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1、人工制备抗体,多克隆抗体（polyclonal antibody）单克隆抗体（monoclonal antibody）基因工程抗体（genetic engineering antibody),（一）多克隆抗体（polyclonal antibody(PcAb),用传统方法将抗原物质免疫动物,由于这些物质由多种抗原分子组成或由多种抗原决定簇组成,可刺激不同淋巴细胞克隆,产生多种Ig,即多克隆抗体。由此获得的抗血清是一种多克隆的混合抗体，具有高度的异质性。,缺点,它不能针对某一特定表位，特异性不高，常出现交叉反应；同时也不易大量制备，其应用受到限制。,多克隆抗体主要来源于,动物免疫血清恢复期患者血
2、清免疫接种人群,PcAb制备的基本过程,抗原制备动物免疫试血测定抗体效价血清分离与保存多抗纯化与标记,用于制备抗血清的动物,小鼠、大鼠、兔、羊、马等大动物。,（二）单克隆抗体（monoclonal antibody，McAb）,由单一B细胞克隆针对某一抗原决定簇产生的完全均一的只对某一抗原决定簇起反应的特异性抗体,即为单克隆抗体。通过杂交瘤技术获得。,针对一个抗原决定簇由一个B细胞分化、增殖产生的子代细胞集团产生的，针对一个抗原决定簇的抗体，即由单一B细胞克隆合成的抗体。,特点：,1.高度均一性 2.高度专一性3.大量产生4.及稳定性,应用,作为诊断试剂用于许多血清学检测;已广泛应用于疾病的诊
3、断、特异性抗原或蛋白的检测和鉴定、疾病的被动免疫治疗 或与核素、毒素、化学药物偶联导向药物,用于肿瘤治疗。,单克隆抗体的生产,动物体内生产系统细胞培养生产系统,动物体内生产系统,将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔，杂交瘤细胞可在小鼠腹腔中无限繁殖，导致腹水产生，每毫升腹水可获得520mg的单克隆抗体，一般一次可收腹水510mL,间隔34d 采一次，可多次反复采集。,选择培养基,常用HAT选择培养基，H为次黄嘌呤（hypoxanthine）,T为胸腺嘧啶核苷（thymidine)，二者都是旁路合成DN A的原料；A是氨基喋呤（aminoplerin）,是细胞合成DNA的阻断剂。在DMEM培养基中加入 H、
4、A、T三种成分即制成HAT选择培养基，在该培养基中，未融合的骨髓瘤细胞不能生长，因它缺乏HGPRT酶下能利用旁路途径合成DNA，内源性的合成又受到氨基喋呤的阻断；至于未融合的脾细胞则在2周内自然死亡所以只有融合的杂交瘤细胞才能在该培养基中生长。,细胞培养生产系统,悬浮培养系统细胞固定化培养系统,单克隆抗体应用,单克隆抗体被广泛用作诊断检测试剂，提高了常规免疫学检测技术在疾病诊断和分析研究中的敏感性、特异性、准确性和检测速度。单克隆抗体可与同位素、毒素、细胞毒类药物通过化学偶联制备成导向药物（生物导弹），用于肿瘤、自身免疫性疾病治疗和防治移植排斥反应等。,单克隆抗体应用,单克隆抗体可用作生物活性
5、药物的纯化试剂。,单克隆抗体与多克隆抗体比较,单克隆抗体与多克隆抗体比较,但是由于人-人杂交瘤的技术限制，目前绝大多数单克隆抗体是鼠源性的。由于是异种抗原，重复体内使用鼠源性抗体将促使机体产生抗鼠Ig的抗体，不仅降低临床疗效，亦可能引起严重的超敏反应，因而限制了其临床应用。,（三）基因工程抗体:,人-鼠嵌合抗体、改型抗体、双特异性抗体、小分子抗体、人源化抗体。可保持单克隆抗体均一性、特异性强的优点,又能克服其为鼠源性的不足。,由基因重组技术制备的抗体称为基因工程抗体(gene engineering antibody，GeAb)，也称第三代人工抗体。其原理是由B细胞获得编码抗体的基因，或以聚合
6、酶链反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)体外扩增抗体基因片段，经体外DNA重组后，转化受体细胞，使其表达特定抗体。目前已成功表达的基因工程抗体有嵌合抗体、重构建抗体、单链抗体等，其中嵌合抗体研究较多。,另外重组噬菌体抗体(recombinant phage antibody)是近年以重组噬菌体展示系统制备的GeAb。将抗体VH、VL基因经体外PCR扩增后与噬菌体外壳编码基因连接，重组后可在噬菌体表面表达抗体融合蛋白，经固相抗原吸附技术很容易筛选出表达特异抗体的噬菌体用以大量表达和制备抗体。,抗体基因片段的获得,从B细胞DNA库中筛选；用探针从杂交瘤细胞、免疫脾细胞
7、的DNA库或cDNA库中筛选；以PCR法直接扩增。,一、嵌合抗体（Chimeric antibody),是指在同一抗体分子中含有不同种属来源抗体片段的抗体，又称杂种抗体。迄今构建的嵌合抗体多为“鼠-人”类型，也就是抗体的Fab或F(ab)2来源于鼠类。而Fc片段来源于人类。,重构抗体,I advise you to buy out his all share of power.我建议你买下他的全部股权。,buy out 买断全部股份、商业股权或利息（To purchase the entire stock,business rights,or interests of）。例句：We are n
8、ow financially sound enough to buy out the next failure.如今，我们（公司）财务运营足够健全，承担得起再一次的失败。,I would not wish to be inferior to others.我不希望自己比别人差。,be inferior to，比差，劣于，次于，不如例句He is inferior to others in many respects.他在许多方面不如别人。,I hate to see you in such low spirits.我讨厌看到你这么情绪低落。,主要是注意spirit这个词的复数形式。作为“精神、
9、心灵”意义的时候，是不可数名词；而作为“情绪，心情”的意义时，则一般都使用复数形式。例句：He felt in excellent spirits when he arrived home.他回到家里时情绪非常好。,Its very creepy to walk alone at 1 am.凌晨一点一个人走很害怕。,Creepy和scary这两个形容词都是用来形容令人“害怕”的感觉。但这两者其实有些小小的差异。Creepy 的话是指“心里毛毛的”那种感觉，而scary则是真的令人感到害怕，所以在程度上来说scary比creepy还要来得恐怖些。比方说像是看恐怖电影，也许你可以说 Its cre
10、epy.和 Its scary.都可以，但是如果像是去从事高空弹跳(bungee jump)，我想对大部分的人来说都是scary而不只是creepy了。（本句选自小笨霖英语笔记本）,Please hand the document in to me.请把那份文件交给我。,hand in“提交，交出，递交”。这个句子也可以说成，Please submit the document to me.例句：Please hand your homework in at once.请把你们的家庭作业立刻交上来。,A man is assisting police with their inquiries.一名男子协助警方调查。,Assist with/in 协助，帮助。例：A team of nurses assisted the doctor in performing the operation.一组护士协助医生施行手术。,He minutes proceedings of the meeting.他作会议记录。,Who is going to take the minutes?谁来做会议记录？,精品课件！,精品课件！,
