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瑞氏染液配制瑞氏染液配制: 瑞氏染料 830gm或1g 甲醇 500ml或600ml 1、先称干燥瑞氏染料放置乳钵内,用乳棒轻轻敲碎染料成粉末,再行研磨至听不到研芝麻声即呈细粉末,加少许甘油或甲醇溶解研磨,使染料在乳缸内显“一面镜”光泽,而无染料粉粒沉着。 2、再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮,静置片刻,将上层液体倒入一清洁储存瓶内,再加甲醇研磨,重复数次,至乳钵内染料及甲醇用完为止,摇匀,密封瓶口。 3、存室温暗处,储存愈久,则染料溶解、分解就越好,一般储存3个月以上为佳。 缓冲液: 缓冲液作用: 1、染色对氢离子浓度是十分敏感的,据观察pH值的改变,可使蛋白质与染料形成的化合物重新离解。 2、缓冲液须保持一定的pH使染色稳定,PBS的pH 一般在6.46.8, 3、偏碱性染料可与缓冲液中酸基起中和作用,偏酸性染料则与缓冲液中的碱基起中和作用,使pH恒定。 缓冲液配制: : 1% KH2PO4 30ml M/15 KH2PO4 73.5 ml 1% Na2HPO4 20ml M/15 Na2HPO4 26.5ml H2O(新鲜) 加至1000ml 置室温黑暗处,瓶口密封,防止霉菌污染,如有污染则应报废。