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1、2023/3/27,1,临床微生物标本的正确采集方法与运送,2023/3/27,2,微生物让人类步步为营,我们应该追求:“准确的病原学诊断”“针对性病原学治疗”正确的微生物标本采集和运送,是准确的病原学诊断的前提,2023/3/27,3,基本原则,1.及时采集微生物标本作病原学检查2.在抗菌药物使用前采集标本3.采样时严格执行无菌操作4.采样后立即送检5.棉拭子标本宜用运送培养基7.标本容器须灭菌处理,但不得使用消毒剂。8.送检标本应注明来源和检验目的,2023/3/27,4,如何提高细菌阳性检出率,标本采集时机标本采集方法标本的质与量标本的运送与保存镜检筛选合格标本高质量、多种分离培养基培养
2、环境合理的收费制度,2023/3/27,5,血培养标本采集与运送,2023/3/27,6,用机关枪打鸟或用牛刀杀鸡的时代已经过去抗感染需要:瞄准器、激光制导炸弹,MRSA?ESBL?VRE?PDR-AB?白念?曲霉?,2023/3/27,7,采血培养前质量保证:皮肤消毒程序,1.70%酒精擦拭静脉穿刺点 30秒钟2.1%2%碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒 从穿刺点向外画圈消毒,直径3cm3.70%酒精脱碘,徐英春,倪语星等。血培养操作规范,上海科学技术出版社,2023/3/27,8,采血培养前质量保证:培养瓶消毒程序,1.70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞,待60秒2.用无菌纱布清除橡皮塞子表面剩
3、余的酒精,然后注入血液。,徐英春,倪语星等。血培养操作规范,上海科学技术出版社,2023/3/27,9,1.在穿刺前或穿刺期间,防止静脉滑动,用戴乳胶手套固定静脉,不可接触静脉穿刺点2.用注射器无菌穿刺取血后,勿换针头(如果行第二次穿刺,应换针头)直接注入血培养瓶。,采血培养前质量保证:静脉穿刺和培养瓶接种程序,徐英春,倪语星等。血培养操作规范,上海科学技术出版社,2023/3/27,10,你认为对吗?为了提高病人血培养的阳性率,最好的抽血时间是:,A.发热开始时B.寒战开始时C.发热最高峰时D.寒战结束时E.预计寒战发热前,2023/3/27,11,细菌量,体温,时间,上升幅度,2023/3
4、/27,12,血培养的数量,研究结果一套血培养的阳性率为65二套血培养的阳性率为80三套血培养的阳性率为96CLSI建议方针对于每位需要血培养的患者需采取2至3套。对于成年患者的血培养,只采单一的血培养是不允许的。因为单一血培养的结果的临床意义很难解释。采血培养后的2至5天内,不需要重复采血培养,因为治疗后的2至5天内血液中的感染细菌不会马上消失。,CLSI指南:血培养的原则和流程,2023/3/27,13,血培养的采血量和时间,对于成年患者,每套血培养瓶推荐的采血量为0至0ml对于婴幼儿患者,采血量不超过患者总血量的1采血尽量在抗生素使用之前完成,2023/3/27,14,标本的运送,血培养
5、瓶在采血接种后必须马上送检血培养瓶在采血接种后在室温中不得超过数小时血培养瓶不得在采血接种后放入冰箱或冷冻,2023/3/27,15,特别注意:感染性心内膜炎,抽取血培养的时机必须在根据经验使用抗生素前30分钟之内抽取血培养(1)在30min-1h之内连续抽取数套血培养;(2)皮肤消毒尤为重要,因为其主要的病原菌为皮肤定植菌如凝固酶阴性的葡萄球菌。必须取自外周静脉而非留置的静脉装置,否则会判有很高的污染风险从而导致错误的心内膜炎结论;抽取血培养的数量最佳的血培养数量不确定,但只抽单瓶血培养是不够的多套血培养可以帮助区别血培养假阳性(如皮肤污染等)建议:起始采集3套血培养,如24小时内仍报告阴性
6、,则继续采集2套血培养,全部培养为5套。,2023/3/27,16,阳性血培养三级报告制度,1血培养仪报阳性时,首先查看细菌生长曲线,以确定阳性报警。2、卸下阳性可疑瓶后,找到相应化验单,并在登记本上进行登记(包括日期、时间)。3、因血培养瓶中可为不可知细菌,可能为高度致病性,应视为高度生物危害性,操作人员戴口罩、手套,在生物安全柜中进行转种、涂片和初步药敏试验。4、与临床医师进行沟通,了解病人情况,并把涂片结果告知临床医师,作为一级报告,并进行登记。见危急值报告制度5、第二天将进行初步药物敏感结果报告临床,作为二级报告。6、将最终细菌鉴定结果和药敏试验结果以报告形式回报临床,作为三级报告。,
7、2023/3/27,17,血培养标本的拒收,标签错误或在血培养瓶上未贴标签破损的或渗漏的血培养瓶血液凝固的血培养瓶含有抗凝剂的血培养瓶,2023/3/27,18,痰培养标本采集与运送,2023/3/27,19,病原体种类繁多而复杂使下呼吸道感染病原诊断成为难题,细菌(包括放线菌与奴卡菌,厌氧菌与分枝杆菌)真菌(包括肺孢子菌)病毒支原体、衣原体与立克次体原虫寄生虫,2023/3/27,20,我国痰细菌培养现状,标本送检率低苛养菌检出率极低结果重复性差报告速度慢感染菌与污染菌不易区分药敏结果与治疗反应存在差距,2023/3/27,21,标本采集方法医师或护士直视下采集标本病人先漱口,去除表面的菌群
8、教育病人深咳,收集从下呼吸道咳出的痰液临床上约半数咳痰标本不合格!,咳痰标本,2023/3/27,22,关于咳痰标本,在抗生素应用前采集痰标本;标本采集后12h内必须立即进行实验室处理;咳痰标本应用最早且广泛,但也是最受争议的标本;取标本前应摘去牙托,清洁口腔如刷牙和漱口;深咳,采集标本过程中要有专业的医务人员指导;无痰可用35NaCl 5ml雾吸约5min导痰;也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰;对于细菌性肺炎,痰标本送检每天1次,连续23天。怀疑分枝杆菌感染者,应连续收集3天清晨痰液送检,2023/3/27,23,小儿取痰方法,用压舌板向后压舌,用棉拭子伸入咽部,小儿经压舌刺激咳
9、嗽时,可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上,取后送检。,2023/3/27,24,2023/3/27,25,2023/3/27,26,经人工气道采样,导管吸痰(ETA)防污染毛刷(PSB)防污染灌洗(PBAL),2023/3/27,27,咳痰标本不合格,你退检吗?,如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于10个,应不做或仅在特殊要求时做培养。如做培养,报告中注明“镜检结果表明标本口咽分泌物污染明显”。复旦大学中山医院的做法痰液外观:脓性,粘脓,粘液,水样.镜检:WBC?,SEC?痰标本质量评价:合格,不理想(建议重送),2023/3/27,28,尿培养标本采集与运送,2023/3/27,29,尿液,中段尿导尿管导尿经耻骨上皮肤穿刺采集膀胱内尿液送检标本以晨起第一次尿液为佳不能立即送检者,可暂存4冰箱,