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1、河南科技学院新科学院2012届本科毕业论文 论文题目：不同处理对月季切花保鲜效果的影响学生姓名： 所在院（系）：新科学院（生物工程系）所学专业：生物技术导师姓名： 完成时间：2012年5月10日不同处理对月季切花保鲜效果的影响新科学院生物工程系082班摘要本实验以沼液为主剂，采用不同浓度的处理对月季切花进行瓶插实验。从瓶插寿命，花径变化，开花级数，呼吸强度和丙二醛含量变化等月季切花生化指标进行探讨，结果表明：处理3(40ml沼液+40ml8-羟基喹啉(200/l)+40ml硫酸汞(100/l)+30ml蔗糖(6g/l)效果，对月季切花的瓶插寿命和保鲜效果最佳。关键词：月季，切花，沼液，瓶插寿命
2、，保鲜效果Different treatment effect of preservation of cut rose to TaiwanMaMinNew biological engineering academy of sciences 082 classAbstractIn the present study ZhaoYe primarily agent, using different concentration of treatment on Chinese rose on the bottle inserts cut from the vase life, flower diame
3、ter changes, flowering series, respiration intensity and malondialdehyde change of cut rose biochemical indexes are discussed, and the results show that: deal with 3 (40 ml ZhaoYe + 40 ml8-hydroxyl KuiLin (200 / l) + 40 ml sulfuric acid mercury (100 / l) + 30 ml sucrose (6 g/l) best effect.Keywords:
4、 Chinese rose, cut flowers, ZhaoYe, vase life, preservation effect目录引言11材料与方法31.1材料31.1.1 实验材料31.1.2 实验仪器31.1.3 实验试剂31.1方法31.2.1实验溶液的制备31.2.2 各处理的配比41.3测定项目51.3.1瓶插寿命测定：51.3.2花径测定:51.3.3开花级数：51.3.4呼吸强度的测定：51.3.5丙二醛(MDA)含量的测定52结果与分析62.1不同处理对月季切花瓶插寿命和花径大小的影响62.2不同处理的月季切花的开花级数62.3不同处理对月季切花呼吸强度的影响72.4不同
5、处理对月季切花丙二醛(MDA)含量的影响83讨论：8参考文献：9致谢11不同处理对月季切花保鲜效果的影响马敏新科学院生物工程系082班引言月季(Rosahybrida)属蔷薇科蔷薇属，又名月月红、长春花，411月多次开花，若条件适宜则常年开花，其花容秀美、芳香馥郁、千姿百色，具有较高的观赏价值，深受人们喜爱。目前月季栽培品种已有一万多个,位列世界四大切花(月季、菊花、香石竹、唐菖蒲)之首，其使用量在切花中占有相当大的比例1。月季切花保鲜技术在园艺科学领域中较为活跃，其消费量约占切花消费总量的16.7%。我国从20世纪80年代开始大规模切花月季生产,生产规模不断扩大。目前已经成为世界上月季切花栽
6、培面积和产量最大的国家之一2。但从近些年切花出口统计数据来看,我国月季切花出口量并不大。究其原因,月季切花的瓶插寿命较短，采后衰老生理差异大，观赏品质容易降低，而其保鲜技术未得到很好解决，乃是影响切花出口的主要限制因子。另外我国对月季切花采后衰老生理及贮藏保鲜技术的研究相对国外较晚,也严重制约我国切花月季产业的发展3。据不完全统计,我国月季切花在采后贮藏、运输等流通中的损耗每年在40%以上。因此,研究月季采后生理及贮藏保鲜技术对鲜切花生产具有重要意义。鲜切花采后保鲜主要从抗菌防腐、营养补充、抑制乙烯及阻止失水等方面对切花进行处理。目前使用的绝大多数保鲜剂中都含有糖，最常用的是蔗糖。它是切花维持
7、正常生命活动所必需的能源，被认为是补充切花营养较理想的碳水化合物1，采用适当浓度的蔗糖处理切花，可以减少花瓣可溶性糖的降低幅度，从而延长瓶插寿命。此外，糖对维持渗透压、气孔关闭也有一定的作用。8-羟基喹啉（8-HQ）是一种光谱性杀菌剂，对真菌和细菌都有强烈的杀伤和一直作用，也是目前最常用的切花防腐保鲜剂1,3-4，易于金属结合，可分解细菌内的铁离子和铜离子，因而具有杀菌作用。防止切花花茎的细菌性阻塞，以利于水分运输，防止切花导管堵塞，促进花枝吸水，同时具有抑制乙烯的生成，明显延长切花瓶插寿命。硫酸汞作为无机盐类能增加溶液的渗透势和花瓣细胞的膨压，有利于花枝的水分平衡，同时它还有减少细菌生长，抑
8、制微生物的作用。有增强花梗挺度、延缓花头下垂的作用，可以延长瓶插寿命。在一定浓度范围内，硫酸汞的浓度越高，抑制微生物的作用越显著。沼液是人畜粪便、农作物秸秆等各种有机物厌氧发酵后的残余物，其中含有丰富的腐植酸和全价的氨基酸等有机质，以及多种微量元素、抗菌素及一些能激活植物抗病的活动因子，是一种优质的有机肥料。沼液中的基本营养元素氮、磷、钾，都是以速效养分的形式存在的，可利用率高，还含有大量的有机质、多种氨基酸、维生素、酶类和有益微生物等，营养全面，是一种多元的速效复合肥，可迅速被农作物茎叶吸收，且作用持久5。因此合理利用沼液，将会给人类带来一定的经济价值。如不妥善处理，沼液的随意排放将引起湖泊
9、、河流富营养化等环境污染问题。我国沼液的主要利用方式包括直接归田、沼液浸种、叶面肥、饲料添加剂等，其中直接归田是当前沼液最主要的利用方式，但沼液直接归田也存在很大的环境风险6。因此，开发低成本、高效益的沼液安全利用途径是我国今后研究的重要方向。鲜切花的瓶插寿命与瓶插液的成分密切相关。适宜的瓶插液可控制花朵开发及发育，延迟鲜切花的衰老，保持较长时间的观赏品质。月季切花弯颈的主要原因之一是花蕾下的茎部输导组织相对幼嫩而易于失水，在花蕾重力作用下导致幼茎弯曲。月季切花失水达5%时花瓣会出现明显伤害,切花的外观表现为鲜重损失、枯萎,瓶插寿命取决于吸水与失水之间的平衡而非绝对吸水量的大小7,而水分平衡又
10、由水分的吸收、运输和损失所决定,当蒸腾超过吸水时将导致花朵萎蔫,吸水超过蒸腾时花朵得以保持膨压、花蕾可正常开放,空气进入导管、不适宜环境等因子的综合影响均会导致月季切花水分失调,引起叶片萎蔫和花蕾难以绽开而出现“弯颈”或叶片、花瓣脱落8,而花枝吸水仅靠枝基部远不如根系吸水量大,所以有效地延缓、控制水分散失以维持体内水分平衡是延长切花瓶插寿命的重要手段。月季切花贮期短，瓶插期间易发生花头下垂、花瓣蓝变等现象9。月季鲜切花的水分含量约为85%，当失水量超过5%时叶片会萎蔫，且花蕾难以绽开而出现弯颈10。月季鲜切花花瓣的衰老与活性氧代谢失调及膜脂过氧化造成膜结构的破坏有关， 采用保鲜剂可改善其瓶插期
11、间的营养状况，从而延长观赏期11。一般认为复合型保鲜剂保鲜效果较好，但多数保鲜液配方成本高，易污染环境或含有致畸致癌成分，操作性、实用性不强。目前已有不少关于月季切花采后保鲜的研究报道，多使用化学保鲜剂，因为沼液颜色较淡、浓度较稀，人们对它有一定的偏见，应用较少。本实验对蔗糖、8-羟基喹啉（8-HQ）、硫酸汞结合沼液组成的不同浓度的处理进行探究。根据对瓶插寿命、花径变化、开花级数的记录，以及呼吸强度和丙二醛含量的测定，着重研究不同浓度的处理对月季切花瓶插寿命和观赏品质的影响。筛选出能延长切花瓶插寿命、提高切花观赏品质的适宜浓度组合，丰富月季切花保鲜的理论、实践研究，并对拓展切花保鲜的研究领域和
12、制定有效的保鲜措施提供依据，以加大我国在月季保鲜方面的研究和开发力度。1材料与方法1.1材料1.1.1 实验材料 实验于2012年3-5月进行。供试材料月季切花采自河南科技学院花卉基地,采切的花色、大小基本一致，花蕾饱满、开花指数一级的健壮花枝。到实验室的月季切花在自来水中复水2h,之后选择含苞待放且花茎直立的切花。将月季茎端斜切,以增大花茎的吸水面积，剪切过程中尽量避免切花组织的损伤，保留花茎长约20cm，尽量使切花长度保持一致，去除底部的叶片和刺，保留顶部23片复叶。插入装有150mL不同保鲜液的250mL三角瓶中,每瓶插入10枝切花,花枝浸入深度36 cm。然后将三角瓶瓶置于自然室温且有
13、散射光的实验室一角,每天观察切花的衰老过程。室温为1827,相对湿度为33%70%。1.1.2 实验仪器250ml三角瓶，1L容量瓶，500mL量筒，50mL烧杯，胶头滴管，电子天平，剪刀，游标卡尺，秒表，广口瓶，温度计，酸式滴定管，尼龙网制小蓝，干燥管，分光光度计，离心机，研磨器，恒温水浴，具塞试管。1.1.3 实验试剂氢氧化钡，草酸，酚酞指示剂，三氯乙酸，石英砂，硫代巴比妥酸（TCA）。沼液，8-羟基喹啉，蔗糖，硫酸汞。1.1方法1.2.1实验溶液的制备0.05mol/L氢氧化钡溶液（8.568g Ba(OH)2配成1000mL）。酚酞指示剂（1g酚酞溶于100无水乙醇中转入滴瓶中）。1/
14、44mol/L草酸溶液（重结晶的草酸H2C2O42H2O2.865g配成1000mL溶液）。10%三氯乙酸(将10g三氯乙酸稀释至100mL)。0.6%的硫代巴比妥酸（将0.6g硫代巴比妥用10%的三氯乙酸稀释至100mL）。6g/L的蔗糖溶液（6.0000g的蔗糖配成1000mL溶液）。4g/L的蔗糖溶液（6g/L的蔗糖溶液666mL稀释至1000mL）。2g/L的蔗糖溶液（4g/L的蔗糖溶液500mL稀释至1000mL）。150mg/L的硫酸汞溶液（0.1500 g的HgSO4配成1000mL溶液）。100mg/L的硫酸汞溶液（150mg/L的硫酸汞溶液666mL稀释至1000mL）。50
15、mg/L的硫酸汞溶液（100mg/L的硫酸汞溶液500mL稀释至1000mL）。200mg/L的8-羟基喹啉溶液（0.2000g的8-HQ配成1000mL溶液）。1.2.2 各处理的配比各处理的不同浓度组合：采用沼液、8-羟基喹啉(8-HQ)、蔗糖、硫酸汞4种常用药剂（如下），以蒸馏水为对照组，将月季鲜切花分别插入盛有各个处理液的三角瓶中,每个瓶中插5枝，每个处理重复3次，置于无阳光直射的实验室,室温25左右。从瓶插的当天起,每天测定各项指标。CK: 150ml蒸馏水P1: 150ml沼液P2: 40ml沼液+40ml8-羟基喹啉+40ml硫酸汞+30ml蔗糖 （200mg/l） （100mg
16、/l） （2g/l）P3：40ml沼液+40ml8-羟基喹啉+40ml硫酸汞+30ml蔗糖 （200mg/l） （100mg/l） （6g/l）P4：40ml沼液+40ml8-羟基喹啉+40ml蔗糖+30ml硫酸汞 （200mg/l） （4g/l） （50mg/l）P5：40ml沼液+40ml8-羟基喹啉+40ml蔗糖+30ml硫酸汞（200mg/l） （4g/l） （100mg/l）P6：40ml沼液+40ml8-羟基喹啉+40ml蔗糖+30ml硫酸汞（200mg/l） （4g/l） （150mg/l）1.3测定项目1.3.1瓶插寿命测定：自瓶插之日起，每日记录各处理从瓶插至盛开所需时间和盛
17、开持续时间，瓶插寿命是两者之和12。以花朵萎蔫、花瓣外缘开始褐变、掉瓣或花朵未展开即失水萎蔫、弯颈9,失去观赏价值作为瓶插寿命结束的标志。1.3.2花径测定:以游标卡尺测量每朵花的最大花径，重复测3次，取其平均值。花径大小是反映切花观赏品质的重要指标，花径越大观赏性越强。1.3.3开花级数：用三角瓶在不同浓度下（其它条件一致）培养，每天观察月季从蕾期至盛开六个基数（0级，萼片直立；1级，萼片水平；2级，萼片下垂，花瓣开始松散；3级，初开外层花瓣；4级，盛开，多层花瓣展开；5级，盛开末期，花朵露心。）13的变化。1.3.4呼吸强度的测定：采用张志良14改进方法测定。称取月季花瓣2g装于小蓝内，将
18、小篮挂于500mL广口瓶内，同时加20mL0.05mol/L的Ba(OH)2溶液于广口瓶内，并滴入两到三滴酚酞指示剂，使其为红色，立即用橡皮塞塞紧。静置30分钟后，小心打开瓶塞，迅速取出小篮，用草酸溶液滴定，记录所耗草酸的体积数V。呼吸强度CO2，ml/(gh)=（V0-V1）/月季鲜重（g）时间(h)1.3.5丙二醛(MDA)含量的测定采用硫代巴比妥酸法15-16。称取各个处理组的月季花瓣各1g，将其剪碎，加入10%三氯乙酸（TCA）2mL和少量石英砂，放入研钵中研磨；进一步加入8mL TCA充分研磨，所得匀浆以4000g离心10min,上清液即为提取液。吸取2mL提取液，加入2mL0.6%
19、 TCA液，混匀，在试管上加上盖塞，然后置于沸水浴中沸煮15min,迅速冷却，离心。对照组以2mL水代替提取液。取上清液测定532nm、600nm和450nm处的OD值，计算MAD浓度。C=6.45（A532-A600）-0.56A450再根据公式计算出MDA含量（umol/g）；y = C 提取液体积（mL）/样品重。2结果与分析2.1不同处理对月季切花瓶插寿命和花径大小的影响由表1可以看出，对照组CK的瓶插寿命为6.57d，各处理对月季切花的瓶插寿命有明显的影响。各处理瓶插寿命均极显著高于对照（P0.01），处理P3、P5的瓶插寿命与对照CK差异显著（P0.05），处理3的瓶插寿命比对照延
20、长了5.49天，处理5的瓶插寿命比对照延长了4.79d，所以处理3的保鲜效果最佳（12.06d），其瓶插寿命最长，分别为12.06和9.12d ,均明显高于其他处理。由表1还可以看出，硫酸汞浓度为150mg/l的处理P6.其叶片出现明显的失水征兆，而处理P4、P5的硫酸汞浓度较低，没有出现此征兆，这可能与硫酸汞浓度过高引起花瓣压力过大有关。表1 不同处理对月季切花瓶插寿命和花径大小的影响处理瓶插寿命/d显著性花径大小/cm显著性叶片失水枯萎征兆F0.05F0.01F0.05F0.01CK6.57bB4.67bB无明显征兆P18.89bA5.75bB无明显征兆P211.2 abA8.79bB无明
21、显征兆P312.06aA9.12aA无明显征兆P49.84aA6.58bB无明显征兆P511.36abA7.64bB无明显征兆P610.08abA7.20bB有明显征兆2.2不同处理的月季切花的开花级数从表2可以看出，对照组月季切花的盛开时间最早，花瓣开放迅速，然后花瓣开始发生褐变、蓝变，逐渐萎蔫，花头下垂弯颈，瓶插寿命结束，花朵盛开持续时间短。其他处理对月季切花的开花级数都有影响，花瓣开放较对照缓慢2-5d，花朵盛开时间较长， 且花色鲜艳, 花秆挺直, 花茎出现褐变、蓝变弯头现象推迟, 总体上看, 处理P3盛开时间最长。 表2 不同处理的月季切花的开花级数处理盛开时间萎蔫时间褐变、蓝变时间弯
22、颈时间CK3.598.966.579.17P15.7510.038.8910.34P28.7813.3611.2011.47P39.1214.0912.0612.49P46.5610.979.8410.05P57.9812.9511.3613.16P66.5811.3210.0810.392.3不同处理对月季切花呼吸强度的影响图1 不同处理对月季切花呼吸强度的影响月季切花的呼吸强度在其开花时达到最高峰，以后随着花的成熟逐渐降低，随后又出现一个短时间高峰。第2呼吸高峰标志着衰老最后阶段的到来17。由图1可以看出，切花的呼吸强度在瓶插前期先下降，在花朵充分展开前迅速升高，开放时达到最高峰，以后随着
23、花的成熟逐渐降低，后期又急剧上升，呈现典型的呼吸跃变，这与高俊平等的报道一致18。各个处理组的呼吸强度较对照组稳定，呼吸强度始终保持在较低水平，瓶插前期变化规律与对照相似，但在达到第一个高峰后，各处理均慢慢的下降，接着平缓的上升至第2呼吸高峰，由此可见，月季切花经过各个不同配比的处理后，呼吸强度明显的降低，切花体内有机物的消耗明显变得缓慢，因此可以延缓切花衰老。其中，处理3的呼吸强度相对最低，切花衰老也最缓慢。 2.4不同处理对月季切花丙二醛(MDA)含量的影响图2 不同处理对月季切花丙二醛含量的影响MD是植物衰老过程中膜脂过氧化最重要的产物之一， 能与细胞内多种成分发生反应，多种酶和膜系统遭
24、受严重损伤，导致膜的渗透，从而启动衰老，因此丙二醛与切花衰老密切相关。可用作评价植物体衰老的标志19。图2通过MDA含量的变化趋势来研究不同浓度配方的处理对月季切花花瓣中MDA含量的影响。可以看出，处理组与对照组的变化趋势基本一致，对照组的MDA含量始终保持在较高是水平上，随着时间的增加，MDA含量持续上升，前期积累的缓慢，到后期随着花瓣的衰老，MDA含量直线上升。处理后第4天，蒸馏水对照的花瓣中MDA含量有些许下降，这可能是由于植物大量吸水，使得单位鲜重中MDA含量减小了。其中处理3的增幅最小，MDA含量也明显低于其他各组，说明处理3可以延缓MDA含量增大，维持细胞膜结构的完整性。因此，处理
25、3在对月季切花花瓣延缓MDA含量增大中效果最好。3讨论：切花是一类切离母体的活体，采后仍进行着蒸腾、呼吸等代谢活动。切花脱离母体后，其营养源被切断, 加上环境因子和微生物的不良影响及其内部发生的一系列生理生化变化, 最终导致切花衰老和凋谢20。实验对照组蒸馏水中月季切花的瓶插寿命只有6.57天，这与有关资料：在室温为1625、空气相对湿度40%70%、通风条件良好，只供给切花月季养分的环境下, 月季切花的瓶插寿命一般可持续57 d 21, 基本是一致的。说明既没有添加杀菌剂也没有添加抑制剂,在短时间内, 会影响切花月季的瓶插寿命, 甚至导致月季切花快速衰老。有本实验可知，对照组CK的月季切花花
26、瓣3d开始开放，花瓣完全盛开后，大概持续三天，发生褐变、蓝变现象，开始萎蔫。6种处理均不同程度的延长了月季切花盛开期，增长了盛开时间，使切花的花径变化缓慢，保持花的形态，延迟了发生褐变、蓝变和萎蔫的时间，延缓衰老，提高观赏品质。因此，处理组对增长月季切花的保鲜期和瓶插寿命起到一定的促进作用。呼吸强度是植物体新陈代谢的一个重要指标，是指单位面积或单位重量的植物体，在单位时间内所吸收的氧或释放的二氧化碳量或损失的干重。对于不同的植物体而言，生长快的植物呼吸强度大，即呼吸强度与切花的衰老速率成正相关，呼吸强度越大，切花衰老的速度越快。本实验中对照组的呼吸强度变化最快且幅度最大，处理组呼吸强度的变化都
27、不同程度的低于对照组，这与观察到的花瓣颜色鲜艳、花径挺直是一致的。丙二醛含量常被用来评价细胞膜系统受伤害的程度, 其含量高低反映膜脂过氧化程度, 花瓣丙二醛含量一直上升对延缓水分丧失维持细胞膨压、延长花朵盛开期、增大花径、增加花枝鲜重效果显著19，因此，可提高切花的观赏价值。本实验中，对照组的丙二醛含量高于处理组，说明其对膜的伤害程度最大，这与贺文婷瓶插期间花瓣膜脂氧化产物MDA生成持续增加22和郭维明对切花月季的研究结论是一致的23。随着时间的增长，各个处理的丙二醛含量均有不同程度的增加，其中处理P3的增长幅度最小，且含量较低。这与观察到的花朵盛开期晚盛开时间长，是一致的。综上所述，各个处理
28、均有利于月季切花增长保鲜期，保持花的形态，延长花的盛开期，延缓衰老。同时，各个处理对增大花径，维持花径的大小，维持细胞膜透性和呼吸强度的稳定性，都起到了一定的促进作用，从而提高切花的观赏品质。在各个处理中，处理3对月季切花的保鲜效果最好。因此40ml沼液+40ml8-羟基喹啉(200/l) +40ml硫酸汞(100/l) +30ml蔗糖(6g/l)作为月季切花保鲜剂具有广阔的应用前景。参考文献：1黄绵佳,高俊平,张晓红,等.月季切花开花和衰老过程中乙烯变化类型初探J.园艺学报,1997,24(3):274-278.2陈林.国际玫瑰切花市场调查与分析J.温室园艺，2005,11:22-24.3彭
29、永宏, 宋丽莉,李铃.鲜切花衰老生理与保鲜技术研究进展J.华南师范大学学报, 2002(2):120一125.4谢黎飞, 乔爱民.月季切花保鲜的研究进展J.仲恺农业技术学院学报，1999，12(2):57一62.5苑瑞华.沼气生态农业技术M. 北京:中国农业出版社,2001:128-130.6 张继义,陈哲,孙玉江.畜牧养殖环境污染的现状及治理J.黑龙江畜牧兽医,2008,(6) 104- 106.7李淑琴，张纪林，卢克成.切花品质保持的若干新进展J.世界林业研究，1999,12（2）：19-23.8赵妮.月季切花采后生理及贮藏保鲜技术的研究进展J.陕西农业科学,2003（5）：34-37.9
30、 高勇, 吴绍锦. 月季切花瓶插期生理变化与衰老关系的研究J.园艺学报，1990,12（1）：71-75.10 谢黎飞,乔爱民.月季切花保鲜的研究进展J.仲恺农业技术学院学报，1999,12（2）:57-62.11陈莉,孙兆法,李梅.切花品质评价标准及采前生长条件对切花影响J.北方园艺，2000（1）:40-44.12曾广文.植物生理学M.成都:成都科技大学出版社,1998:312-313.13阳成伟,何生根,将跃明,等.多胺对月季切花衰老过程中生理生化和瓶插寿命的影响J.热带亚热带植物学报,2000,8(2):104-108.14张志良，瞿伟菁，李小方.植物生理学实验指导（第四版）M.北京：
31、高等教育出版社，1990.15赵世杰，许长成，邹琦，等.植物组织中丙二醛测定方法的改进.植物生理学通讯，1994,30（3）：207-210.16陈贵，胡文玉，谢甫俤，等.提取植物体内MDA作为衰老指标的探讨.植物生理学通讯，1991,27（1）：44-46.17胡绪岚.切花保鲜新技术M.北京;中国农业出版社.1996:1-7.18高俊平，张晓红，黄锦佳，等.月季切花开花和衰老进程中乙烯变化类型初探J.园艺学报.1997,24(3):274-278.19宋丽莉，彭永宏.GA3预处理对冷藏百合切花花瓣衰老的影响J.亚热带植物学.20何生根.切花品质的生理生化基础J.植物学通讯,1997,33(1): 66-67.21朱乾根, 林锦瑞, 寿绍文, 等. 天气学原理与方法M . 北京: 气象出版社, 2000: 374- 382.22贺文婷，郭维明.超声波对蓝睡莲湿藏期间水分状况和膜稳定性的影响J.园艺学报，2006,33（2）：328-332.23郭维明，曾武清，陈发棣.乙烯对鲜切花衰老的调节J.南京农业文学学报，1996（20）:24-29.致谢 非常感谢我的导师任永信老师，他为人热情，治学严谨。从实验选题、搜集材料、反复修改，到论文完成，他总是不厌其烦的给予我深刻而细致的指导，精心点拨，热忱鼓励。在此谨向任老师致以诚挚的谢意。
