抗凝物质存在,则血浆凝固时间(APTT)延长。 阳性见于有狼疮抗凝物质存在的患者、先天性凝血因子缺乏、口服抗凝剂以及DIC等。 确诊试验原理: 筛检阳性血浆,若有狼疮抗凝物质存在,则再加入血小板溶解物后,延长的APTT就会被纠正。 结果判断: 临床意义: 如何
11、分析。 主要见于系统性红斑狼疮(SLE)、自发性流产、多发性血栓形成和血小板减少症等。 临床评价: 也可利用改良的Russell蛇毒稀释试验进行检测,该试验5页 不受F及F异常的影响。 凝血因子抑制物检测 原理: 将受检血浆与正常人新鲜血浆等量混合,若存在因子抗体,则正常人血浆的F活性被抑制或被中和。能抑制正常人F活性50%的因子抗体定为1个Bethesda单位。 参考范围: 临床意义: 正常人无F抑制物。 阳性见于反复输血、接受抗血友病球蛋白治疗的血友病A患者、SLE、类风湿性关节炎。 临床评价: 本法对同种免疫引起的因子抑制物测定较为敏感,对自身免疫、药物免疫、肿瘤免疫和自发性凝血因子抑制
12、物则不敏感。 8纤溶活性测定 凝血酶时间及甲苯是指受检血浆中加入“标准化”凝血酶溶液,测定开始出现纤维胺兰纠正试验: 蛋白丝所需的时间。纠正试验:甲苯胺兰可纠正肝素的抗凝作用。受检TT值延长超过正常对照3S为延长,见于低(无)纤维蛋白原血症;血中FDP增高;血中有肝素和类肝素物质存在。 血浆纤溶酶原测定 活性测定原理: 发色底物法。显色的深浅与纤溶酶的水平呈正相关。 抗原测定原理: 采用ELISA法,显色的深浅与受检血浆中纤溶酶原的含量呈正相关 增高表示纤溶活性减低,见于血栓前状态和血栓性疾病。减低表示纤溶活性增高,见于原发性纤溶、继发性纤溶和先天性PLG缺乏症。PLG缺陷症可分为CRM+型和
13、CRM-型。 血浆组织纤溶酶原活化剂活性测定原理: 采用发色底物法,显色的深浅与测定 受检血浆中t-PA的含量呈正相关。 抗原测定原理: 采用ELISA法,显色的深浅与受检血浆中t-PA的含量呈正相6页 关。 临床意义: 增高表明纤溶活性亢进,见于原发性纤溶症和DIC等。减低表明纤溶活性减弱,见于动脉血栓形成、深静脉血栓形成、高脂血症等。 血浆纤溶酶原活化抑制物其活性检测,采用发色底物法。增高见于血栓前状态测定: 和血栓性疾病。减低见于原发性和继发性纤溶症。根据PAI:A和PAI:Ag检测结果将PAI-1缺陷分为CRM+型和CRM-型。 血浆2纤溶酶抑制物测其活性测,采用发色底物法。增高见于静
14、脉和动脉定: 血栓形成、恶性肿瘤、分娩后等。减低见于肝病、DIC、手术后、先天性2PI缺乏症。根据2PI:A和2P:Ag检测的结果分为CRM+型和CRM-型。 血浆鱼精蛋白副凝固试验受检血浆中加入硫酸鱼精蛋白溶液,如果血浆中存在可溶性纤维: 蛋白单体-纤维蛋白降解产物复合物,则鱼精蛋白使其解离释出纤维蛋白单体。自行聚合成肉眼可见的纤维状物为阳性。阳性见于DIC的早、中期。阴性见于正常人、晚期DIC和原发性纤溶症。 例题:鱼精蛋白副凝固试验是: A3P BELT CTT DPLG ETAT 答案:A 血清纤维蛋白降解产采用胶乳凝集法。根据被检血清的稀释度可计算出血清FDP含量。增物测定: 高见于原发性纤溶症、DIC、恶性肿瘤、急性早幼粒细胞白血病、肺栓塞、深静脉血栓形成等。 7页 血浆D-二聚体测定: 采用胶乳凝集法。在DIC时,为阳性或增高,是诊断DIC的重要依据。D-二聚体在继发性纤溶症为阳性或增高,而原发性纤溶症为阴性或不升高,此是两者鉴别的重要指标。 例题:FDP阳性,D-二聚体也为阳性,多为 A继发性纤溶症 B原发性纤溶症 C无纤溶亢进 DDIC E血栓形成 答案:D 9血液流变学检测: 全血粘度: 原理,意义:增高见于冠心病、心肌梗死、高血压、脑血栓形成等。减低见于贫血。 血浆粘度: (原理,临床意义:增高见于多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症、糖尿病等。 8页