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1、itek 2 Compact常见问题V1.0Link to pdf目录：1. 关于Vitek 2 Compact产品信息Vitek2 系统（5.01） 有几种鉴定卡？各鉴定哪类细菌？Vitek2 系统（5.01）有几类药敏卡？什么途径了解所用的培养基适合上机鉴定或做药敏试验？2. 关于鉴定和药敏试验为什么要做菌液纯度检查？有何意义？如何确定卡片的孔位号？有何用途？何为“真正”MIC？为什么 Vitek2 药敏卡34个抗生素浓度（Concentrations）可测56个MIC值范围（Calling Range）？用户反映使用 AST-GP67 卡后感觉金葡菌万古霉素耐药比以前多（假耐药），为什么
2、？AST-GP67卡中的 ICR （诱导型克林霉素耐药试验）的原理?AST-GP67药敏卡中没有替考拉宁，想报告此抗生素结果怎么办？AST-GP卡对于葡萄球菌有几种抗生素结果不出，原因有哪些？用户发现用 Vitek2 系统鉴定犬巴斯德菌 ID%为99% （极好的鉴定）但不出药敏结果，为什么？为什么 Vitek2 系统嗜麦芽窄食单胞菌药敏试验只报告复方新诺明结果，而 CLSI 可以做 6 种抗生素的 MIC？AST-GN13、GN14卡中的 ESBLs检测是确认试验吗？新的 CLSI 发布后这些药敏卡检测 ESBL 还有意义吗？为什么奇异变形杆菌不能在 VITEK2 系统上做 ESBLs 确认？
3、为什么 AST-GN09 卡的结果中头孢呋辛有 2 个结果，即 Cefuroxime （头孢呋辛钠） 和 Cefuroxime Axetil （头孢呋辛酯）？3. 关于专家系统何为第一代、第二代专家系统？AES Finding(专家发现)出现黄色框、红色框、紫色框时结果如何处理？4. 其他在 ID 配置（ID Configuration）或 AST 配置（AST Configuration）中，卡片退出框（CardEjection）中有卡片试验完成即退出时间（Hour of Call）和最长卡片孵育时间（Max CardIncubation）选项，有何区别？如何在 Vitek2 Compact
4、 电脑中查找以前的鉴定或药敏结果？如何将旗云软件中的结果导入 WHONET 软件进行药敏分析？Q：Vitek2系统（5.01）有几种鉴定卡？各鉴定哪类细菌？A：有7种鉴定卡，分别是：(1) GP卡（革兰阳性菌鉴定卡）：可鉴定葡萄球菌、链球菌、肠球菌及其他革兰阳性菌，如李斯特菌等120种菌。38小时完成鉴定。(2) GN卡（革兰阴性菌鉴定卡）：可鉴定肠杆菌科细菌、弧菌、假单胞菌及其他非发酵菌等145种菌。310小时完成鉴定。(3) NH卡（奈瑟菌-嗜血杆菌鉴定卡）：可鉴定嗜血杆菌、凝聚杆菌、心杆菌、艾肯菌、金氏金杆菌、弯曲菌、阴道加德纳菌、卡它莫拉菌等26种菌。6小时完成鉴定。(4) ANC卡（
5、厌氧菌-棒状杆菌鉴定卡）： 可鉴定厌氧菌、放线菌、棒状杆菌等63种菌。6小时完成鉴定。(5) YST卡（酵母菌鉴定卡）：可鉴定假丝酵母菌、隐球菌、红酵母及丝孢酵母等52种菌。18小时完成鉴定。(6) BCL卡（需氧芽孢杆菌鉴定卡）：可鉴定需氧芽孢杆菌47种。14小时完成鉴定。(7) CBC卡（棒状杆菌鉴定卡）：可鉴定棒状杆菌、乳杆菌及红球菌等64种菌。8小时完成鉴定。注：BCL卡、CBC卡仅供工业实验室用。需在“一般配置（General Configuration）”中选“Industry”(工业模式)。以上鉴定卡详细内容可参看“Vitek2系统产品信息”。由于鉴定卡全球通用，产品信息以电子版
6、或手册形式随机附送，包装盒内不再提供纸制说明书。Q：Vitek2系统（5.01）有几类药敏卡？A：有4大类：(1) AST-GN类：革兰阴性菌药敏试验，包括肠杆菌科和非肠杆菌科细菌。此类药敏卡因卡片所含抗生素组合不同又分为不同种类，常用有AST-GN04、AST-GN09、AST-GN13、AST-GN14和AST-GN16。(2) AST-GP类：革兰阳性菌药敏试验，包括葡萄球菌、肠球菌、无乳链球菌( ASTGP67)、肺炎链球菌（AST-GP68）。(3) AST-ST：链球菌药敏试验，包括?-溶血链球菌、非B族链球菌、草绿色链球菌。(4) AST-YS：酵母样菌药敏试验，包括假丝酵母、新
7、型隐球菌、西弗射盾菌。注：以上药敏卡详细内容可参看“Vitek2系统产品信息”光盘或包装盒内说明书。Q：从什么途径了解我所用的培养基适合上机鉴定或做药敏试验？A：可查阅“Vitek2系统产品信息”，每种鉴定卡的培养要求表（Culture RequirementsTable）详细列出了适合的培养基。2. 关于鉴定和药敏试验Q：为什么要做菌液纯度检查？有何意义？A：菌液纯度检查就是在上机完成后，取试管中的剩余菌液接种非选择性培养基(如血平板等)，以确认充填进鉴定卡或药敏卡中的菌液是否为纯培养物。操作过程非常简单，用切割下的导管直接取剩余菌液在培养基上划线接种培养，次日观察结果。培养基可用记号笔标记
8、分割成十字或米字形，一个培养基上可做4个或多个菌液纯度检查。当然，纯度检查也可从已完成的卡片某个孔内取菌液分离培养确认或直接涂片染色镜检。菌液纯度检查可及时发现因菌液污染影响上机结果的原因，如菌不纯、盐水污染等，这是造成检测结果不好的最常见原因。建议以下情况做菌液纯度检查：(1)新装机用户使用初期。(2)试验结果存在问题时（低分辨率、不能鉴定、鉴定错误等）。Q：如何确定卡片的孔位号？有何用途？A：首先按下图所示持卡片，箭头所指即为一号孔位，其他孔位号依次类推。孔位确定主要用于对卡片中各孔所含试剂或抗生素成份、含量及对应结果的了解。另外，对处理因可疑污染造成结果不准确时，可直接从相应反应孔或抗生
9、素孔取菌液分离培养确认。鉴定卡各孔试剂全称、成份及含量请查阅Vitek2系统产品信息中各鉴定产品的反应孔内容物部分。也可把鼠标放在鉴定结果中生化反应缩写上显示该反应全称）。药敏卡可在系统工具的定义AST卡片类型中查找，如AST-GP67卡万古霉素位于60、61、62、63和64孔，如下图所示：Q：何为“真正”MIC？A：尚没有明确定义。CLSI M07-A8对“真正”MIC的定义是：MIC不是一个绝对值，“真正”的MIC介于最低抑菌浓度和相邻浓度之间。以倍比稀释法为例，如果MIC是16g/ml，“真正”MIC应在16g/ml和8g/ml之间。对于所有自动化药敏试验系统，FDA或SFDA采用的是
10、相同严格的审评标准 。因此，只要通过批准的药敏试验系统，均符合与参考方法比较的标准。Q：为什么Vitek2药敏卡中34个抗生素浓度（Concentrations）可以检测56个MIC值范围（Calling Range）？A：传统倍比稀释法检测MIC通过肉眼观察细菌在某一抗生素浓度是否生长，即有菌或无菌。例如某细菌在浓度为8g/mL时生长而在16g/ml时不生长，则MIC判读为16g/ml。事实上，真正的MIC值介于8g/mL和16g/ml之间。由于传统方法采用终点法，对细菌在8g/mL至16g/ml之间的生长变化并不了解。而Vitek2采用动态检测法（动力学方法），每15分钟检测一次细菌在某抗
11、生素浓度中的生长情况并与不含抗生素的对照孔进行比较，从而可以获得该细菌在某抗生素浓度的生长模式。这种生长模式与标准倍比稀释法MIC结果之间存在相关性。药敏卡中34个抗生素浓度并不是我们传统意义上的折点浓度，而是为实现检测56个MIC值，经反复研发找出的最具鉴别力的浓度（most discriminatingconcentrations），也就是一个孔中的抗生素浓度可以检测23个MIC值。从药敏卡说明书也可看出，这些浓度一般都不是连续倍比关系。下表对MIC检测过程进行简单说明。首先对参考方法检测的已知MIC值细菌进行试验，以药敏分析参数之一的最大变化百分率（MPCTS）为例。该孔的抗生素浓度在检
12、测已知MIC值时，各MIC值之间的MPCTS要求25%（研发时确定）才符合最具鉴别力浓度。抗生素浓度为0.5g/mL的孔可检测MIC为C0.25、0.5和1g/mL；如果对其余MIC值之间的检测MPCTS不满足25%，则需要增加一个孔的最具鉴别力浓度，依次类推，直至满足MIC检测范围要求。如抗生素浓度为2.0 g/mL的孔可检测MIC为1、2和4g/mL；抗生素浓度为8g/mL的孔可检测MIC为4和D8g/mL。因此，Vitek 2系统的MIC是实际检测值，只是检测原理不同于传统方法而已。Q：用户反映使用AST-GP67卡后感觉金葡菌万古霉素耐药比以前多（假耐药），为什么？A：为检测葡萄球菌对
13、万古霉素的低水平耐药，AST-GP67卡较以前阳性菌药敏卡的万古霉素MIC范围增加（0.5-32g/ml）、培养分析时间延长。因此，以前不会影响万古霉素分析结果的极少量污染菌，由于培养分析时间的延长会对万古霉素结果产生影响。如果发生万古霉素假耐药现象，建议做如下处理：(1) 灭菌盐水和分配器。(2) 定期对盐水进行无菌试验。与普通方法不同，取12ml盐水加入营养肉汤3537培养至少72小时。每天观察一次，如出现混浊，取肉汤接种血平板分离培养、鉴定。如未见混浊，培养72小时后也应取肉汤接种血平板分离确认。(3) 确保是纯菌落用于制备菌液。上机后做菌液纯度检查。也可从完成分析的卡片中取万古霉素孔（
14、6064号孔）菌液分离培养确认或直接涂片染色镜检。Q：AST-GP67卡中的 ICR（诱导型克林霉素耐药试验）的原理?A：AST-GP67卡中分别有2个孔用于ICR试验，单含克林霉素孔和克林霉素+红霉素孔。如果单含克林霉素孔不生长，克林霉素+红霉素孔生长，ICR试验报告为阳性。如果用户需要与D试验进行对照时，建议用相同菌液进行。必要时试验结束后取28号孔的菌液分离培养确认上机菌液纯度。Q：AST-GP67药敏卡中没有替考拉宁，想报告此抗生素结果怎么办？A：第一步：在AES设置中，点正在使用的参数（如CLSI+天然耐药等），如下图所示，选中Enable Deduction by Phenotyp
15、e选项。第二步：在AST设置的推导抗生素栏，将替考拉宁选中加入AST-GP67卡。此后上机药敏卡可报告替考拉宁结 果（注：推导抗生素只有判读结果S、I、R，没有MIC结果并在抗生素前以+表示）。Q：AST-GP卡对于葡萄球菌有几种抗生素结果不出，原因有哪些？A：在AST-GP药敏卡中，3种抗生素（苯唑西林、米诺环素、替加环素）是单独生长对照孔（VRSA筛选试验也是独立生长对照孔），其余抗生素使用相同生长对照孔。如果某一对照孔生长不足，则使用该对照孔的抗生素被终止，即不出结果（TRM，Terminated）。可能的原因有菌液浓度比要求的低、菌液未混匀或药敏卡内的菌液导管被小颗粒物堵塞等。如果有很
16、多抗生素被终止（TRM），且信息显示“Initial valuetoo low for analysis on this antibiotic”，如下图，请与代理商或生物梅里埃技术服务人员联系。Q：用户发现用Vitek2系统鉴定犬巴斯德菌ID%为99%（极好的鉴定）但不出药敏结果，为什么？A：犬巴斯德菌在临床并不多见，CLSI目前还没有该菌药敏试验的判读折点。而Vitek2系统采用CLSI标准，由于没有判读折点，因此不能获得该菌的药敏结果。有关哪些菌可用Vitek2系统做药敏试验，包括阴性菌、阳性菌及酵母菌，可查阅Vitek2系统产品信息药敏试验产品信息部分，查找AST-GN卡、AST-GP卡
17、、AST-YS卡和AST-ST卡所列细菌或酵母菌是否包括该细菌。Q：为什么Vitek2系统嗜麦芽窄食单胞菌药敏试验只报告复方新诺明结果，而CLSI可以报告6种抗生素的MIC？A：嗜麦芽窄食单胞菌由于耐药机制复杂，CLSI近年才推荐了几种抗生素的药敏试验。而Vitek2系统在研发嗜麦芽窄食单胞菌药敏时推荐药物只有复方新诺明（现仍为首选药物）。因此，目前只报告复方新诺明。其他药物如左氧沙星等正在研发中。Q：AST-GN13、GN14卡中的ESBLs检测是确认试验吗？新的CLSI发布后这些药敏卡检测ESBL还有意义吗？A：AST-GN13、AST-GN14卡中的ESBL检测是确认试验（详见Vitek
18、2产品信息药敏试验部分的ESBLs检测）。2010年CLSI调整部分抗生素折点后，如果用于临床治疗，针对这些抗生素的MIC结果可直接报告，即使产ESBLs也不用修改MIC结果。但CLSI也指出ESBLs检测对于院感监控或流行病学仍有意义。Q：为什么奇异变形杆菌不能在VITEK2系统上做ESBLs确认？A：CLSI推荐的ESBLs检测方法适用的细菌包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和奇异变形杆菌。Vitek2系统ESBLs检测方法已确认的细菌包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌。Vitek2系统对奇异变形杆菌产ESBLs的检测性能仍在评估中。因此，Vitek2系统ESBLs检测对奇
19、异变形杆菌暂不能报告结果。但高级专家系统（AES）可识别奇异变形杆菌的产ESBLs表型并报告表型。Q：为什么AST-GN09卡的结果中头孢呋辛有2个结果，即Cefuroxime（头孢呋辛钠和Cefuroxime Axetil（头孢呋辛酯）？A：是同一种药的2种剂型。头孢呋辛钠用于注射，头孢呋辛酯用于口服。由于2种剂型的判读折点不同（头孢呋辛钠MICC8g/ml 为敏感；头孢呋辛酯MIC C4g/ml为敏感， CLSI 2010），需要分别报告MIC结果。 另外，药敏卡中的头孢呋辛孔可报告2种剂型的MIC值结果。3. 关于高级专家系统Q：何为第一代、第二代专家系统？A：药敏试验是通过体外试验预测
20、抗生素在体内的疗效。由于体外试验与体内环境存在一定差异，造成药敏试验结果会出现偏差，影响临床疗效。为降低或避免这些因素对临床疗效的影响，临床微生物实验室除试验方法标准化外，结果报告前需由经验丰富的高级人员即专家对结果进行审核、确认。而专家系统（Expert System）则是将不同专家的知识、经验汇集在一起编写成的计算机软件。第一代专家系统也称规则式专家系统，也就是药敏结果如果符合某条预设的规则，那么对符合该规则的结果就进行干预（提示、修改等）。例如：如果葡萄球菌苯唑西林耐药（或头孢西丁筛选试验阳性），那么报告所有?-内酰胺类抗生素耐药（包括体外试验敏感结果）。因此，对于每一个药敏结果都要经过
21、专家系统的规则审核、确认，符合某条规则该规则就发生作用，没有出现规则中的情况，结果就可以报告。第一代专家系统存在的问题，首先是对所试抗生素高度依赖。例如药敏试验中如果没有苯唑西林或头孢西丁，即使结果有问题规则也不起作用。其次，对于所有规则的研究是一项永无止境的工作。因此，第一代专家系统对结果的审核、确认是建立在已知规则基础上。另外，第一代专家系统是以敏感（S）、中介（I）、耐药（R）结果为基础。例如，小于等于折点的结果，不管MIC大小均为敏感。因此，不能发现新出现的耐药。第二代专家系统也称高级专家系统（Advanced Expert System AES），以表型匹配为基础的专家系统。所谓表型
22、，就是由特定耐药机制、抗生素、细菌所得的一组MIC结果，也就是药敏谱，即基因型的外在表现。高级专家系统通过收集全球对不同细菌耐药性研究的权威文献报道（收集约10万余篇）、临床研究成果及生物梅里埃的研究资料编写而成。其基本工作过程是：通过Vitek 2系统和试验卡获得细菌鉴定和药敏结果，即针对某细菌的MIC值。高级专家系统将该MIC值与数据库中收集的相应MIC分布进行比较，如下图所示。颜色越深表示该MIC值出现的频率越高（类似正态分布），说明该菌的MIC值越典型。依次类推，颜色越浅表示该菌所测MIC值越不常见，也就越不典型。如果超出此MIC分布，则可能是：（1）细菌鉴定错误；（2）技术原因（菌液
23、污染等）；（3）目前研究尚未发现的新耐药机制。高级专家系统确定各抗生素的典型MIC分布后，对所测同类抗生素（如?-内酰胺类、喹诺酮类、氨基糖苷类等）的MIC分布与数据库中收集的表型进行比较，确定最符合表型，如野生型、获得性青霉素酶、ESBLs、膜渗透性降低、外排等（因为对一种特定细菌而言，每种抗生素的MIC值都是某种耐药机制作用的结果）。表型确定后，高级专家系统会根据治疗指南，对影响临床治疗的判读结果进行修正（如敏感修正为耐药），并以黄色显示。用户可双击黄色结果显示修正的原因。高级专家系统不对MIC值修正，这样可能会在病人报告中出现MICC1g/ml但判读结果却为R（耐药）的现象，有时需要用户
24、给临床医生解释。也可在AST配置中“图表报告抑制的配置”选择MIC值不出现在病人报告的选项（同时，要在BCI配置中取消“传送被抑制的MIC”（Send Suppressed MIC）选项，如下图所示。AST配置：BCI配置：Q：AES Finding(专家发现)出现黄色框、红色框、紫色框时结果如何处理？A：(1)黄色框表示药敏结果没有最佳匹配表型，AES需对一个MIC修正后才可匹配某个表型。原因可能是技术方面或是该细菌所表达的表型不在AES数据库中。如果是技术原因需要检查：细菌鉴定结果是否正确、菌是否纯、所用培养基、菌龄是否合适、菌液浓度是否准确、盐水是否污染或pH是否正确以及培养环境是否正确
25、等。如果排除了这些技术问题，结果可以报告。注意：黄色只是提示！(2)红色框表示该抗生素谱没有和AES数据库中表型匹配，即抗生素谱与AES数据库中的表型不一致。原因及处理方法与黄色框相同，但是否接受该结果需由用户自己决定。需要强调的是：红色表示停止！(3)紫色框表示AES数据库中没有该细菌的表型描述，也没有AES图形。软件版本在4.01以上的Vitek2 Compact系统或Vitek2 PC系统，可在产品信息中查询哪些细菌有AES分析，哪些没有。凡是可以做药敏的细菌后带有星号*表示有AES分析结果，否则没有。药敏结果可以报告。4. 其他Q：在ID配置（ID Configuration）或AST
26、配置（AST Configuration）中，卡片退出框（Card Ejection）中有卡片试验完成即退出时间（Hour of Call）和最长卡片孵育时间（Max Card Incubation）选项，有何区别？A：鉴定卡中每种反应报告阳性结果或药敏卡中每种抗生素报告敏感或耐药的时间不完全相同，也就是有长有短，这在研发过程已确定。卡片试验完成即退出时间Hour of Call（鉴定卡默认选项）表示只要鉴定卡得出结果，也就是卡片状态变成最终（Final），卡片就退出。因为仪器确认该菌鉴定已经非常典型，不必等待反应时间最长的试验结束也可完成鉴定。如GN卡鉴定大肠埃希菌，某些典型反应即可确定鉴定
27、结果，不需要等最长反应时间（10小时）的试验完成才报告结果。最大卡片孵育时间Max Card Incubation（药敏卡默认选项）表示鉴定或药敏卡采用最长培养时间，也就是等最长反应时间的试验完成后才退卡。Q：如何在Vitek2 Compact电脑中查找以前的鉴定或药敏结果？A：要想在Vitek2 Compact电脑长期保存结果：首先在一般配置中的其他项目勾选“启用长期数据存储”数据才会长期保存。查找可在工具图标点“搜索长期数据储存”，然后根据需要搜索结果。显示结果可选中该结果并点打印机图标（先显示结果，如果打印再点确定）。Vitek2 Compact电脑（5.01版本）可保存的菌株数为5万株
28、。存储满后会将最早的结果清除。因此，建议用户根据每天标本量定期进行数据备份。另外，需要指出的是只有完成并合格的结果才会进入长期数据储存。鉴定结果以生物编码形式保存。Q：如何将旗云软件中的结果导入WHONET软件进行药敏分析？A：点电脑左下角“开始”K所有程序K旗帜微生物实验室管理系统KWHONETMISK在WHONET TOOLS标签下：导入数据条件：输入导入数据时间段（如2011-01-01至2011-01-31）导入WHONET文件设置：2个选项（1）导入到已经存在的WHONET文件（以前导入过数据，后面导入的数据添加在以前的文件内）；（2）新建立WHONET文件（将以新输入的导入数据时间段建立新文件名）。在导入数据的实验室名称（三个英文字母）中输入自己在WHONET软件中用的实验室代码（默认是ETP）。然后点“导入”开始导入数据。下方出现“导入数据进度”框，显示导入的进度。数据导入完成后在电脑桌面用鼠标右键点“旗帜通信”或“微生物实验室信息管理系统”图标K属性K查找目标K找“whonetDB”文件夹。导入的数据文件在whonetDB文件夹内，可用于WHONET分析或拷贝至U盘等保存。
