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1、临床微生物标本的采集与运送,垫江县人民医院检验科临床微生物室,基本原则,及时采集微生物标本作病原学检查在抗菌药物使用前采集标本采样时严格执行无菌操作采样后立即送检棉拭子标本宜用运送培养基混有正常菌群污染标本，不可置肉汤培养,血培养标本,采集与运送,血培养的采集指征,可疑血流感染患者出现以下一项或几项体征时应及时采集血培养：发热（38）或低温（36）.寒战。白细胞增多（计数大于10109/L，特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞）。粒细胞减少（成熟多核白细胞小于1109/L）血小板减少。,皮肤黏膜出血。昏迷.多器官衰竭血压降低呼吸加快降钙素原升高（PCT）C反应蛋白升高（CRP）,血培养的采集
2、时间,对怀疑菌血症、真菌血症的患者，在考虑使用抗菌药物之前，应立即采集血培养标本。必须同时或间隔短时间内采集套以上血培养标本。,血培养的采集次数,患者：推荐同时采集套（不同部位）血培养标本。（即双瓶双臂同时采集血培养标本。）婴幼儿患者：推荐同时采集次（不同部位）血培养标本。,血培养的采血量,成年患者：推荐采血量为每套不少于10ml，每瓶不少于5ml。婴幼儿患者：推荐采血量每瓶不少于2ml。（少于病人总血容量的1%）。,采集方法,防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键问题，采血前严格执行消毒程序。培养瓶消毒程序：在采血之前，血培养瓶的橡皮塞需使用70%酒精消毒并干燥。然后再进行穿刺部
3、位的皮肤消毒。皮肤消毒程序：严格按照“酒精、含碘消毒剂、酒精”的消毒步骤操作，并等待足够的消毒时间。培养瓶接种程序：抽取血液后，不要换针头，直接注入血培养瓶中，轻轻颠倒混匀，以防血液凝固。,血培养标本的运送,采集后的血培养瓶应在1小时之内送往实验室。血培养瓶在采血接种后在室温不超过数小时。血培养瓶在接种前和接种后均不得冷藏或冷冻。,血培养瓶标识,标识内容应包括病人姓名、病员号、标本种类、采集时间。病人标识不可黏贴在血液培养瓶上。,导管相关的血流感染,短期外周导管：通过静脉穿刺获得病人的两套外周血培养。无菌操作拔去导管并半定量培养。中心静脉导管及静脉留置口：至少两套血培养，其中至少一套采集自外周
4、血静脉，另一套应该从导管口或VAP隔膜无菌采集，两套血培养采集时间应相近。,痰培养标本,采集与运送,咳痰途经口咽部,唾液中口咽部定植菌的浓度可达108-109/ml。研究显示，国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现象。,不可避免地受到污染,痰标本的采集方法,自然咳痰：采集标本前，应冷开水漱口刷牙，然后用力从气管深部咳出痰液，放入痰杯内。下呼吸道肺泡灌洗，支气管刷洗，气管抽吸：将抽吸物或灌洗液直接放入痰杯内，刷出物放入1ml无菌生理盐水的痰杯中。诱导咳痰：刷完牙龈和舌头后让患者用水漱口，借助喷雾器使患者吸入约25ml 3%5%的无菌盐水诱导咳痰。,痰标本的采集量,1ML，支气管肺泡灌洗，应采集
5、10-100ML,痰标本运送,尽快（2h）送至实验室。如不能及时送达，应将标本暂存于4，但放置时间不可超过24h。合格的痰标本应10个鳞状上皮细胞/LPF。,痰培养的拒收,光学显微镜细胞学检查发现口咽分泌物污染明显。没有标签或贴错标签。运送容器选择不当或有渗漏。同一天同一试验重复送检2次。标本采集不符合要求。延时送至实验室的标本。,尿培养标本,采集与运送,采集指征：,有典型的尿道刺激症状肉眼脓尿或血尿尿常规检查表现为白细胞或亚硝酸盐阳性（几个+号）不明原因的发热，无其他局部症状留置导尿管时间超过48h的患者出现发热膀胱排空功能受损泌尿系统疾病手术前。,采集方法：,尽量取早晨第一次尿液弃去开始流
6、出的尿液，以冲刷尿道口的细菌，取能代表膀胱部位病原菌的中段尿详细告知病人以下操作步骤女性病人收集标本前用清洗液冲洗干净，从前向后仔细擦洗尿道区域分开阴唇，开始排尿排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿男性病人回缩包皮并清洗龟头排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿,导尿管尿液,集尿袋内的尿液不能用作培养；导尿管末端的尿液也不能用于培养，因为很难避免没有尿道菌群污染。留置导管尿液标本常通过专门的采样端口采集，不能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液。采样端口用酒精消毒；必要时，可先夹住导尿管但不能超过30分钟；将注射器针头插入采样端口，抽吸出尿液；注入无菌杯或试管中,标本运送,收集中段尿液5-10ml，及时
7、送检。室温保存下不得超过2小时，否则应置于 4冰箱保存，保存时间不得超过24h。,粪便培养标本,采集与运送,采集指征：,当腹泻患者出现以下任何一种情况时建议采集粪便标本，进行细菌培养：粪便涂片镜检白细胞5/HP体温38.5重症腹泻血便或便中有脓液未经抗菌药物治疗的持续性腹泻病人来自肠道传染疫区的患者,粪便标本的采集方法,自然排便采集标本时，取有脓血、粘液、组织碎片部份的粪便13g（花生米大小）。液体粪便则取絮状物，一般取13ml，直接装入粪便容器或运送培养基中送检。直肠拭子采集粪便标本：先以肥皂、水和70%酒精，将肛门周围洗净，然后用经无菌盐水湿润的棉拭子插入肛门超越肛门括约肌约2-4cm，与
8、直肠粘膜表面接触，轻轻旋转，必须将棉拭子置于运送培养基中送检。,粪便标本的运送,一般粪便标本装于无菌封闭广口塑料杯；直肠拭子置于肠道运送培养基。做霍乱弧菌检查的粪便标本置于碱性蛋白胨水试管中。粪便标本：室温1小时内送至。直肠拭子：室温1小时内送至。高度怀疑霍乱弧菌感染的标本室温1小时内送至，运送必须符合特殊标本的安全要求。,脑脊液标本,采集与运送,脑脊液标本的采集方法,按脊椎穿刺操作规程，采集约3-5ml脑脊液于3支无菌试管中，每支试管至少1-2ml，然后马上将第2支（或第1支）送至实验室。做脑脊液培养时，建议同时做血培养。腰穿时必须作彻底消毒和无菌操作。,脑脊液标本的运送,常温立即送检，实验
9、室收到标本后应立即接种。脑脊液标本送检的理想时间为15分钟内，半小时送检是可接受的，如果送检时间超过1小时，则会影响结果，在结果报告时，在备注处注明此情况。如不能及时送检，可使用血培养瓶（怀疑脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌感染时，请勿使用血培养瓶）,穿刺液标本,采集与运送,穿刺液标本的采集方法,由临床医生进行。胆汁的采集方法有三种：十二指肠引流法（以“B”管来自胆囊，做细菌培养意义较大）、胆囊穿刺法及手术采取法，由临床医生采取，约2ml左右放入无菌密封容器立即送检。其它穿刺液的采集方法：2%碘酊消毒要穿刺的皮肤后，由临床医生穿刺采集标本（2ml左右），装入无菌密封容器立即送检。,穿刺液标本的送运,采
10、集后应正确盖好，防止泄漏或容器外部留有残留物。保温立即送检，保证在15min内送至实验室，实验室收到标本后应立即接种。为提高阳性率，像胸腹水等标本，可接种到血培养瓶中送检。,手术切口与软组织感染标本,采集与运送,采集方法,未破裂脓肿：不能用拭子。消毒覆于脓肿表面的皮肤，用注射器将脓肿内容物吸出。然后切开脓肿、引流，取部分脓肿壁送检。用于厌氧培养。开放病灶和脓肿：尽量去除表面菌群，用拭子采集病灶及底部或边缘的标本，置于需氧培养基中。开放病灶不能做厌氧培养。脓疱或水疱：酒精消毒使之干燥，对于患儿用23号针头挑破脓疱，拭子采集脓疱液和基底部标本。,注意事项,迅速送往实验室，1小时内不能培养应将标本冷藏。皮肤消毒对培养结果至关重要。革兰染色对标本进行评估。涂片中如出现上皮细胞提示标本已被污染。没有上皮细胞而有白细胞说明标本采集正确。不要仅送检脓液。脓液不能代表伤口特点，应在病灶活动区域或基底部采集标本。,生殖道标本,采集与运送,生殖道标本的采集方法,不建议做常规培养。（此部位容易被正常菌群污染，培养结果很难解释甚至误导）。应根据感染的部位和可能的病原体决定采集方法。,正确的微生物标本采集和运送，是准确的病原学诊断的前提！,谢谢!,
