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1、,实验14.果蝇饲养与观察,1.了解果蝇生活史中各阶段的形态特点；2.识别雌雄果蝇及常见突变类型；3.掌握果蝇饲养与杂交技术。,一、实验目的,果蝇：野生型、白眼、黑檀体、残翅、白眼小翅焦刚毛用具:解剖镜、放大镜、小镊子、麻醉瓶、白瓷板、瓷缸 电子天平、电炉。试剂:乙醚、酒精、玉米粉、酵母,二、实验材料、用具及试剂,3.1 果蝇的生活史及形态特征 黑腹果蝇（Drosophila melanogaster 2n=8）节肢动物门、昆虫纲、双翅目、果蝇科、果蝇属，与家蝇是不同的种。,三、实验内容,包括卵、幼虫、蛹和成虫4个阶段；为完全变态。最适温度：20-25生活史周期：12-15 day(20-25
2、)10 day(26)57 day(10)交配产卵：羽化8-12h 交配 羽化两天后产卵成虫存活：15 day(25),3.1.1 生活简史,三、实验内容,羽化后的雌蝇12小时后开始交配，两天后产卵。卵长0.5mm，为椭圆形，腹面稍扁平，被绒毛膜，在背面的前端伸出一对触丝（filament）卵能附着在食物(或瓶壁)上，不致深陷到食物中去。,3.1.2 卵的形态与特征,三、实验内容,3.1.3 幼虫形态与特征,三、实验内容,幼虫生活7-8天准备化蛹，化蛹前从培养基上爬出，附着在瓶壁上，逐渐形成一梭形的蛹。蛹前部有两个呼吸孔，后部有尾芽，起初蛹壳颜色淡黄而柔软，之后逐渐硬化，变为深褐色。深色硬化蛹
3、表明即将羽化。,3.1.4 蛹的形态特征,三、实验内容,3.1.5 成虫的形态与特征,幼虫在蛹壳内完成成虫体型和器官的分化，最后从蛹壳前端爬出。刚从蛹壳羽化出来的果蝇虫体较长，翅膀尚未展开，体表尚未完全几丁质化，故呈半透明的乳白色。透过腹部体壁，可以看到黑色的消化系统。不久，虫体变为短粗圆形，双翅展开，体色加深。如野生型初为浅灰色，然后呈灰褐色。,三、实验内容,果蝇生活周期长短与温度关系很密切。30以上能使果蝇不育和死亡，低温使其生活周期延长、生活力下降，果蝇培养最适温度为20-25。,从表中可以看出，25时，从卵到成虫约10天；在25时成虫约活15天。,3.1.6 温度与生活史,三、实验内容
4、,1、生活史短，20-25下一个世代约12-15天；2、繁殖率高，一对果蝇可产卵400-500只；3、饲养方便；4、突变率高；5、形态容易辨认。,3.1.7 果蝇的优点,三、实验内容,3.1.8 果蝇的寄生虫螨虫,三、实验内容,头部：有一对复眼，三个单眼和一对触角。胸部：有三对足，一对翅和一对平衡棒。腹部：背面有黑色环纹，腹面有腹片，外生殖器在腹部 末端，全身有许多体毛和刚毛。,三、实验内容,3.2.形态构造,3.3成虫雌雄鉴别,三、实验内容,3.3.1 雌雄识别要点,三、实验内容,个体大、个体小,3.3.1 雌雄识别要点,三、实验内容,有性梳、没有,3.3.1 雌雄识别要点,三、实验内容,腹
5、纹3条，末端圆；腹纹5条，末端尖。,3.3.1 雌雄识别要点,三、实验内容,成体果蝇雌雄性别的辨别,体生殖孔空；体交配器圆,3.3.1 雌雄识别要点,三、实验内容,3.4 果蝇基因组与性别决定,三、实验内容,染色体组成 2n=8 核内有丝分裂：不涉及细胞核分裂的染色体分裂方式 体联会：唾腺细胞染色体经多次复制却不分开，依旧紧密地排列在一起就象减数分裂中的联会现象一样。染色体组：2n=2x=8,x=4。连 锁 群：4对染色体携带基因；连锁群=4。,3.4.1 果蝇基因组,为XY型，但Y染色体在性别上不起决定作用，只与育性有关。含有Y染色体可产生正常配子，不含Y染色体则配子不育；性别受性指数决定。
6、X/A=1为雌性；X/A=0.5为雄性；X/A1为超雌；X/A0.5为超雄；0.5X/A1则为中间性。雌雄基因平衡理论：X染色体上有很多雌性基因，常染色体上有很多雄性基因，Y染色体上很少或没有与性别决定有关的基因，因此性别决定于基因的平衡。,3.4 果蝇基因组与性别决定,三、实验内容,3.4.2 果蝇性别决定,X染色体上有141个基因；第2染色体上有228个基因；第3染色体上有156个基因；第4染色体上有12个基因。,3.4 果蝇基因组与性别决定,三、实验内容,3.4.2 果蝇的连锁群,3.4 常见的果蝇突变类型,三、实验内容,4.1.1培养基的配制 果蝇以酵母菌为食，常采用发酵的培养基繁殖酵
7、母菌来饲养果蝇。培养基常用玉米粉、米粉或香蕉配制，本实验采用玉米培养基，其配方如下：,四、实验步骤,4.1 果蝇的饲养,4.1.2 配制方法,四、实验步骤,4.1 果蝇的饲养,四、实验步骤,4.1 果蝇的饲养,4.1.3 注意事项,四、实验步骤,4.1 果蝇的饲养,4.1.4 果蝇继代转移培养,四、实验步骤,4.1 果蝇的饲养,4.1.5 果蝇继代培养,25培养7-10天，能见幼虫爬到瓶璧或滤纸上化蛹时，处死亲代果蝇。,四、实验步骤,4.2 果蝇性状观察,4.2.1 果蝇麻醉,四、实验步骤,4.2 果蝇性状观察,4.2.1 果蝇麻醉,死亡果蝇的标志,四、实验步骤,4.2 果蝇性状观察,4.2.
8、1 果蝇麻醉,四、实验步骤,4.3 突变性状观察,4.3.1野生型+,野生型红眼睛灰身体长翅型直刚毛,四、实验步骤,4.3 突变性状观察,4.3.2突变性状焦刚毛白眼小翅 sn w m,四、实验步骤,4.3 突变性状观察,4.3.3突变性状残翅Vestigical vg,四、实验步骤,4.3 突变性状观察,4.3.4突变性状黑檀体(e)和黑体(b),四、实验步骤,4.3 突变性状观察,4.3.5 焦刚毛(sn)突变性状种类,四、实验步骤,4.3 突变性状观察,4.3.6 突变性状小结,观察后的结果填入下表,四、实验步骤,4.3 突变性状观察,4.3.6 性状观察记录,注意事项,1、配制培养基时要将玉米粉及琼脂和白糖要分开煮。2、转移果蝇时要防止果蝇飞走。3、麻醉果蝇时要掌握麻醉尺度，需要用活体时，不可以麻醉过度使果蝇致死。实验后不用的果蝇要及时处死，不可放飞。,思考题,1、绘制雄性果蝇性梳图。2、如何区分果蝇的性别？3、简述果蝇被麻醉死亡后的状态。,
