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1、,实验动物的环境与设施,主要内容,一,.,实验动物环境,二,.,实验动物设施及其运行管理,一,.,实验动物环境,1,实验动物环境的概念,实验动物环境,：人工控制的，供实验动物繁,殖、生长的特定场所及相关条件，即围绕实验,动物的所有事物的总和。,实验动物设施,：界定实验动物的生存空间、,维持其需要的建筑物和设备。,一,.,实验动物环境,实验动物环境,外环境,内环境,大环境,小环境,一,.,实验动物环境,2,实验动物环境监控的意义：,（,1,）保证实验动物健康和质量标准化。,（,2,）为实验动物工作者提供适宜的条件，,并保障人们的身体健康，不受危害因素,的伤害。,（,3,）保障实验研究获得正确的结
2、果。,基因型,表现型,演出型,发育环境,周围环境,发育环境：生物体的基因组成胚胎发育过程中,环境因素影响，如母体生殖期健康状况等,周围环境：气候因素，理化因素，营养因子，,居住因素，生物因素等,3,实验动物环境控制与动物实验结果,的关系,R=(A+B+C)D,E,R,实验动物的总反应,A,实验动物种的共同反应,B,动物品种及品系特有反应,C,动物个体反应（个体差异）,D,环境的影响,E,实验误差,4,环境因素的分类,1.,气候因素,温度、湿度、风速等,2.,理化因素,光照、噪声、粉尘、有害气体等,3.,生物因素,空气中的微生物、社会因素和饲养密度等,4.,居住因素,笼具、垫料、给食器、饮水器等
3、,5,环境因素对实验动物的影响,（,1,）温度,20,-26,影响生长发育和繁殖,在低温环境下性周期出现较迟，产仔数减,少，死胎率增加，泌乳量及离乳率均减少，小,鼠尾长缩短；高温下雄性小鼠出现睾丸和附睾,萎缩，精子形成能力下降，怀孕大鼠死亡率增,加,12,14,16,18,20,22,24,26,28,30,32,体重,出生时,3,周龄,9,周龄,摄食量,8,周龄,摄水量,8,周龄,小鼠,体重,裸小鼠,摄食量,8,周龄,摄水量,8,周龄,育成期的体重增长,大鼠,哺乳期的体重增长,摄食量,摄水量,无显著差异,最适量,目标值,12,14,16,18,20,22,24,26,28,30,32,对小鼠
4、（,ICR,，裸鼠）和大鼠（,Wistar,）的体重、摄食量及摄水量无明显影响的环境温度范围,性,环境,温度,动物,数,周期,4,5,6,7,8,9,12,20,18.,3,1.9*,*,29.5,1.6,33.2,0.9,36.2,0.8,37.4,1.1,38.4,1.5,14,20,22.5,1.8,27.5,2.5,*,31.2,1.9,34.6,2.0,36.0,2.2,38.7,2.0,16,20,22.7,1.8,27.7,2.4,*,30.8,2.0,*,33.6,1.4,*,36.2,1.8,37.7,2.2,18,20,22.6,2.1,27.1,1.9,*,32.5,2.
5、2,34.6,2.7,36.4,2.4,39.1,3.3,20,20,23.6,0.7,30.1,1.3,33.1,1.4,35.4,1.7,37.7,2.0,38.1,1.8,22,20,23.3,0.7,30.6,1.0,33.3,1.1,34.8,1.3,36.9,1.4,39.4,1.8,24,20,22.7,1.2,29.6,1.1,33.0,1.4,36.9,1.6,38.0,1.6,39.4,1.8,26,20,22.2,1.1,28.9,1.0,32.7,2.0,34.0,2.1,36.4,2.0,37.3,2.5,28,20,19.7,1.4,*,25.8,1.4,*,29.
6、7,1.9,*,30.6,3.8,*,32.3,1.8,*,33.6,2.8,*,30,20,14.5,0.8,*,20.8,1.6,*,26.8,1.8,*,27.8,4.1,*,30.3,1.9,*,31.4,1.1,*,32,6,10.2,1.4,*,16.4,1.5,*,22.9,2.3,*,24.4,1.6,*,25.2,2.2,*,27.5,2.1,*,12,20,17.7,1.0,*,25.2,1.3,26.7,1.2,28.4,1.4,28.8,1.9,29.3,1.7,14,20,20.1,13,23.3,2.4,25.6,1.3,27.7,1.6,25.6,1.5,30.9
7、,1.8,16,20,19.6,1.5,23.0,1.9,25.4,1.2,27.1,1.4,28.7,1.6,30.1,1.4,18,20,20.0,1.3,23.7,1.6,25.8,1.4,27.7,1.7,28.4,1.9,29.4,1.9,20,20,20.5,1.2,25.7,1.0,26.9,1.2,28.4,1.6,29.9,1.8,30.9,1.7,22,20,20.8,1.3,26.0,1.5,27.4,1.6,28.4,1.4,29.5,1.7,29.3,2.1,24,20,20.0,1.2,24.8,1.0,26.9,1.3,28.5,1.7,29.8,2.3,31.0
8、,2.1,26,20,19.6,1.1,24.3,1.2,26.4,2.4,27.0,2.3,28.6,2.0,29.8,2.3,28,20,17.6,1.2,*,22.6,1.2,*,23.9,2.0,*,24.4,1.8,*,25.8,1.1,*,26.7,1.9,*,30,20,13.9,0.6,*,19.1,1.0,*,24.2,1.2,*,22.9,1.6,*,23.5,1.7,*,24.6,1.5,*,32,14,10.6,1.4,*,15.5,1.5,*,21.1,1.5,*,20.2,1.5,*,21.6,0.7,*,23.9,1.6,*,各种环境温度对小鼠发育的影响,处理,日
9、数,环境温度,23,环境温度,33,非妊娠,（例数,6,）,妊娠,（例数,6,）,非妊娠,（例数,14,）,妊娠死亡,（例数,7,）,妊娠生产,（例数,6,）,0,134.8,7.9,142.2,5.0,140.6,7.2,143.4,5.7,142.2,7.,2,4,134.5,3.7,144.8,6.1,140.6,10.9,142.3,10.5,138.0,9.,1,8,132.8,5.9,145.8,4.6,139.4,8.8,143.1,9.0,140.0,7.,9,12,133.2,5.7,159.3,6.3,153.9,10.4,152.0,6.3,170.3,2.,4,14,1
10、33.7,4.5,167.5,6.6,159.4,7.6,158.3,4.8,172.3,2.,1,16,134.0,2.8,165.7,5.2,158.6,5.9,159.0,4.0,169.3,5.,1,18,130.8,3.0,140.3,4.6,156.9,6.5,161.6,5.7,152.0,8.,1,19,130.8,1.7,142.2,5.4,157.3,5.2,160.3,5.5,144.5,7.,8,20,131.2,3.9,142.8,6.1,157.6,4.7,158.2,4.1,140.8,7.,9,21,131.0,0.9,145.0,7.6,156.8,5.2,1
11、60.5,3.7,143.3,6.,8,环境温度（,23,，,33,）对妊娠与非妊娠大鼠血压,（,1,）温度,影响代谢,温度影响代谢水平，摄食量与,温度呈负相关；影响呼吸和心跳,800,600,400,心,搏,数,分,200,300,250,150,呼,吸,数,分,35,25,15,环,境,温,度,1 60 120 180 240 300 360,环境温度的变化伴随小鼠（,Jc1,：,ICR,，雄，,8,周龄）心搏数与呼吸数的变化,暴露时间（分）,（,1,）温度,影响健康和抗感染的能力,激发应激反应,影响试验结果,温度与毒性的关系,温度对,3,种药物,LD,50,的影响,药物,LD,50,（,
12、mg/kg,）,15.5,26.7,苯异丙胺,盐酸脱氧麻黄碱,麻黄碱,197.0,111.0,477.1,90.0,33.2,565.0,表,4-1,不同环境温度时戊巴比妥钠（,95mg/kg,）,腹腔注射导致大鼠死亡率比较,环境温度()给药动物数,(,只,),死亡动物数,(,只,),死亡率,(%),12 20 20 100,14 20 20 100,16 20 20 100,18 20 10 50,20 20 10 50,22 20 10 50,24 20 10 50,26 20 7 35,28,20,6,30,30 20 11 55,32 20 16 80,（,2,）,湿,度,40%-70
13、%,绝对湿度：每立方米空气中的实际含,水量（,g,）。,相对湿度：在特定温度下，空气中的,实际含水量与该温度的饱,和含水量的百分比。,湿度变化对实验动物的影响,高温、高湿时，动物体的蒸发受到抑制，,容易引起代谢紊乱，动物机体抵抗力下,降，发病率增加。,高湿的情况下有利于病原微生物和寄生,虫的生长繁殖。,?,低温、干燥大鼠易发生环尾病，湿度达,20%,时，大鼠几乎均患此病，湿度在,40%,时，有,25.3%,发生，不同品系发病率不同。,?,低湿时哺乳母鼠易发生,吃仔现象，仔鼠发育不,良，体重增长停滞。,湿度突然降低,（,3,）气流和风速,0.1-0.2m/s,对体热散发的影响,对屏障设施的影响,
14、（,4,）光照,150-300Lux,影响生理及生殖机能,影响视力,（,5,）噪声,60db,对生殖生理的影响,可造成听源性痉挛,对实验结果的影响,(6,）空气洁净状况,气体污染，,氨,14mg/m3,有害气体,，氨、甲基硫醇、硫化氢等,颗粒污染,，,100,级，,10000,级，,100000,级,美国宇航局标准，每立方英尺空气中直径,0.5,微米以上粒子的个数。,粉尘颗粒，是变应原，还是微生物的主要载,体。,（,7,）空气中的微生物,空气中的微生物洁净度是实验动,物环境最为重要的监测指标之一。常,常以,空气落下菌数,表示，,普通环境小,于或等于,30,个,/,皿，屏障环境小于或,等于,3,
15、个,/,皿，隔离环境无检出,。,微生物感染,寄生虫感染,实验动物繁育、生产设施环境指标（静态）,动物实验设施（设备,3,）,）环境指标（静态）,（,8,）饲养密度和社会因素,各类动物所需居所最小空间,项目,小鼠,(g,）,大鼠,(g,）,豚鼠,(g,）,20 150 350,单养,(m2),0.0065 0.01 0.015 0.025,0.03 0.065,群养,(m2),（母,+,同窝仔）,0.016 0.08 0.09,只,最小高度,(m),0.13 0.15 0.18 0.18 0.18 0.22,饲养密度,饲养室每平方米面积收容,的成年实验动物最大密度，大,约是小鼠,100,只、大鼠
16、,50,只、豚,鼠,20,只、兔,4,只、狗,1,只、猴,1,只。,饲养空间狭小,二,实验动物设施,实验动物设施的一般组成：,饲育室、实验室、检疫室、,洗刷消毒间、废物处理设施、,办公室、机房、库房等,实验动物设施的分类：,（一）,普通环境,（二）,屏障环境,（三）,隔离环境,普通环境,该环境设施符合动物居,住的基本要求，不能完全控制传染因子，,适用于饲育教学等用途的普通级动物。,通常为单走廊或双走廊专用房舍，装,设有空调机、送风和排风装置以及初、中,效空气过滤器。从而使室内温度、湿度受,一定程度的控制。应有防野鼠、防昆虫设,施，笼具和垫料要消毒，饲料应确保未经,污染。工作人员进入时应采取一定
17、的防疫,措施。,2.,屏障环境,该环境严格控制人员,、物品和环境空气的进出，适合饲养,清洁动物和,SPF,动物。,SPF,级屏障环境可为正压屏障构造、,负压屏障构造,(,生物安全屏障系统,),。,亦常将隔离器用作,SPF,级屏障环境。,屏障环境设计上要求基本与外界隔,离，设清洁和污物走廊。空气要经过初,、中、高效三级过滤器净化后才能进入,室内。除特殊用途的生物安全屏障环境,为负压外,屏障环境内通常应保持正压,，不低于,2050Pa,；,进风口风速要大于,4m/s,，出风口应有防止空气倒流装置。,其空气洁净度要达到,10,000,级。,屏障系统人、物、动物的流动方向,人,一更,淋浴,二更,风淋,
18、笼具、垫料、饲料消毒灭菌洁净储物,动物,接收,消毒传递,检疫间,功,能,区,域,洁,净,走,廊,次,洁,净,走,廊,洗刷消毒间,污,染,走,廊,实,验,室,消,毒,后,室,储,物,间,实,验,室,实,验,室,清,洁,走,廊,管,理,区,检,疫,室,饲,养,室,饲,养,室,饲,养,室,风,淋,二,更,接,收,间,淋,浴,污,染,走,廊,一,更,外,走,廊,设施建筑要求,走廊,门、窗,地面,墙壁、天花板,屏,障,系,统,屏障系统相关设备,空调方式,空调设施,气流组织,空气净化,热消毒法,消毒与灭菌设备,化学消毒法,紫外、射线消毒法,3.,隔离环境,该环境采用无菌隔离器以保存无菌或无外来,污染的动物
19、。适用于饲养,SPF,动物、无菌动物和,悉生动物。,隔离器可置于普通环,境中运转，应严格控制,环境温度和湿度。工作人,员只能通过附于隔离器,上的橡胶手套，对隔离器,内的实验动物进行饲养和,实验操作，而不可能直接接触实验动物。,隔,离,系,统,实验动物的饲育器材,一,笼具,1.,保证动物的健康、舒适,2.,便于清洗和消毒,3.,操作方便,4.,坚固耐用,垫料,垫料的原料主要有锯末、木屑、电刨,花、粉碎玉米芯等。,国外尚有膨化系,列垫料，吸附力,强。,引进动物进入,SPF,室,?,从外面引进的动物必须有,与其适用范围相符的实验,动物,生产许可证,和,当年检,测报告,同时必须附带动物,的品系、性别、
20、年龄等信,息经实验动物中心工作人,员审查后方可准备进入动,物房,?,动物运输时必须有,合格的包装箱,清洁,级及以上动物包装,箱必须以高效滤膜,封闭窗口，包装箱,以胶带封口，封口,破损或滤膜破损者,不得传入屏障系统。,?,将检查合格的动物包,装箱在外准备间以,75,酒精棉球或,5%,碘,伏仔细擦拭表面,将,包装箱放入灭菌通道,进行喷雾消毒或紫外,线消毒,?,在内准备间打开灭菌,通道的门,在门口拆,开包装箱,轻轻提起,鼠尾根部，放入准备,好的盒子中，盖好盖,子,动物包装箱仍退,回灭菌通道,将刚装,了动物的笼盒放在架,子上,并填写、悬挂,卡片，加饲料，饮水,从外准备间打开灭,菌通道，取出动物包,装箱
21、。,注意,:,?,新引进动物应在单独房间，单独笼架饲养一,段时间,待观察健康无病后再移入其它房间,?,不得向屏障动物房内传入不符合相应的实验,动物生产许可证的动物,!,实验用品和器具进出,SPF,室,?,用,75%,酒精或,5%,碘伏仔细擦拭消毒物品表,面紫外灯照射,15min,或直接喷雾消毒,?,手术器械可经高压消毒或经消毒液中浸泡,后在紫外灯下照射,15min,传入,?,小型仪器经灭菌通道喷雾消毒后传入,动物实验废弃物品的处理,?,垫料等废弃物与动物笼盒一起从,缓冲间出系统,?,注射器等尖锐物品套上套子后再,放入垃圾桶,以防刺伤工作人员,?,屏障内无排水系统,液体废弃物请,传出系统后再处理,?,废弃的动物包装盒从灭菌通道出,系统,?,口罩、手套、帽子、鞋套为一次,性物品,用过后就应丢弃,灭菌工,作服可放在一更,中心工作人员会,对其进行处理,谢谢大家！,
