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1、第二十六章临床常见标本的细菌学检验,2,第一节 临床标本采集及检验程序,3,(一)检查单据,随时登记姓名、性别、年龄、临床诊断以及是否已用抗生素；,及时检查标本类型、来源、送检目的。,4,（二）标本采集,无菌操作血液、脑脊液、穿刺液等注意严格无菌；粪便、肛拭子、咽拭子等注意避免杂菌污染；盛放容器原则上应置于无菌容器内；容器灭菌应采用干热、湿热或紫外线照射。,5,（二）标本采集,采集时间和部位抗菌药物使用之间，选择合适部位；送检时间和方法采集后应当立即送检可将标本放入转运培养基中，部分标本可放4保存；脑膜炎和淋病奈瑟军需3537保温送检。,6,（二）标本采集,安全防护防止污染、传播和自身感染；及
2、时检验和报告收到标本后，及时登记、检验并报告有关结果；国家规定的传染病检验结果，及时汇报并送上级部门。,7,（三）培养方法,培养基增菌肉汤、血平板、麦康凯平板、伊红美蓝平板、巧克力平板、新耶尔森菌培养基、沙保培养基等等培养方法需氧培养厌氧培养二氧化碳培养,8,（三）培养方法,区分污染菌和病原菌观察菌落是否在划线上加做无菌对照结合培养细菌的生长特点对照判断,注意培养时间涂片染色检查,（四）检验程序,9,报 告,10,血液标本尿液标本粪便标本痰液标本,脑脊液标本生殖道标本穿刺液、引流液标本脓液及分泌物标本,第二节 临床常见标本的细菌学检验,11,血液的采集,采血指征发热（38）或低温（36）；寒战
3、、白细胞增多（10 109/L）、核左移；粒细胞减少、血小板减少、CRP升高；皮肤、粘膜出血、昏迷、多器官衰竭。,12,血液的采集,皮肤消毒70%乙醇 30s；10%聚维酮碘或1%2%碘酊，由内向外大于3cm；穿刺后用70%乙醇脱碘；对碘过敏患者，70%乙醇脱碘60s干燥后采血。,13,血液的采集,采血部位（肘静脉）疑似细菌性心内膜炎：肘动脉或股动脉疑似骨髓炎或伤寒：病灶或髂前（后）上棘取骨髓1ml,14,血液的采集,静脉穿刺可戴手套固定静脉，严禁触碰穿刺点；取血后勿换针头，直接注入血培养瓶；轻轻颠倒混匀以防凝血；采血量成人1020ml/瓶；儿童15ml/瓶。,15,血液的采集,采血时间和次数
4、使用抗菌药物之前即刻采血；24h内采集23次，多次采血宜更换部位；入院前2周内接受抗菌药：选用中和培养瓶；间歇性寒战或发热：发病前0.51h采血；,16,血液的采集,特殊患者采血方式间歇性寒战或发热发病前0.51h采血；急性发热可疑菌血症10min内采集2份；接种于需氧和厌氧瓶；,非急性感染可疑菌血症24h内采集2或3份；采血间隔不应小于3h；急性细菌性心内膜炎在12h内采集3份；若24h后阴性，再采集3份以上。,17,血液的采集,特殊患者采血方式亚急性细菌性心内膜炎24h内采集3份血；每次采血间隔大于1h；若24h后阴性；再采集2份以上血；,不明原因发热24h内采集23份血标本；每次间隔大于
5、1h；若2436h培养阴性；再采集2份以上血标本。,18,血液的运送,采集后立即送检可短时间室温保存切勿冷藏,（四）检验程序,19,报 告,血液标本常见的病原菌,20,血液检验的临床意义,疖、痈、和脓肿继发的败血症 金葡、溶血性链球菌尿路、胆道、胃肠道炎症粘膜败血症 大肠埃希菌、变形杆菌、产气肠杆菌急性细菌性心内膜炎金葡、溶血性链球菌、脑膜炎奈瑟菌,21,亚急性细菌性心内膜炎草链、肠球菌化脓性心包炎金葡、溶血性链球菌、肺链,血液检验的临床意义,22,肝硬化败血症金葡、铜绿烧伤后败血症 金葡、铜绿,23,血液标本尿液标本粪便标本痰液标本,第二节 临床常见标本的细菌学检验,24,尿液的采集,采集指
6、征尿频、尿急、尿痛、排尿困难、耻骨上压痛肉眼脓尿或血尿不明原因发热，无局部感染留置导尿管的患者出现发热膀胱排空功能受损，有尿潴留,25,尿液的采集,采集原则用药前采集尿液在膀胱至少停留4h,26,尿液的采集,采集容器不与尿液发生反应的惰性材料广口、容积50ml洁净、无菌、加盖、封闭盖子容易开启不含防腐剂和抑菌剂,27,尿液的采集,采集方法清洁中段尿最常用的尿培养标本收集方法耻骨上膀胱穿刺评估膀胱内细菌感染的“金标准”,28,尿液的采集,采集方法直接导尿、小儿收集包、留置导尿管,29,尿液的运送,采集后立即送检室温保存不超过2h4 保存不超过8h淋病奈瑟菌培养不能冷藏,（四）检验程序,30,报
7、告,31,尿液的检验,菌落计数定量接种尿液培养标本根据细菌在平板上的生长情况定量报告每毫升尿液中所含有的细菌数（CFU/ml）,尿液标本常见的病原菌,32,尿液检验的临床意义（清洁中段尿）,33,34,血液标本尿液标本粪便标本痰液标本,第二节 临床常见标本的细菌学检验,35,粪便的采集,采集指征体温38.5，重症腹泻，血便、脓便；未经抗菌药物治疗的持续性腹泻；来自疫区的患者。,36,粪便的采集,采集容器（与尿液类似）不与尿液发生反应的惰性材料；广口、不宜使用纸盒；洁净、无菌、加盖、封闭，盖子容易开启；不含防腐剂和抑菌剂。,37,粪便的采集,采集方法自然排便法采集脓血、粘液部分13g，液体取絮状
8、物13ml；置无菌容器内送检；直肠拭子法适于排便困难或婴幼儿患者；湿润的棉拭子插入肛门，成人45cm，儿童23cm。,38,粪便的运送,立即送检，室温保存不超过2h；不能及时送检的标本可保存于46；培养艰难梭菌的标本应保存于-20以下；pH7.0磷酸盐甘油或转运培养基保存不超过24h。,39,粪便的保存,改良Cary-Blair培基不能运送培养志贺菌的标本；直肠活检标本容器内盛无菌蒸馏水以防沉淀；保存培养弯曲菌和弧菌的标本，需加CaCl2。,（四）检验程序,40,报 告,粪便标本常见的病原菌,41,粪便检验的临床意义,肠道致病菌霍乱弧菌-霍乱，志贺菌-细菌性痢疾，伤寒沙门菌-伤寒；食物中毒沙门
9、菌、弯曲菌、葡萄球菌、副溶血弧菌。,42,43,血液标本尿液标本粪便标本痰液标本,第二节 临床常见标本的细菌学检验,44,痰液的采集,采集指征下呼吸道感染者可有发热、咳嗽和咳痰可伴有胸痛、气急甚至呼吸困难，肺部可闻及湿罗音；X线检查肺部有炎性浸润或胸腔积液严重可致感染性休克和呼衰。,45,痰液的采集和运送,采集方法自然咳痰法支气管镜采集法防污染毛刷采集 法支气管肺泡灌洗法胃内采痰法小儿取痰法,46,痰液的采集和运送,标本运送 立即送检；室温保存不超过2h；作结核分枝杆菌培养的痰液可置入4 冰箱保存。,（四）检验程序,47,报 告,痰液标本常见的病原菌,48,痰液检验的临床意义,急性细菌性鼻炎、
10、鼻前庭炎、鼻腔脓肿、鼻中隔脓肿金葡、化脓性链球菌和铜绿慢性副鼻窦炎需氧菌和厌氧菌混合感染急性副鼻窦炎肺炎链球菌,49,急性咽炎链球菌,痰液检验的临床意义,几乎每一份标本都是有菌的；分离出来的细菌却不一定是病原菌；有时病原菌受到抑制而检测不出来；应当加强微生物学工作者与临床医师之间的沟通。,50,51,小结（临床常见标本的细菌学检验）,临床标本采集及检验程序检查单据、标本采集、培养方法、检验程序 临床常见标本的细菌学检验血、尿、便、痰,52,第一节 临床标本采集及检验程序,53,(一)检查单据,随时登记姓名、性别、年龄、临床诊断以及是否已用抗生素；,及时检查标本类型、来源、送检目的。,54,（二
11、）标本采集,无菌操作血液、脑脊液、穿刺液等注意严格无菌；粪便、肛拭子、咽拭子等注意避免杂菌污染；盛放容器原则上应置于无菌容器内；容器灭菌应采用干热、湿热或紫外线照射。,55,（二）标本采集,采集时间和部位抗菌药物使用之间，选择合适部位；送检时间和方法采集后应当立即送检可将标本放入转运培养基中，部分标本可放4保存；脑膜炎和淋病奈瑟军需3537保温送检。,56,（二）标本采集,安全防护防止污染、传播和自身感染；及时检验和报告收到标本后，及时登记、检验并报告有关结果；国家规定的传染病检验结果，及时汇报并送上级部门。,57,（三）培养方法,培养基增菌肉汤、血平板、麦康凯平板、伊红美蓝平板、巧克力平板、
12、新耶尔森菌培养基、沙保培养基等等培养方法需氧培养厌氧培养二氧化碳培养,58,（三）培养方法,区分污染菌和病原菌观察菌落是否在划线上加做无菌对照结合培养细菌的生长特点对照判断,注意培养时间涂片染色检查,（四）检验程序,59,报 告,60,血液标本尿液标本粪便标本痰液标本,脑脊液标本生殖道标本穿刺液、引流液标本脓液及分泌物标本,第二节 临床常见标本的细菌学检验,61,血液的采集,采血指征发热（38）或低温（36）；寒战、白细胞增多（10 109/L）、核左移；粒细胞减少、血小板减少、CRP升高；皮肤、粘膜出血、昏迷、多器官衰竭。,62,血液的采集,皮肤消毒70%乙醇 30s；10%聚维酮碘或1%2
13、%碘酊，由内向外大于3cm；穿刺后用70%乙醇脱碘；对碘过敏患者，70%乙醇脱碘60s干燥后采血。,63,血液的采集,采血部位（肘静脉）疑似细菌性心内膜炎：肘动脉或股动脉疑似骨髓炎或伤寒：病灶或髂前（后）上棘取骨髓1ml,64,血液的采集,静脉穿刺可戴手套固定静脉，严禁触碰穿刺点；取血后勿换针头，直接注入血培养瓶；轻轻颠倒混匀以防凝血；采血量成人1020ml/瓶；儿童15ml/瓶。,65,血液的采集,采血时间和次数使用抗菌药物之前即刻采血；24h内采集23次，多次采血宜更换部位；入院前2周内接受抗菌药：选用中和培养瓶；间歇性寒战或发热：发病前0.51h采血；,66,血液的采集,特殊患者采血方式
14、间歇性寒战或发热发病前0.51h采血；急性发热可疑菌血症10min内采集2份；接种于需氧和厌氧瓶；,非急性感染可疑菌血症24h内采集2或3份；采血间隔不应小于3h；急性细菌性心内膜炎在12h内采集3份；若24h后阴性，再采集3份以上。,67,血液的采集,特殊患者采血方式亚急性细菌性心内膜炎24h内采集3份血；每次采血间隔大于1h；若24h后阴性；再采集2份以上血；,不明原因发热24h内采集23份血标本；每次间隔大于1h；若2436h培养阴性；再采集2份以上血标本。,68,血液的运送,采集后立即送检可短时间室温保存切勿冷藏,（四）检验程序,69,报 告,血液标本常见的病原菌,70,血液检验的临床
15、意义,疖、痈、和脓肿继发的败血症 金葡、溶血性链球菌尿路、胆道、胃肠道炎症粘膜败血症 大肠埃希菌、变形杆菌、产气肠杆菌急性细菌性心内膜炎金葡、溶血性链球菌、脑膜炎奈瑟菌,71,亚急性细菌性心内膜炎草链、肠球菌化脓性心包炎金葡、溶血性链球菌、肺链,血液检验的临床意义,72,肝硬化败血症金葡、铜绿烧伤后败血症 金葡、铜绿,73,血液标本尿液标本粪便标本痰液标本,第二节 临床常见标本的细菌学检验,74,尿液的采集,采集指征尿频、尿急、尿痛、排尿困难、耻骨上压痛肉眼脓尿或血尿不明原因发热，无局部感染留置导尿管的患者出现发热膀胱排空功能受损，有尿潴留,75,尿液的采集,采集原则用药前采集尿液在膀胱至少停
16、留4h,76,尿液的采集,采集容器不与尿液发生反应的惰性材料广口、容积50ml洁净、无菌、加盖、封闭盖子容易开启不含防腐剂和抑菌剂,77,尿液的采集,采集方法清洁中段尿最常用的尿培养标本收集方法耻骨上膀胱穿刺评估膀胱内细菌感染的“金标准”,78,尿液的采集,采集方法直接导尿、小儿收集包、留置导尿管,79,尿液的运送,采集后立即送检室温保存不超过2h4 保存不超过8h淋病奈瑟菌培养不能冷藏,（四）检验程序,80,报 告,81,尿液的检验,菌落计数定量接种尿液培养标本根据细菌在平板上的生长情况定量报告每毫升尿液中所含有的细菌数（CFU/ml）,尿液标本常见的病原菌,82,尿液检验的临床意义（清洁中
17、段尿）,83,84,血液标本尿液标本粪便标本痰液标本,第二节 临床常见标本的细菌学检验,85,粪便的采集,采集指征体温38.5，重症腹泻，血便、脓便；未经抗菌药物治疗的持续性腹泻；来自疫区的患者。,86,粪便的采集,采集容器（与尿液类似）不与尿液发生反应的惰性材料；广口、不宜使用纸盒；洁净、无菌、加盖、封闭，盖子容易开启；不含防腐剂和抑菌剂。,87,粪便的采集,采集方法自然排便法采集脓血、粘液部分13g，液体取絮状物13ml；置无菌容器内送检；直肠拭子法适于排便困难或婴幼儿患者；湿润的棉拭子插入肛门，成人45cm，儿童23cm。,88,粪便的运送,立即送检，室温保存不超过2h；不能及时送检的标
18、本可保存于46；培养艰难梭菌的标本应保存于-20以下；pH7.0磷酸盐甘油或转运培养基保存不超过24h。,89,粪便的保存,改良Cary-Blair培基不能运送培养志贺菌的标本；直肠活检标本容器内盛无菌蒸馏水以防沉淀；保存培养弯曲菌和弧菌的标本，需加CaCl2。,（四）检验程序,90,报 告,粪便标本常见的病原菌,91,粪便检验的临床意义,肠道致病菌霍乱弧菌-霍乱，志贺菌-细菌性痢疾，伤寒沙门菌-伤寒；食物中毒沙门菌、弯曲菌、葡萄球菌、副溶血弧菌。,92,93,血液标本尿液标本粪便标本痰液标本,第二节 临床常见标本的细菌学检验,94,痰液的采集,采集指征下呼吸道感染者可有发热、咳嗽和咳痰可伴有
19、胸痛、气急甚至呼吸困难，肺部可闻及湿罗音；X线检查肺部有炎性浸润或胸腔积液严重可致感染性休克和呼衰。,95,痰液的采集和运送,采集方法自然咳痰法支气管镜采集法防污染毛刷采集 法支气管肺泡灌洗法胃内采痰法小儿取痰法,96,痰液的采集和运送,标本运送 立即送检；室温保存不超过2h；作结核分枝杆菌培养的痰液可置入4 冰箱保存。,（四）检验程序,97,报 告,痰液标本常见的病原菌,98,痰液检验的临床意义,急性细菌性鼻炎、鼻前庭炎、鼻腔脓肿、鼻中隔脓肿金葡、化脓性链球菌和铜绿慢性副鼻窦炎需氧菌和厌氧菌混合感染急性副鼻窦炎肺炎链球菌,99,急性咽炎链球菌,痰液检验的临床意义,几乎每一份标本都是有菌的；分离出来的细菌却不一定是病原菌；有时病原菌受到抑制而检测不出来；应当加强微生物学工作者与临床医师之间的沟通。,100,101,小结（临床常见标本的细菌学检验）,临床标本采集及检验程序检查单据、标本采集、培养方法、检验程序 临床常见标本的细菌学检验血、尿、便、痰,Thank You!,
