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1、园 艺 学 报 2014，41（6）：11981206 http: / www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao 收稿日期：20131211；修回日期：20140226 基金项目：国家自然科学基金项目（31360472）；江西省自然科学基金项目（20132BAB204025） * 通信作者 Author for correspondence（E-mail：xiaobiaoxu） 野生毛花猕猴桃果实表型性状及SSR遗传多样性分析 汤佳乐，黄春辉，吴 寒，郎彬彬，曲雪艳，徐小彪* （江西农业大学农学院，南昌 33
2、0045） 摘 要：以江西省武功山境内的70份野生毛花猕猴桃种质资源为试材，对其果实表型性状、SSR遗传多样性及其亲缘关系进行分析和评价。根据UPOV（国际植物新品种保护联盟）公布的猕猴桃属品种测定标准对供试材料的果实表型性状进行观测。参照猕猴桃遗传连锁图谱，选用分布于中华猕猴桃基因组中的70对SSR引物对供试材料进行多态性分析。结果表明，在70对引物中，21对引物成功扩增出多态性片段。随机采集的70份野生毛花猕猴桃种质资源中，其果实表型性状和DNA分子水平均存在丰富的遗传多样性。基于UPGMA聚类分析将供试的野生毛花猕猴桃资源分为果实圆形和椭圆形混合组、果实椭圆形组以及果实圆柱形组。21对多
3、态性高的SSR引物共检测出127个等位变异位点，变异范围在2 12之间，平均每对SSR引物可检测到6.04个等位位点。遗传相似系数（GS）变异范围为0.5306 0.9252。GS值在0.65水平上UPGMA聚类分析可将供试的野生毛花猕猴桃种质资源划分成、和 共3个组，这与果实表型性状分析的结果基本一致。这些遗传变异丰富的种质资源可为猕猴桃育种提供有价值的材料。 关键词：毛花猕猴桃；野生；SSR标记；果实表型性状；遗传多样性 中图分类号：S 663.4 文献标志码：A 文章编号：0513-353X（2014）06-1198-09 Genetic Diversity of Wild Actini
4、dia eriantha Germplasm Based on Fruit Traits and SSR Markers TANG Jia-le，HUANG Chun-hui，WU Han，LANG Bin-bin，QU Xue-yan，and XU Xiao-biao* （College of Agronomy，Jiangxi Agricultural University，Nanchang 330045，China） Abstract：Genetic diversity and genetic relationship of 70 Actinidia eriantha Benth. ger
5、mplasms sampled from Wugong Mountain in Jiangxi Province were estimated based on the fruit morphological traits and SSR markers. The fruit phenotypic traits were collected based on the UPOV（International Union for the Protection of New Varieties of Plants）for kiwifruit. Seventy SRR primer pairs even
6、 distributed on genetic linkage map of Actinidia chinensis were used to initially assess the polymorphism. Of the 70 primer pairs tested，21 pairs successfully amplified polymorphic fragments. The collected 70 accessions have expressed rich genetic diversity in both fruit traits and SSR markers. Seve
7、nty accessions were clustered into three groups including the circular and elliptic group，elliptic group and the oblong group 6期 汤佳乐等：野生毛花猕猴桃果实表型性状及SSR遗传多样性分析 1199 based on UPGMA analysis. One hundred and twenty-seven bands were amplified using 21 primer pairs，and the number of allele per locus rang
8、ed from 2 to 12，with an average of 6.04. The genetic similarity ranged from 0.5306 to 0.9252. Upon on the UPGMA cluster analysis，70 accessions were separated into three major groups when GS values were set at the level of 0.65，which was basically consistent with the results of the fruit traits. The
9、high level of genetic variation of A. eriantha suggested that these accessions may be useful to provide breeding materials for kiwifruit. Key words：Actinidia eriantha；wild；SSR marker；fruit morphological traits；genetic diversity 猕猴桃（Actinidia spp.）原产于中国。相对于庞大的野生种质资源，猕猴桃的栽培品种只占了很小的一部分。目前猕猴桃品种选育主要还是通过从
10、野生资源中选择或杂交育种（黄宏文 等，2000）。丰富的野生猕猴桃种质资源是猕猴桃品种选育和产业可持续发展的基础（Huang et al.，2004；Ferguson & Huang，2006）。 目前商业化栽培利用的猕猴桃主要是美味猕猴桃和中华猕猴桃（刘磊 等，2013），而毛花猕猴桃（Actinidia eriantha Benth.）多处于野生状态，生产实践中推广应用的毛花猕猴桃品种极少（张佳佳 等，2011）。毛花猕猴桃果实AsA含量较高（5.00 13.79 mg g-1 FW），是中华猕猴桃的3 4倍（钟彩虹 等，2011）。毛花猕猴桃作为中国特有的野生种质，广泛分布于云南、广西、
11、贵州、湖南、江西、福建和浙江。通过对野生毛花猕猴桃种质资源进行果实表型性状及SSR遗传多样性分析的研究，可了解其种内的遗传背景，选择优良的育种亲本材料，提高育种效益。 Weising等（1996）研究发现二倍体中华猕猴桃的大多数SSR位点拥有较高的杂合度。Huang等（1998）用20个SSR位点研究发现二倍体和四倍体中华猕猴桃表现出很高的杂合度，在DNA水平上的多倍体猕猴桃具有更丰富的多样性。Cipriani等（2002）用SSR标记在对猕猴桃进行遗传图谱构建时寻找到了控制果实质量的数量性状位点连锁的标记。Tsetolin等（1997）采用“假测交”的作图技术，挑选中华猕猴桃和硬齿猕猴桃杂交
12、后代对251个标记进行筛选，获得了105个SSR位点，应用SSR和RFLP标记构建了猕猴桃遗传连锁图谱。 本研究中通过对江西武功山境内的野生毛花猕猴桃进行实地调查和资源收集，在对果实表型性状分析的基础上，采用SSR标记技术对野生毛花猕猴桃进行遗传多样性分析，旨为其优异基因发掘利用和野生株选优及其遗传育种工作提供理论依据。 1 材料与方法 1.1 试验材料及其果实表型性状的观测 2012年78月对江西省武功山境内的野生毛花猕猴桃种质资源进行了普查，供试材料为随机采集的70份野生毛花猕猴桃种质的幼叶和果实，用冰盒保存并运回实验室，置于20 超低温冰箱中保存备用。 每份毛花猕猴桃种质随机选取10个果
13、实，根据UPOV（国际植物新品种保护联盟）公布的猕猴桃属品种测定标准（UPOV，2012）对果实的8个表型性状（表1）进行测定和评价。所有的表型性状的测定结果按照UPOV标准进行分类和采用NTSYS-pc2.1进行赋值转换成表型数据矩阵。 1.2 基因组DNA的提取与SSR分析 采用CTAB法提取样品幼叶基因组DNA，用紫外分光光度计检测DNA质量和浓度，20 保1200 园 艺 学 报 41卷 存备用。 参照Testolin等（2001）构建的猕猴桃SSR遗传连锁图谱，选用广泛分布于中华猕猴桃基因组中的70对SRR引物（Palombi & Damiano，2002；Zheng et al.，
14、2004；Korkovelos et al.，2008），首先随机选择8份野生毛花猕猴桃种质材料进行扩增，筛选出多态性较好的21对SSR引物，再对70份野生毛花猕猴桃种质资源进行扩增。PCR扩增程序为94 预变性5 min；94 变性45 s，50 60 退火45 s，72 延伸45 s，30个循环；72 延伸10 min。扩增产物10%聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，快速银染法染色。 1.3 数据统计分析 对果实表型性状赋值后，采用Excel 2007进行频率分析。根据SSR分析的结果，将每条SSR引物扩增出的每一条带视为1个位点，相同迁移率的记为1，无条带的记为0，统计等位位点数、多态性位点数和多
15、态性信息含量（PIC）参数值，不具多态性的条带不予统计。采用NTSYS-pc2.1软件计算野生毛花猕猴桃的遗传距离并按照非加权配对平均法（UPGMA）和SHAN程序进行聚类分析，并对聚类分析得到的果实表型性状欧式距离矩阵和SSR标记遗传距离矩阵进行Mantel相关性检测（Lapointe & Legendre，1992）。 2 结果与分析 2.1 野生毛花猕猴桃果实表型性状分析 调查结果（表1）表明，70份野生毛花猕猴桃的果实形状变化丰富，果实形状以圆柱形居多（49%），其次为椭圆形（37%）和圆形（14%）；果心横截面有圆形、扁圆形和横向椭圆形，所占比例分别为27%、32%和41%；果实横截
16、面以圆形居多（61%），扁圆形和横向椭圆形所占比例分别为23%和16%；果基形状以微倾斜（74%）为主，果实倾斜则占26%；果顶形状除了圆形所占比例为41%外，其它微凸和深凸所占比例分别为37%和22%；毛被颜色为白色和棕色，各占50%。 表1 野生毛花猕猴桃资源果实性状描述及频率统计 Table 1 The description and frequency of fruit traits for wild Actinidia eriantha Benth. 果实性状 Fruit trait 性状描述 Description 频率/% Frequency 果实性状 Fruit trait 性
17、状描述 Description 频率/% Frequency 果实形状 圆柱形 Oblong 49 果实横截面 圆形 Circular 61 Fruit shape 椭圆形 Elliptic 37 Shape in cross 扁圆形 Oblate 23 圆形 Circular 14 section（at median） 椭圆形 Elliptic 16 果实横径 宽 Broad 24 果基形状 微倾斜 Weakly sloping 74 Fruit width 中等 Medium 50 Shape of shoulder 倾斜 Strongly sloping 26 窄 Narrow 26 a
18、t stalk end 果实纵径 长 Long 36 果顶形状 圆形 Circular 41 Fruit length 中等 Medium 38 Stylar end 微凸 Weakly blunt protruding 37 短 Short 26 深凸 Strongly blunt protruding 22 果心横截面 圆形 Circular 27 毛被颜色 白色 White 50 Shape in core in 扁圆形 Oblate 32 Color of hairs 棕色 Brown 50 cross section 椭圆形 Elliptic 41 根据果实的表型性状对野生毛花猕猴桃
19、进行UPGMA聚类分析，70份野生毛花猕猴桃资源分为3个组（图1）。A组属于果实圆形和椭圆形混合组，果基形状微倾斜，毛被白色和棕色混合分布。A组又可以分为两个亚组：A-1亚组果实横径宽，纵径短，果心横截面椭圆形，果实横截面扁圆或 6期 汤佳乐等：野生毛花猕猴桃果实表型性状及SSR遗传多样性分析 1201 图1 野生毛花猕猴桃70份资源果实性状UPGMA聚类图 A-1：果实横径宽、纵径短，果心横截面椭圆形，果实横截面扁圆或椭圆形，果顶圆形；A-2：果实横径中等或窄、纵径中等， 果心横截面圆形或扁圆形，果实横截面圆形，果顶微凸；B：果实椭圆形，纵径短，果顶微凸，毛被白色； C-1：果实横径中等，果
20、实横截面圆形；C-2：果实横径窄，果实横截面扁圆。 Fig. 1 UPGMA dendrogram of 70 wild Actinidia eriantha Benth. accessions based on fruit traits A-1：Fruit width broad，fruit length short，shape in core in cross section elliptic，shape in cross section（at median）oblate or elliptic， stylar end rounded；A-2：Fruit width medium or n
21、arrow，fruit length medium，shape in core in cross section circular or oblate， shape in cross section（at median）circular，stylar end weakly blunt protruding；B：Fruit shape elliptic， fruit length short，stylar end weakly blunt protruding，color of hairs white； C-1：Fruit width medium，shape in cross section（
22、at median）circular； C-2：Fruit width narrow，shape in cross section（at median）oblate. 1202 园 艺 学 报 41卷 椭圆形，果顶圆形；A-2亚组果实的横径中等或窄，纵径中等，果心横截面圆形或扁圆形，果实横截面圆形，果顶微凸。B组果实椭圆形，纵径短，果顶微凸，毛被为白色。C组果实圆柱形，果实的纵径长，果心横截面椭圆形，果基性状倾斜，果顶深凸，毛被白色和棕色混合分布。C组又分为两个亚组：C-1亚组果实的横径中等，果实横截面圆形；C-2亚组果实横径窄，果实横截面扁圆。 2.2 野生毛花猕猴桃SSR标记分析 利用所选
23、择的70对SSR引物对野生毛花猕猴桃种质进行分析，共筛选出21对多态性高的SSR引物，通过对70份野生毛花猕猴桃种质群体的扩增，并对等位位点数、多态位点数以及多态性信息含量（PIC）等进行多样性统计（表2）。两对SSR引物扩增得到的基因片度长度在75 400 bp，PCR总扩增总计得到127个等位位点，等位位点数在2 12之间，平均每对SSR引物可以检测到6.04个等位位点数。其中多态性位点最丰富的是引物UDK96-040，有12个等位位点变异，而引物UDK97-401只检测到了两个等位位点变异。多态信息含量（PIC值）变化范围为0.358 0.837，平均为0.691。 表2 SSR 多态性
24、引物的特征 Table 2 The characteristics for SSR polymorphism primer 引物编号 Primer code 片段大小/ bp Size range 等位位点数 Number of alleles 多态位点数 Number of polymorphic alleles 多态信息含量 PIC UDK96-001 200 300 3 3 0.520 UDK96-026 150 200 4 4 0.640 UDK96-030 100 200 6 6 0.704 UDK96-039 150 200 4 4 0.480 UDK96-040 50 150 1
25、2 12 0.773 UDK96-053 100 200 5 5 0.747 UDK97-401 75 150 2 2 0.358 UDK97-408 100 200 8 8 0.774 UDK97-411 75 150 4 4 0.652 UDK97-414 100 150 5 5 0.562 UTH03-04 100 300 8 8 0.832 UDK99-143 100 200 8 8 0.837 Ke221 75 200 7 7 0.725 Ke227 100 250 7 5 0.652 97-421 200 400 7 7 0.756 714 100 150 11 9 0.786 7
26、19 250 350 3 3 0.685 722 100 150 5 5 0.812 751 150 350 7 7 0.748 761 100 350 10 9 0.695 764 150 250 6 6 0.775 2.3 遗传相似系数及聚类分析 通过21对多态性SSR引物分析，70份野生毛花猕猴桃种质材料的遗传相似系数（GS）变异范围为0.5306 0.9252，平均值为0.7805。其中种质66和68、种质45和53的GS值最大（0.9252），表明两者的亲缘关系很近，而种质25和47的GS值最小，说明两者的亲缘关系最远，两者的相似性只有为0.5306。 根据材料间的遗传相似系数，采用
27、UPGMA法对野生毛花猕猴桃种质进行聚类分析（图2），利用21对SSR标记能将70份野生毛花猕猴桃种质相互区分，在GS值在0.65水平上将所有的材料6期 汤佳乐等：野生毛花猕猴桃果实表型性状及SSR遗传多样性分析 1203 划分成、和 共3个组。组包括了27份种质材料，包含了全部10份果实圆形的种质和17份的果实椭圆形的种质。组包括19份种质材料，果实形状主要为椭圆形，但也包括了5份的圆柱形的种质材料。组则包括了24份种质材料，种质的果实形状主要为圆柱形，同时也聚集了3份椭圆形的种质材料。圆形、椭圆形和圆柱形果实的种质都有各自聚类的趋势，但三者之间并没有完全分开。 图2 野生毛花猕猴桃材料SS
28、R标记遗传相似（GS）聚类图 ：果实圆形或椭圆形；：果实椭圆形或圆柱形；：果实圆柱形或椭圆形。 Fig. 2 Cluster result of wild Actinidia eriantha Benth. materials based on SSR markers ：Fruit shape circular or elliptic；：Fruit shape elliptic or oblong；：Fruit shape oblong or elliptic. 1204 园 艺 学 报 41卷 2.4 野生毛花猕猴桃果实表型性状与SSR标记相关性分析 为了解野生毛花猕猴桃果实表型性状的遗传多
29、样性和SSR分子标记之间可能存在的内在联系，将野生毛花猕猴桃果实表型性状欧式距离矩阵和SSR标记遗传距离矩阵进行Mantel相关性分析，结果表明二者相关性达到极显著水平（r = 0.814，P 0.01），两种分析方法得出的结果具有很大程度的吻合性。野生毛花猕猴桃不同单株之间在SSR标记遗传距离矩阵中亲缘关系的远近与果实表型性状变异的程度大致吻合，果实表型性状欧式距离矩阵中相距较近的单株之间其遗传距离也相对较小。 3 讨论 3.1 野生毛花猕猴桃果实表型性状分析 近年来，对野生植物的遗传多样性和核心种质的研究是国内外研究的热点问题（马玉敏 等，2008）。通过对野生居群的表型性状的调查和研究，
30、不仅可以对野生资源进行科学有效地保护和合理地开发利用提供指导意义，而且还可以为推动保护生物学和遗传育种提供重要的理论基础。虽然野生毛花猕猴桃在中国多个省份有分布，但大多数是出于零星分布的状态，再加上人为的因素，毛花猕猴桃资源破坏很严重。本研究中对江西省武功山境内的野生毛花猕猴桃居群进行实地调查中发现，70份野生毛花猕猴桃种质资源集中分布在（N273214，E1140722）至（N273252，E1140747）之间，分布较集中，超出这一范围则所发现的野生毛花猕猴桃极少，基本处于零星分布状态。在猕猴桃种质资源进行评价和遗传育种工作中，果实的表型性状是一类十分重要的评价指标（黄宏文 等，2000）
31、。通过对收集的70份野生毛花猕猴桃果实表型性状的研究，发现毛花猕猴桃在野生状态下存在丰富的表型性状遗传多样性，如在果实形状、果实横径、果实纵径、果心及果实横截面形状、果基及果顶形状以及毛被的颜色等性状上都表现出了很高的多样性和差异性。同时，丰富的表型性状遗传多样性也为野生毛花猕猴桃的品种选育和遗传育种的亲本选择提供丰富的种质资源。因此，在对野生毛花猕猴桃资源进行野生选优工作中，发现具有优良的果实表型性状的单株，从中培育出适应性和抗性强、果实表型性状优良的毛花猕猴桃品种是今后研究工作的重点方向。 3.2 野生毛花猕猴桃SSR遗传多样性分析 选择优良性状的亲本材料是进行猕猴桃育种工作的前提和基础，
32、亲本材料遗传背景狭窄则会导致难以培育出优良性状的品种。因此，通过选择优良性状的亲本材料，比较材料间亲缘关系的远近，对于猕猴桃新品种的选育和品种改良工作具有重要的生产指导意义。利用SSR分子标记技术进行猕猴桃遗传多样性的研究，国内外已有相关报道。郑轶琦等（2003）利用9对SSR引物，对中国栽培的48个猕猴桃品种（品系）进行了遗传多样性研究，结果表明中国猕猴桃栽培品种具有较高的遗传多样性，SSR标记在猕猴桃品种中有较高鉴定效率；栗琪等（2004）对中华猕猴桃（A. chinensis）和美味猕猴桃（A. deliciosa）的9个天然居群的遗传多样性进行了初步分析，通过对14对猕猴桃引物的筛选，
33、8对重现性好的引物扩增结果表现出良好的多态性。Liu等（2010）和刘亚令等（2006）对毛花猕猴桃自然居群进行了SSR分析，结果表明毛花猕猴桃自然居群的多态信息含量变化范围为 0.705 0.827。然而，本研究中在对武功山境内的野生毛花猕猴桃SSR遗传多样性分析时，70份种质资源材料的多态信息含量变化范围为0.358 0.837。造成武功山境内自然居群遗传多样性含量变化范围不同的原因除了本身的群体结构差异之外，可能主要是由于随机选择SSR位点的所带来的影响（刘亚令 等，2008）。虽然所收集的70份野生毛花猕猴桃种质资源为一个野生居群，各个单株6期 汤佳乐等：野生毛花猕猴桃果实表型性状及S
34、SR遗传多样性分析 1205 都分布在很近的地域范围，同处在相同或相近的气候和地域环境条件下，野生毛花猕猴桃单株之间具有一定的亲缘关系，但各自遗传背景的却存在一定的多样性。因此，通过SSR分子标记分析野生毛花猕猴桃种质资源遗传多样性，可为野生毛花猕猴桃居群优良单株的选择在分子水平上提供了依据。野生毛花猕猴桃资源开发与利用工作重点是应该结合毛花猕猴桃具有高AsA含量的特性，发掘与其相关的SSR标记位点（汤佳乐 等，2014），揭示野生毛花猕猴桃AsA富集的分子特征，并有效地促进改良猕猴桃果实品质性状与种质创新。 3.3 野生毛花猕猴桃果实表型性状与SSR标记相关性分析 岁立云等（2013）在对中
35、华猕猴桃和美味猕猴桃红肉类型猕猴桃调查研究中发现两种猕猴桃亲缘关系较近，有按地理来源优先聚类的趋势，且果实性状数据和AFLP数据之间具有极显著的相关性。本研究中通过对70份野生毛花猕猴桃种质资源基于遗传距离的聚类分析，GS值在0.65水平上将所有的材料划分成、和 3个组，说明野生毛花猕猴桃不同单株之间存在较大的遗传差异。进一步研究发现野生毛花猕猴桃资源有按照圆形、椭圆形和圆柱形果实形状聚合在一起的趋势，但三者之间并没有完全的分开，果实表型性状分析与SSR标记分析聚类的结果具有极显著的相关性（r = 0.814，P 0.01）。这说明同一个地理地域来源的野生毛花猕猴桃种质资源SSR分子标记上的遗
36、传多样性在一定程度上可以反映表型性状上的多样性。因此，今后在对猕猴桃进行品种改良和遗传育种工作过程中，野生毛花猕猴桃在果实表型性状和SSR分子标记上表现出的丰富的遗传变异能够为猕猴桃产业提供有价值的育种材料。 References Cipriani G，Huang Q G，Testolin R. 2002. Towards a linkage map in kiwifruit（Actinidia chinensis）based in simple sequence repeat（SSRs）. Proceeding of the Fifth International Symposium Kiw
37、ifruit. Ferguson A R，Huang Hong-wen. 2006. Genetic resources of kiwifruit：Domestication and breeding. Horticultural Reviews，33：1121. Huang Hong-wen，Gong Jun-jie，Wang Sheng-mei，He Zi-can，Zhang Zhong-hui，Li Jian-qiang. 2000. Genetic diversity in the genus Actinidia. Biodiversity Science，8 (1)：112. (in
38、 Chinese) 黄宏文，龚俊杰，王圣梅，何子灿，张忠慧，李建强. 2000. 猕猴桃属（Actinidia）植物的遗传多样性. 生物多样性，8 (1)：112. Huang Hong-wen，Wang Ying，Zhang Zhong-hui，Jiang Zheng-wang，Wang Sheng-mei. 2004. Actinidia germplasm resources and kiwifruit industry in China. HortScience，39 (6)：11651172. Huang W G，Cipriani G，Morgante M，Tsetolin R. 1
39、998. Microsatellite DNA in Actinidia chinensis：Isolation，characterization and homology in related species. Theoretical and Applied Genetics，97 (8)：12691278. Korkovelos A E，Mavromatis A G，Huang W G，Hagidimitriou M，Giakoundis A，Goulas C K. 2008. Effectiveness of SSR molecular markers in evaluating the
40、 phylogenetic relationships among eight Actinidia species. Scientia Horticulturae，116 (3)：305310. Lapointe F J，Legendre P. 1992. Statistical significance of the matrix correlation coefficient for comparison independent for phylogenetic trees. Systematic Biology，41：378384. Li Qi，Li Zuo-zhou，Huang Hon
41、g-wen. 2004. Preliminary study on SSR analysis in natural populations of Actinidia. Journal of Wuhan Botanical Research，22 (2)：175178. (in Chinese) 栗 琪，李作洲，黄宏文. 2004. 猕猴桃野生居群的SSR分析. 武汉植物学研究，22 (2)：175178 Liu Lei，Yao Xiao-hong，Huang Hong-wen. 2013. Development of EPIC markers in Actinidia and their a
42、pplication for phylogenetic analysis of genus Actinidia. Acta Horticulturae Sinica，40 (6)：11621168. (in Chinese) 刘 磊，姚小洪，黄宏文. 2013. 猕猴桃 EPIC 标记开发及其在猕猴桃属植物系统发育分析中的应用. 园艺学报，40 (6)：11621168. Liu Ya-ling，Li Zuo-zhou，Zhang Peng-fei，Jiang Zheng-wang，Huang Hong-wen. 2006. Spatial genetic structure in natur
43、al populations of two closely related Actinidia species（Actinidiaceae）as revealed by SSR analysis. Biodiversity Science，14 (5)：421434. (in Chinese) 刘亚令，李作洲，张鹏飞，姜正旺，黄宏文. 2006. 猕猴桃自然居群SSR遗传变异的空间自相关分析. 生物多样性，14 (5)：421434. 1206 园 艺 学 报 41卷 Liu Ya-ling，Li Zuo-zhou，Jiang Zheng-wang，Liu Yi-fei，Huang Hong-
44、wen. 2008. Genetic structure and hybridization introgression in natural populations of two closely related Actindia species，A. chinensis and A. deliciosa. Journal of Plant Ecology，32 (3)：704718. (in Chinese) 刘亚令，李作洲，姜正旺，刘义飞，黄宏文. 2008. 中华猕猴桃和美味猕猴桃自然居群遗传结构及其种间杂交渐渗. 植物生态学报，32 (3)：704718. Liu Yi-fei，Liu
45、 Ya-ling，Huang Hong-wen. 2010. Genetic variation and natural hybridization among sympatric Actinidia species and the implications for introgression breeding of kiwifruit. Tree Genetics and Genomes，6 (5)：801813. Ma Yu-min，Chen Xue-sen，He Tian-ming，Wu Chuan-jin，Wang Na. 2008. Genetic diversity of morphological traits in wild populations of Castanea mollissima Blume
