凝血功能异常检测方法及病例课件.pptx

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1、一般情况:姓名:李XX性别:女性年龄:41 岁籍贯:湖南湘西,主诉:牙龈出血,胸部瘀斑10天现病史:患者10前无明显诱因出现牙龈出血,胸部瘀斑,伴有腹痛,于当地村卫生所诊断为“贫血”,服用保健品(氨糖)后,症状无明显改善,于x天后出现晕厥,遂于当地人民医院就诊,凝血功能发现PT 60 sec,APTT 80 sec,腹部B超示黄体破裂,其他诊疗措施不详。为求进一步治疗于我愿急诊留观,我院BR:Eosinophil count:0.59*109/L,Eosinophil percent:10.1%,余正常;凝血功能:PT:Unmeasured,INR:Unmeasured,APTT:84.9 s

2、ec,Prothrombin time activity(PTA):Unmeasured,凝血因子活性检测:F XI%:65.9%,F X%:8%,F IX%:12.3%,F VII%:4%,F II%:9.5%。患者自述于半月前食用发瘟的鸡,同食其余人无类似症状,发病以来其他症状和一般情况不详。,Blood routine examination:MCV:92.6 fLHct:37%MCHC:325 g/LHb:120 g/LPDW:16.8 fLRBC:4*1012/LRDW:14.8%WBC:5.84*109/LPCT:0.12%MPV:11.9 fL,Monocyte count:0.

3、19*109/LLymphocyte count:2.18*109/LBasophil count:0.7*109/LEosinophil count:0.59*109/L Neutrophil count:2.84*109/LBasophil percent:0.7%Eosinophil percent:10.1%Neutrophil percent:48.6%Lymphocyte percent:37.4%Monocyte percent:3.2%,F XII%:90.6%F XI%:65.9%F X%:8%F IX%:12.3%F VIII%:130.7%F VII%:4%F II%:9

4、.5%,PT:UnmeasuredINR:UnmeasuredProthrombin time activity(PTA):Unmeasured,AT-III:94.1%FDP:1.68 ug/mlD-Dimer:0.11 mg/LAPTT:84.9 sec TT:18.3 secFIB:2.75 g/L,1、毛细血管脆性试验(CRT)2、出血时间测定(BT),一、血管壁与血小板相互作用的试验,二、血小板数量和功能,1、血小板计数(PCT)2、血小板释放功能(PRT)3、血小板聚集功能(PAgT)4、血小板AA代谢试验5、血块收缩试验(CRT),三、血管内皮细胞功能试验,1、血管性血友病因子(

5、vWF)检测2、PGI2代谢产物检测3、血栓调节蛋白(TM)检测,四、血小板膜糖蛋白(GP),1、血小板质膜GP2、血小板颗粒膜GP,五、血小板自身抗体检测,1、血小板特异性自身抗体检测-MAIPA,1、凝血时间(CT)2、部分凝血活酶时间(APTT)3、血浆凝血酶原时间测定(PT)国际标准化比值(INR)-1.82.5.华法林检测指标4、血浆纤维蛋白原测定(FIB)5、血浆单个凝血因子促凝血活性检测,六、凝血试验,1、凝血酶时间(TT)2、血浆抗凝血酶检测(AT)3、血浆蛋白C和蛋白S检测:Vit.K依赖抗凝蛋白4、肝素定量检测5、狼疮抗凝物检测(LAC)6、血浆凝血因子抑制物检测(FI)7

6、、血浆凝血酶-抗凝血酶复合物检测(TXT),七、抗凝血试验,1、血浆纤维蛋白(原)降解产物检测(FDP)2、血浆D-二聚体检测(DD)3、血浆鱼精蛋白副凝固试验(3P test)4、血浆纤溶酶原检测(PLG)5、血浆组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及其抑制物(PAI)检测,八、纤维蛋白溶解功能试验,1、全血黏度-血细胞、血浆2、血浆黏度-血浆蛋白,九、血液流变学检测,血栓弹力图(thromboela-stogram,TEG),R:凝血因子反应时间,反映参加凝血启动过程的凝血因子的综合作用,代表凝血因子的总体活性MA:最大振幅,反映已形成的血凝块的最大强度或硬度,主要代表血小板的聚集功能。K和角

7、:二者均是血凝块聚合速度参数,反映血凝块形成的速率,代表纤维蛋白原的功能与水平。LY30:MA值出现后30分钟内血凝块溶解百分比,反映纤溶活性。EPL:预测MA值出现后30分钟内血凝块溶解百分比,反映纤溶活性。CI:综合凝血指数,反映不同条件下凝血的综合状态。AA抑制率(花生四烯酸抑制率):反映服用阿司匹林等药物后病人血小板抑制的百分率,大于等于50%药物起效。ADP抑制率(二磷酸腺酐抑制率):反映服用波利维等药物后病人血小板抑制的百分率,大于等于30%药物起效。,目前血栓弹力图的种类和主要用途,Sonoclot工作原理,与超声传感器相连的一次性塑料探针在新鲜未抗凝的血液标本中以的频率上下震动

8、,所遇到的阻力被记录下来,转化为模拟电信号血液样本体外止血,粘弹性变化的实时测算,Sonoclot曲线图,T1:又称SonACT,指加入血液标本到纤维蛋白开始形成的时间,即血液标本保持液态的时间,与凝血因子相关,正常值85-145S。R1:反映进一步的纤维蛋白形成及凝结速率,主要与纤维蛋白原水平有关,正常值14-45mm/minR2:纤维蛋白与血小板发生交联后产生凝血收缩,正常值-(2-8)mm/minPeak:纤维蛋白形成结束,其高度反映凝血收缩的强度,70-90mmTP:反映凝结收缩的快慢程度,正常值15minT3:反映纤维蛋白溶解,回到或低于T基准线时表示存在纤维蛋白溶解亢进。,Sono

9、clot临床应用,抗凝管理术期凝血功能监测DIC辅助诊断高凝状态的识别,血小板功能试验,CONTENTS,一般血小板功能测定,血小板计数出血时间()血块收缩实验(),血小板聚集功能测定,光学比浊法电极阻抗聚集度测定法VerifyNow 法血栓弹力图仪检测法血小板功能分析法,光学比浊法,将血液通过离心方法获得富含血小板的血浆,采用不同浓度的一系列血小板受体诱导剂(花生四烯酸、腺苷二磷酸、肾上腺素)刺激富含血小板的血浆后,由于血小板聚集、沉淀,血浆浊度下降,经光源照射,其透光率增加,从而测定激活血小板间的聚集程度。,原理,所需血样本量大,需要专门制备富含血小板血浆;耗时长,容易导致血小板活性降低;

10、由于预先去除了红细胞、白细胞,不能完全反映人体内血小板和红细胞之间的相互作用;激活剂类型、浓度无统一标准,不同实验室检测结果可比性较差;检测结果易受操作者因素及血脂水平、血小板计数等变量的影响,可重复性差。,光学比浊法,缺点,电极阻抗聚集度测定法,原理,全血样品通过装置内两个固定距离的铂电极、激动剂(花生四烯酸、腺苷二磷酸、肾上腺素)激活血小板受体,使血小板黏附到两个铂电极表面,通过传感器单元感应电路阻抗的改变,用计算机自动计算出曲线下面积,以表示血小板的聚集度。,VerifyNow 法,将纤维蛋白原涂层的聚苯乙烯球形微粒混入全血中,使用花生四烯酸、腺苷二磷酸或凝血酶受体激活肽分别作为血小板激

11、活剂,而血小板聚集将导致待测样本的透光度增强,以此测定残余的血小板聚集功能。,原理,血小板功能分析法,使全血通过反应盒内包被着胶原腺苷二磷酸或胶原肾上腺素的硝酸纤维膜上的微孔,血小板因高切应力和诱导剂黏附到胶原蛋白上并活化聚集,形成血小板栓子,通过测定将微孔完全阻塞的时间即闭孔时间,评估血小板功能。,原理,试剂盒,试剂盒是由数个集成部件所组成,包括一个毛细血管,一个样品贮存器和一个生物活性膜。该生物活性膜的表面均匀分布着一簇圆孔。,Col/EPI试剂盒(CEPI),Col/ADP试剂盒(CADP),INNOVANCE PFA P2Y试剂盒(PFA P2Y),操作过程,将800 ul的3.2%或

12、3.8%的枸橼酸钠抗凝的全血注入试剂盒的贮存器中,随即开始检测,一滴触发液会滴在生物活性膜上,用来溶解生物活性膜上的试剂;试剂盒会在(37.91.0)下温育3 min;贮存器中的全血会被负压抽吸,通过毛细血管和生物活性膜的孔,在高剪切应力下,使血小板充分暴露,粘附和聚集在生物活性膜上。由于高剪切力和激动剂共同作用,使血小板凝结成块,堵塞了生物膜上的所有孔道,整个实验停止。从全血被负压抽吸到生物活性膜的孔被凝块全部堵塞而血流停止的这段时间被定义为封闭时间(CT),单位为秒(s),应用,监测抗血小板药物,阿司匹林,氯吡格雷,应用,对血管性血友病(vWD)的筛查手术出血风险的管理,血小板活化功能测定,方法,流式细胞术,对全血中血小板膜糖蛋白进行免疫荧光标记,通过荧光和光散射特性鉴别出血小板后,可测定血循环中血小板的活化状态以及血小板对激活物的应答反应。活化血小板与静息血小板相比,其膜糖蛋白可发生显著变化,这一特性使其成为活化血小板的检测标志物。,原理,THANK,

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