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1、细胞毒性试验MTT比色法及改进方法,细胞毒性试验MTT比色法及改进方法细胞毒性试验MTT比色法及改进方法细胞毒性试验MTT比色法及其改进方法细胞毒性实验利用体外细胞培养方法来评价生物材料和医疗器材或浸提液可滤出成分中潜在的细胞毒性生物学评价体系中最重要的检测指标几乎是各种医疗器械和医用材料临床应用前的必选项目,常听有些学生说：“我就怕作文，一提笔就头疼，总觉得没东西可写。”有的干脆说：“我真不知道该写什么，从何写起。”有的学生作文虽然也交上来了，但仔细一看，刚开个头，敷衍几句，就草草收场。内容空泛笼统，不知所云。针对这些情况；我常常鼓励学生，作文就是用笔说话，会说话就会作文。而要想有话说，就要
2、留心观察身边的人和事，切忌胡编乱造，闭门造车。由于缺乏对周围事物的观察和分析，头脑中缺乏材料，因而才觉得无话可说，无从下笔。什么是观察?所谓观察，就是用眼睛去看。要远“观”近“察”，事事留心，时时注意，并养成一种习惯。被誉为世界短篇小说之王的法国作家莫泊桑曾拜当时著名作家福楼拜为师。一天，他把自己坐在屋里编的准备写成小说的故事讲给福楼拜听。福楼拜听后，说：“我劝你不要忙于写这些虚拟的东西，你每天骑马到外面转一圈，把路上看到的一切准确地、细致地记录下来。”于是莫泊桑意识到福楼拜是教他首先学会用眼睛去观察生活，认识生活，练好观察这一基本功。从此他花了一年左右的时间，每天外出观察，终于写成了小说点心
3、，并成为世界著名的小说家。后来莫泊桑在总结自己的创作经验时说：“对你所要表现的东西，要长时间很注意地观察它，以便发现别人没有发现过和没有写过的特点。任何事物里，都有未被发现的东西”鲁迅也曾说过：“留心各样的事情，多看看，不看到一点就写。”这是鲁迅长期创作的经验总结。由此可见，要想写好文章必须重视观察事物，提高观察能力。但怎样才能引起学生对周围事物的注意呢？这里我想谈两点；一、激发学生的观察兴趣 心理学家认为，没有动机任何学习都不能发生，动机是学习的先决条件。对于作文教学，教师要善于激发学生的写作欲望，调动他们的写作积极性，变被动为主动。高中生已具备了较强的是非分辨能力，他们往往有一种强烈的表现
4、欲望。教师要紧紧抓住这种欲望，引导他们写出优秀的文章来。教学大纲对各个年级的作文教学都有明确的规定，而且要求有计划、有步骤地在课内落实。课内作文，要求具体，学生各方面都受到约束，往往显得比较被动，但又是必不可少的。为此，我在作文教学上一直是采取“双管齐下”的办法：一方面安排必要的课内作文，另一方面安排一定数量的课外练笔。比如，去年我接了刚入学的两个班，除了两周一篇大作文外，我要求每个学生每周至少写一篇随笔，隔周抽查一次，并进行讲评。写随笔，就是给学生以充分的自由：选材自由，命题自由，文体自由，字数自由。只管写自己最熟悉、最感兴趣、印象最深的人或事。可议论，可抒情，可记叙、随心所欲。洋洋洒洒几千
5、字，不嫌多；点点滴滴几十字，不嫌少；有话则长，无话可短，尽兴而写，随意而止。这样不自觉地培养了学生的观察事物的兴趣和能力。他们写的内容起初比较简单，渐渐地，观察视野不断扩大，就从身边的小事写开去，写社会、写人生。内容越来越丰富：班级的生活与风波，家庭的欢乐与忧愁，社会见闻等等，真是大到宇宙，小到自我，尽入笔底。有个学生对校园常作细致观察，从景到人，从人到事，连续写了校园生活之一、之二、之三在随笔里，我看到了学生的写作欲望，也有到了学生因创作热情而引出的观察兴趣。不仅有话可写，而且更真实，更贴近生活。一年多来，收到了显著的效果。不少学生谈了写随笔的体会，一致认为写随笔的要求促使他们去观察，去思考
6、。有的说；“我每次都要瞪大眼睛在生活里寻找。”有的说：“由于写随笔的需要，无论在家里、在车上、在学校里，我无时无刻不在观察、在谛听”我班的学生全部完成了我布置的每周三篇的任务，而且由于对周围事物的兴趣，不少人自觉多写，并养成了写日记的习惯。同时，在课内作文的教学中，我也有意识地激发学生的观察兴趣。比如，我布置一篇作文记一位最熟悉的同学，要求大家以班里一位同学为描写对象，抓住其外貌特征进行描绘、刻画，看谁观察得细，写得像。而绝大多数学生都能抓住自己所写的人的特征来写，学生的兴趣被调动了，创作热情被激发了，纷纷写出了切合实际的优秀作品。总之，要想使学生写出好的文章，首先必须让他们练好观察这一基本功
7、。二、指导学生观察的方法 在激发学生的观察兴趣的同时，还要指导学生如何观察，怎样去观察。我曾给学生讲过这样一个故事：古代波斯有位珠宝商很会做生意，他在出售金银首饰时，常常盯住顾客的眼睛不放，结果生意非常兴隆。别人想探究其中的奥妙，他却守口如瓶，直到临死前，他才向自己的独生子传授这一诀窍：“盯着对方的眼睛，不，准确地讲，盯着对方瞳孔，瞳孔是不会撒谎的。如果一只钻戒的熠熠光泽使对方瞳孔扩张，你就大胆地把原价提高三成或更高；如果一条项链没能使对方张大瞳孔，你就立即更换一只总之，盯着对方的瞳孔！”当然，这个珠宝商传授的生意经，不是我们要学的，但这种抓住买主的外部表情，从而推测其心理变化的方法却很值得我
8、们去借鉴。在观察中，我注重引导学生抓住事物的本质、特征，而不只是“看”。鲁迅是一位出色的观察家。尤其是在观察人物方面他实在是独具慧眼而又细致入微的。他曾说过；“要极俭省地画出一个人的特点，最好是画他的眼睛。”在他的短篇小说祝福中，鲁迅对祥林嫂的眼睛有三次描写。初到鲁家时总是“顺着眼”，表现了她的温顺善良；第二次到鲁家时虽还“顺着眼”，但“眼角上带着泪痕，眼光也没有先前那样精神”，表明她精神上受到过巨大的刺激，极度悲伤；在沦为乞丐之后，祥林嫂整个人完全与先前不同了：脸“仿佛是木刻似的”，“只有那眼珠间或一轮，还可以表示她是一个活物”。说明这时的她已濒于死亡，精神麻木，内心受到极大的摧残。鲁迅正是
9、抓住主人公祥林嫂的眼睛，通过对比，写出了人物的悲惨遭遇和内心世界的变化。我布置了一篇作文，让学生通过自己的眼睛去观察，记自己身边一位熟悉的人。于是，一个个平凡而伟大的普通人从每个学生的笔端跃出。这样，学生就慢慢学会了对周围各种事物的“观察”，而不只是“看”。当然，我们在强调学生要注重观察的同时，还要引导他们运用正确的健康的思想去观察。我跟学生分析，生活中确实有愚昧落后、勾心斗角，有挫折，也有失败，这些东西不承认不行。但是必须注意：什么才是我们生活的主流?从你呱呱落地到现在，是承受的阳光雨露多，还是遭受的急风暴雨多?周围的东西是正面的多还是反面的多？再者，生活中的不正之风确实令人痛恨，应该揭露、
10、鞭挞，但决不能因此而使我们丧失了对生活的信心，让丑恶的东西占据我们的心灵，而应该让我们的生活处处都充满阳光。经过我的引导，许多学生认识到，通过观察写出的东西一方面应是真实的，发自内心的；另一方面还应是健康的，积极向上的。由于我注意培养学生的观察能力，许多学生的作文水平渐渐提升了，尤其涌现出不少表露真情实感的好作品。我们只要留心一下，日常生活中的许多事物都会使我们有所发现，不是吗?苹果落地，再平常不过了，牛顿却从中发现了万有引力定律，开创了科学的新纪元；壶水翻滚，是很平常的事，瓦特却因此发明了蒸汽机，导致了一场工业革命。正如契诃夫曾对一位青年作者所说的：“您看这堵墙，似乎它连一点有趣的地方都没有
11、，可是你凝神地看着它，就会在那里面有所发现，找到别人以前还没注意到的东西，那您就可以把它写下来了”这就是说，要观察，要思考，并且是用自己的眼睛去观察、用自己的头脑去思考。留心你身边的日常事物吧，它将使你获得知识，使你发现生活的真谛。孟富香，教师，现居河南沁阳。目前，新课改正在各个学校如火如荼地进行，在这一背景下，小学音乐欣赏课的地位逐渐提升，人们认识到音乐欣赏课对培养学生欣赏美、发现美以及感悟美的能力具有重要的意义。但是，当前小学音乐教师在讲授音乐欣赏课的时候，依然采用传统的灌输式方法进行教学，这显然已经不适应新课改的要求。因此，小学音乐教师应该改变传统的教学方法，注重激发学生对音乐欣赏课的兴
12、趣，培养学生的音乐欣赏能力。接下来，笔者简要谈谈新课程背景下音乐欣赏课的教学策略。一、激发学生音乐学习的兴趣 兴趣是学生学习的最好老师，也是学生学习的不竭动力。只有学生对音乐欣赏课产生了浓厚的兴趣，他们才愿意融入课堂中，学习教师传授的知识。由于小学生喜欢生动、形象以及活泼等的事物，因此，教师可以针对小学生的这一特点选择能够吸引小学生兴趣的作品进行授课。在音乐欣赏课中，包含多种多样的音乐作品，其中就不乏生动形象的音乐作品。比如，跳圆舞曲的小猫这一作品，就是以生动活泼的曲调进行表达，这种作品切合了小学生的思维特点，能够激发出学生对音乐学习的兴趣。在学生充满学习兴趣的基础上，教师再进行适当地讲解，这
13、样就能使学生加深对作品的理解，进而在无形中提升学生的音乐欣赏能力，培养他们的音乐情操。二、阶段性地选择音乐作品 音乐作品可以分为两种类型，分别是声乐作品与器乐作品。其中，声乐作品的特点是有歌词，音乐形象相对比较具体，容易被学生感受并能够理解。器乐作品的特点是没有歌词，音乐形象比较抽象，很难被学生理解。因此，在具体的教学中，教师应该结合学生的年龄特征进行针对性地教学。一般来说，对于小学低年级的学生，教师在音乐欣赏作品的选择上应该以积极向上且容易理解的声乐作品为主，比如铃儿响叮当这一作品，曲调欢快，歌词通俗易懂，容易让学生理解，可以激发出学生学习音乐欣赏课的兴趣。等到学生具有一定的音乐欣赏能力的时
14、候，教师可以先选择容易感知的器乐作品进行教学，结合小学生喜欢听童话故事的心理，教师可以向学生讲授一些具有故事性的音乐作品，比如彼得与狼，不仅旋律容易使学生感兴趣，同时还带有解说词，因此，这类作品不仅可以激发出学生的学习兴趣，同时解说词还能够帮助学生更好地理解作品。待学生的音乐欣赏能力进一步提升后，教师可以让学生欣赏具有一定抽象性的作品，比如百鸟朝凤，它是纯粹的大自然的声音，但由于它是源自于生活，具有一定的直观性，因此适合小学生的理解能力。三、结合多媒体教学 小学阶段是学生从具体思维逐渐向抽象思维过渡的阶段，整体上来说，他们的抽象思维能力不足。因此，他们在感知外界事物的时候，往往是采用具体形象的
15、思维模式，根据小学生思维的这一特点，教师应该充分利用多媒体进行教学。采用多媒体教学能够将教学内容以直观、形象的方式呈现出来，为学生营造一个形象化的教学环境，使学生融入课堂学习中，对所学内容进行直接感知。比如，在讲授动物狂欢节的时候，教师可以运用多媒体为学生播放一段与这部作品有关的动物视频，在视频播放的过程中，配上动物狂欢节的音乐，这样就巧妙地将动物的形象与音乐作品进行了结合，使学生能更加直观地对这部作品进行理解，这样不仅能够提升学生的音乐欣赏兴趣，同时还能加深学生对这部音乐作品的理解。四、尊重学生的个性 在音乐欣赏课的讲授过程中，教师要以学生为授课中心，尊重学生的自主性，与学生进行交流，给予学
16、生自由想象的空间，让他们自己去感受、去理解，调动他们的音乐欣赏热情，充分发挥他们在课堂学习中的主动性。学生在课堂中获得了极大的自由性，这样不仅能够充分发挥他们的想象力与创造性，同时还能够营造和谐的课堂氛围，提升教学效果。综上所述，随着新课改的不断深化，小学音乐欣赏课中进行课程改革也是势在必行的。传统的音乐欣赏课教学方法已经不适应课程发展的要求，要想提升教学效果，音乐教师就必须探索新型的授课模式。在音乐教学中，要依据小学生的实际情况，不断激发学生的学习兴趣，提升学生对音乐欣赏课的认识，培养学生的音乐欣赏素养，使学生能够感悟音乐之美，感受生活之美。,细胞毒性试验MTT比色法及其改进方法,细胞毒性实
17、验利用体外细胞培养方法来评价生物材料和医疗器材或浸提液可滤出成分中潜在的细胞毒性生物学评价体系中最重要的检测指标几乎是各种医疗器械和医用材料临床应用前的必选项目,邵细胞活力的检测方法口染料排除法(台盼蓝、伊红Y、苯胺黑)口克隆形成试验四唑盐(MTT)和 Alamar Bluel色试验口三磷酸腺苷(ATP)发光试验细胞蛋白质含量测定法,MTT比色试验一四甲基偶氮唑盐微量酶反应色法MT:为黄色化合物,是一种能接收氢原子的染料,其化学名为3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5二苯基四氮唑溴盐,商品名噻唑监cellular reductase,活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性的MT还原为原理难溶
18、性的蓝紫色结晶物甲臢(Formazan),并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。在一定细胞数范围内,MTT结晶物形成的量与细胞数成正electron mediMTTduceddehydrogenaseelectron mediatorMiT formazanpurple color,主要步骤制备细胞悬液,接种、培养细胞MTT染色:培养一段时间后,向细胞中加入MTT溶液,继续在37孵育4h。然后除去培养液,加二甲基亚砜(DMSO或盐酸-异丙醇溶解细胞中的紫色结晶物比色:酶联免疫监测仪在490或570m处测定溶液的吸光值OD(optical density)。,96孔板酶标仪,灵敏度较传统计数法高优点
19、经济甲賸产物不溶于水,需溶解检测缺点MTT反应需至少3小时,不适用急性反应,选择适当的细胞接种浓度、药物浓度设调零孔和对照孔注事MTT对菌敏感,应尽量无菌操作意项避免血清千扰现配现用,低温避光,以免分解,鼎要进一步查阅的操作细节多看文觥开始预实验细胞接种浓药物浓度时间控制污染室蓝离心操作浓度梯度5%CO2,调零孔与对37血清干扰照孔白灭菌操作细胞代数质培养板药品性液均匀度检头注理胞清液含结影响评价结贴壁牢固程度,23,26、要使整个人生都过得舒适、愉快，这是不可能的，因为人类必须具备一种能应付逆境的态度。卢梭27、只有把抱怨环境的心情，化为上进的力量，才是成功的保证。罗曼罗兰28、知之者不如好之者，好之者不如乐之者。孔子29、勇猛、大胆和坚定的决心能够抵得上武器的精良。达芬奇30、意志是一个强壮的盲人，倚靠在明眼的跛子肩上。叔本华,谢谢！,
