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1、第14章 G产芽胞杆菌,本章仅介绍兽医上具有重要意义的芽胞杆菌科（Bacillaceae）。芽胞杆菌科是一大类能形成芽胞的细菌，大多数为G+菌，且具有运动性。根据生化特性和形态特征目前主要包括6个属，,属：芽胞杆菌属(Bacillus)属：芽胞乳杆菌属(Sporolactobacillus)属：梭状芽胞杆菌属(Clostridium)，也称为梭菌属属：脱硫腊肠样芽胞杆菌属(Desulfotomaculum)属：芽胞八叠球菌属(Sporocarina)属：颤螺菌属(Oscillospira)在以上6个属中，与兽医有关的是属、属,本章讲述内容：,第一节 芽胞杆菌属（Bacillus）第二节 梭 菌
2、 属（Clostridium）需氧芽胞杆菌与厌氧芽胞杆菌的区别,第一节 芽胞杆菌属,本菌属为杆状的G+菌，正式命名的有34种，其中对人畜致病的比较少，危害最大的主要是炭疽芽胞杆菌。枯草杆菌和蜡样芽胞杆菌在环境中常见。所以本节重点介绍炭疽芽胞杆菌。,炭疽芽胞杆菌Bacillus anthracis,炭疽芽胞杆菌俗称炭疽杆菌，是一种人畜共患的病原体，在医学和兽医学上都相当重要。,一、形态特征,炭疽杆菌为G+杆菌，长而且粗大，长3.08.0um，宽1.01.5um；无鞭毛。,炭疽芽胞杆菌菌落表面的细胞呈曲线排列（）金属镀膜，1 500,其形态在动物体内和体外有较大差异：,1）体内（即病料中，如血液、
3、组织）形态：（1）单在或短链状(一般约25个)，似竹节状；（2）相连的菌端平截或微凹，游离端钝圆，本菌属的其他细菌接头为钝圆，如蜡状芽胞杆菌；（3）形成荚膜，荚膜颜色与染色方法相关；革兰氏染色，菌体紫色，荚膜不着色，仅为一个无色的框；美兰染色，则荚膜呈粉红色；瑞氏染色荚膜呈淡紫色或淡紫红色；（4）不形成芽胞。,炭疽杆菌在动物体内的形态,蜡状杆菌,炭疽杆菌,2）体外（培养基上的培养物）形态：（1）长链状（几十或上百个）；（2）形成芽胞，芽胞呈椭圆形，位于菌体中央或近中央，直径小于菌体；（3）普通培养基上不形成荚膜。,炭疽杆菌在动物体外的形态,炭疽芽胞杆菌吕弗勒多色亚甲基蓝染色。炭疽芽胞杆菌的芽胞
4、染成红紫色（多色亚甲基蓝，放大1000倍）,3）对炭疽杆菌的形态特征要注意几点：,猪慢性局部炭疽病料中菌体形态常不典型，呈细长弯曲或捻转的杆状；,血琼脂、血清琼脂或碳酸氢钠琼脂上，1020%CO2条件下可形成荚膜；病料腐败后，菌体分解，但荚膜抗腐败能力较强，荚膜仍可残留，称为“菌影”。,二、培养特性,需氧；最适生长：温度为37，pH7.27.6；营养要求不高，普通培养基上生长良好。,普通琼脂：强毒株菌落为粗糙型：扁平、灰白色、干燥、无光泽、不透明、边缘不整齐，用低倍镜或放大镜观察菌落的边缘呈卷发状（主要是长链组成）；弱毒株或无毒株则多形成光滑型菌落；,血琼脂：一般不溶血，个别菌株可轻微溶血；而
5、该属其他成员则多有明显溶血；,炭疽芽胞杆菌/蜡样芽胞杆菌 血琼脂培养，显示具有波状边缘的大的灰白色菌落。各种腐生芽胞杆菌通常是溶血的。炭疽有高度传染性，在实验室处理标本时要特别小心。（血琼脂，18小时，37）,肉汤：24小时，上清透明清朗，管底絮状沉淀，不形成菌膜和菌环；,明胶穿刺：呈漏斗状液化明胶，整个培养物形似倒立的松树状；,在含有青霉素(0.5单位/ml)的培养基中，炭疽杆菌易形成圆质体而相互连接成串珠状，称为“串珠反应”（String of Pearls Reaction）；而该属其他细菌无此现象；,当青霉素加至10单位/ml，则炭疽杆菌生长受到抑制，不生长或微弱生长，而该属其他细菌一
6、般不被抑制。,三、生化特性,生化试验不是炭疽杆菌的主要鉴定项目。我们可了解一下内容：葡萄糖 VP试验 还原硝酸盐 吲哚 H2S H2O2酶,四、抵抗力,炭疽杆菌的繁殖体抵抗力不强；但其芽胞体抵抗力非常强，对热、干燥等具有较强的抵抗力，不过芽胞对碘液及一些抗菌素（如青霉素、链霉素、磺胺等）比较敏感。,五、抗原结构,炭疽杆菌的抗原主要有：1、菌体多糖抗原与毒力无关；2、保护性抗原炭疽毒素的成分，有抗原性，可刺激机体产生免疫反应；3、荚膜抗原与毒力有关，仅见于有毒菌株；4、芽胞抗原具有抗原性。,六、致病性,1、可引起人畜共患的急性、热性、败血性传染病。各种动物对本菌的易感性不一；通常：绵羊、牛、鹿最
7、易感急性败血性死亡，尸僵不全、血凝不良、天然孔出血，臌气；剖检可见脾脏急剧肿胀，比平常大34倍，呈典型的败血脾；马属、骆驼、猪、山羊次之多为慢性局部感染，如咽部；狗、猫及食肉动物抵抗力较大多表现肠炭疽；禽类通常无易感性；人类感染则因侵入途径不同而出现皮肤炭疽、肺炭疽、肠炭疽等。,2、炭疽杆菌的毒力主要取决于,（1）荚膜（2）毒素,荚膜：可抑制抗体,抵抗吞噬,使细菌易于扩散和繁殖；炭疽毒素：主要由3种成分构成。,水 肿 因 子（edema factor，EF）：脂蛋白；致 死 因 子（lethal factor，LF）：蛋白质；保护性抗原（protective antigen，PA）：蛋白质，是
8、一种辅酶。,这三种成分单独都没有毒性作用，至少要有两种成分协同，才能引起相应作用。,七、微生物学诊断,检验程序如下：,检验时必须注意：,病料镜检时一般有荚膜，如无荚膜则不要过早下结论，必须经分离培养后接种实验动物后再进行形态学检查；诊断时注意与炭疽杆菌类似的细菌鉴别，如蜡状芽胞杆菌等，详见课本P313表22-3；对疑似炭疽杆菌病死亡的家畜严禁剖检，发现后必须首先采血镜检，确认无炭疽杆菌后方可进一步检查。,浅谈炭疽,第二节 梭 菌 属Clostridium,G+杆菌，多严格厌氧，少数微需氧；形成芽胞，芽胞直径多大于菌体直径，使菌体呈梭状，故名“梭状芽胞杆菌”，简称梭菌；但不是所有梭菌都呈梭状,如
9、破伤风梭菌。,广泛分布于自然界常存在于土壤、水、人和动物肠道以及腐败物中。共包括80余种细菌多数为腐生菌，少数为病原菌（约11种）；病原菌通常以产生外毒素和侵袭性酶使动物发病。,这里我们只介绍与兽医有关的几种梭菌。,一、与兽医有关的几种梭菌,1、气肿疽梭菌2、腐 败 梭 菌3、魏 氏 梭 菌4、诺维氏梭菌5、肉 毒 梭 菌6、破伤风梭菌,几种病原性梭菌的生物学性状,1、气肿疽梭菌 Cl.chauvoei,又名费氏梭菌、黑腿病梭菌，是牛、羊黑腿病病原；形态学特性：,3）培养特性,4）生化特性,5）致病性,感染：消化道或创伤感染；症状：肌肉丰满部位发生气性肿胀、肌肉暗红。马、猪、猫、鸡等一般无感染
10、性，人也不受感染；实验动物：豚鼠和小鼠。,2、腐败梭菌 Cl.septicum,又名：恶性水肿梭菌；形态学特性：,3）培养特性,4）生化特性,产生4种外毒素和多种酶，毒素为主要致病因素。创伤感染马、牛、绵羊、山羊及猪等多种动物的恶性水肿；消化道感染羊快疫；鸡偶尔引起坏死性皮炎；人也可感染。实验动物：家兔、豚鼠、小白鼠等。,5）致病性,3、魏氏梭菌 Cl.perfringens,又名产气荚膜梭菌、镶边梭菌；形态学特性,产气荚膜梭菌（魏氏梭菌）取自气性坏疽病人脓液的革兰染色，显示粗的砖形革兰阳性杆菌。（革兰染色，放大1000倍）,3）培养特性,4）生化特性,5）致病性,由消化道或创伤侵入机体内，由
11、其所产生的毒素而致病；本菌主要产生4种毒素（）：毒素：卵磷脂酶，坏死、溶血、致死；毒素：DNA酶，杀白细胞；毒素：透明质酸酶；毒素：溶血素，不耐氧。,另外，有些菌株还可产生肠毒素、神经氨酸酶、血凝素等。据外毒素种类，可将其分为6个型：A、B、C、D、E、F 主要引起：人和家畜气性坏疽或肠毒血症；人和禽类坏死性肠炎；有时还可造成人的食物中毒。实验动物：豚鼠、小白鼠、鸽、家兔和幼猫等。,4、诺维氏梭菌 Cl.novyi,可引起绵羊、牛的气性坏疽和恶性水肿。根据产生的毒素可分为A、B、C、D四个型。AA型菌：又称为水肿梭菌、第II恶性水肿梭菌，人 人气性坏疽，绵羊大头病，动物的恶性水肿；BB型菌：又
12、称为巨大杆菌,羊黑疫；CC型菌：又称为水牛梭菌,水牛骨髓炎；DD型菌：又称为溶血梭菌,牛细菌性血红尿。实验动物：常用豚鼠、小白鼠等。,4）形态学特性,5）培养特性,6）生化特性,5、肉毒梭菌 Cl.botulinum,又称为肉毒杆菌，是引起人和动物的食物和饲料中毒的病原菌，形态学特性,3）培养特性,4）生化特性,5）致病性,厌氧条件下可分泌强烈的外毒素肉毒毒素。,蛋白质，不耐热，对酸性及蛋白酶抵抗力较强pH36时毒性仍保持稳定，不被胃肠液破坏，毒力是目前已知生物毒素中最强的一种，毒性比氰化钾强1万倍（1mg可致死2000万只小白鼠）；毒素被人、畜、禽食入后即可发病，出现特征性的神经中毒症状，引
13、起软瘫和麻痹，呕吐腹泻。,肉毒毒素,根据肉毒毒素的抗原性，可将肉毒梭菌分为：A、B、C、D、E、F、G等7个型，其中C型还可分为C和C两个亚型。,6、破伤风梭菌 Cl.tetani,为人畜共患破伤风的病原菌形态学特性,破伤风梭菌，革兰染色 破伤风梭菌是细的末端有芽胞的革兰阳性杆菌。芽胞中心不染氏。（革兰染色，放大1000倍）,Stained pus from a mixed anaerobic infection,3）培养特性,4）生化特性,5）致病性,此菌常存在于土壤和粪便中，通过皮肤和黏膜的伤口侵入人畜的机体。自然条件下，马猪、牛、羊、犬，人也易感，禽类及变温动物不易感。以骨骼肌发生强直性
14、痉挛为主要特征强直症，所以又名强直梭菌。在严格厌氧的条件下，可产生2种毒素：（1）破伤风痉挛毒素（tetanospasmin）：蛋白质，可被蛋白酶破坏，毒性非常强，仅次于肉毒毒素，主要作用于神经系统，发病动物发生特征性的强直症状。（2）溶血毒素（tetanolysin）：不耐热不耐氧，能使红细胞溶解，与破伤风梭菌的致病性无关。,This baby has neonatal tetanus.,This adult has a severe case of tetanus.,本菌有10个型，各型细菌产生的毒素具有相同的生物学活性及免疫活性。实验动物：常用豚鼠、小白鼠等。,三、梭菌属细菌的微生物学检查,注意：,必须以厌氧环境进行分离培养；对不同致病性的梭菌诊断时应区别对待有的需以分离和鉴定病原菌为主，有的则需以检测毒素为主，有的则需分离细菌并证实其产生毒素能力。测定厌氧菌生化特性也必须在厌氧条件下进行。,厌氧芽胞杆菌检查,肉渣汤培养基,牛乳培养基,高糖琼脂培养基,接种破伤风杆菌,接种产气荚膜杆菌,破伤风杆菌,产气荚膜杆菌,
