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1、奎宁的荧光特性的含量测定奎宁的荧光特性的含量测定 实验目的: 1了解仪器的性能与结构；熟悉仪器的操作步骤； 2学会绘制激发光谱和荧光谱图： 3定量测定奎宁的含量 实验原理 奎宁在稀酸溶液中是强荧光物质，它有两个激发波长250 nm和350 nm，荧光发射峰在450 nm。在低浓度时，荧光强度与荧光物质量浓度呈正比：If=kC 仪器与试剂 仪器： 日本岛津公司RF-5301 PC型荧光分光光度 计。 试剂： 100.0gmL-1奎宁储备液； 0.05 molL-1H2SO4溶液 实验步骤 1系列标准溶液的配制 取6只25mL的容量瓶，分别加入10.0gmL-1奎宁标准溶液0.00、1.00、2.
2、00、3.00、4.00、5.00 mL，用0.05 molL-1H2SO4溶液稀释至刻度，摇匀。 2绘制激发光谱和荧光发射光谱： 将EX固定在350 nm,选择合适的实验条件,在400600 nm范围内扫描即得荧光发射光谱(可排除EX的干扰)，从谱图找出最大Em值； 将EM固定在450 nm,选择合适的实验条件,在200400 nm范围内扫描即得荧光激发光谱(可排除EM的干扰)，从谱图找出最大EX值. 3绘制标准曲线 将激发波长EX固定在350 nm左右处，荧光发射波长EM固定在450 nm左右处，在选定条件下，测量系列标准溶液的荧光强度。 4未知试样的测定 取4-5片奎宁药片，在研钵中研细
3、，准确称取约0.1 g，用0.05 molL-1 H2SO4溶解，全部转移至l000 ml容量瓶中，以0.05 molL-1H2SO4稀释至刻度，摇匀。取此溶液2.0mL于100 mL容量瓶中，用0.05 molL-1H2SO4溶液稀释至刻度，摇匀，在标准系列溶液同样条件下，测量试样的荧光发射强度。 5绘制荧光强度If对奎宁溶液浓度C的标准曲线，并由标准曲线求算未知试样的浓度Conc (g/mL)，计算药片中奎宁的质量分数。 奎宁 = Conc (g/mL) 1000mL 50 / 0.1g 注意事项: 奎宁溶液必须当天配制、避光保存。 思考题 1能用0.05 molL-1 HCl来代替0.05 molL-1 H2SO4稀释溶液吗？为什么？ 2如何绘制激发光谱和荧光发射光谱？ 3哪些因素可能会对奎宁荧光产生影响？
