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1、薄层液基细胞术在非妇科标本中的应用,广东省中医院病理科 郑广娟2011年6月,前言,细胞学方法是肿瘤规范化诊治的第一步，具有方便、简单、可重复等优点。常用方法：传统涂片 液基薄片（液基薄片、LCT）,传统制片与液基制片比较,液基薄片在非妇科的运用,随着液基薄片在宫颈癌及其癌前病变筛查中的广泛应用，液基薄片检查技术日趋成熟稳定，可制出优质细胞薄层涂片，有效地提高了病变细胞的检出率。但对于非妇科标本，因各种液基细胞学制片技术的不同及标本 的多样性，造成了制片质量不稳定，从而影响了细胞学的诊断。我院应用液基薄片 制作非妇科标本，不断摸索总结，制出了较为满意的液基细胞涂片。,2129例液基薄片结果分析
2、,1044例标本中用液基薄片检出阳性422例（40.4），以心包积液、尿液、胸水、腹水阳性率为高。1085例乳腺囊液标本中检出阳性134例（12.4%）液基薄片与活检诊断的总符合率超过70分项统计阳性率，液基薄片均高于传统涂片，差异有统计学意义（P0.05）,2129例液基薄片判读结果,传统涂片与液基薄片阳性率比较,液基标本的采集及处理,收集样本,离心浓缩,振荡混匀,观察外观,制片,不同类型标本处理方法不一,粘液（痰液）标本 尿液标本胸腹水标本 针吸标本细胞学标本包埋,粘液（痰液）标本处理,痰：将样本直接收集在保存液中。刷出物：将收集样本用的刷子直接放在保存液中。如样本含粘液较多，可加入1ml
3、 DTT（二硫苏糖醇）溶解液,将保存液放在振荡仪上，1500-2000转振荡10分钟,将样本置离心机上，1500-2000转离心5-10分钟，弃去上清液,观察细胞团外观，若仍有肉眼可见粘液或血则加入30ml稀释10倍的DTT重复步骤2-3或用10%的冰醋酸,将沉淀物加入保存液中，将保存液瓶静止15分钟后上机制片,痰标本的采集,自然咳痰法：病人早晨咳痰之前，应漱口、以避免食物残渣和细菌污染。指导病人深呼吸后用力咳痰，几次重复同样动作，咳出肺深部的痰液吐入标本盒内，立即进行处理。超生波喷雾吸入引痰法：不能自然咳痰的病人，雾化吸入法可以获取较好的痰标本。采用超生波雾化器作气溶胶方法引痰，引痰时，病人
4、张口深吸气，由鼻孔出气。吸入10-15分钟，随时将痰咳入标本容器中，立即送检并进行处理。,男，65岁,TCT诊断：（痰）考虑为小细胞癌,痰,活检诊断：（肺）小细胞癌,图,女，70岁,液基薄片诊断：（支气管粘膜刷检物）考虑为腺癌,支气管粘膜刷检物,活检诊断：（左支气管）低分化腺癌。,图,尿液标本处理,将样本置离心机上，以2000r/min,离心10分钟,倒去上清液，观察细胞团外观，若有肉眼可见血液则加入30ml红细胞处理液（10%冰醋酸）重复步骤1,把沉渣转移到保存液中，振荡保存液5分钟。上机制片,采集注意事项,自然排尿 通常取晨起中段尿，怀疑有尿道肿瘤者，收集前段初始尿，膀胱按摩能增加细胞的脱
5、落。输尿管导尿 如怀疑有肾盂或输尿管肿瘤，自然排尿尿内细胞太少而不能诊断或要确定肿瘤的发生部位时，可在膀胱镜下作输尿管导尿，尿量不少于10毫升。,女，16岁,液基薄片诊断：（尿）肾透明细胞癌可能性大,尿液,活检诊断：（肾）透明细胞癌,男，67岁,液基薄片诊断：（尿液）考虑肾源性肿瘤,尿液,活检诊断：（左肾）中分化鳞状细胞癌,图,收集新鲜的体液样本,弃去上清液，震荡使细胞恢复悬浮状态,将样本置离心机上，1500-2000转离心5-10分钟,观察细胞团外观，若仍有肉眼可见粘液或血则加入30ml稀释10倍的DTT重复步骤2-3或用10%的冰醋酸,将沉淀物加入保存液中，将保存液瓶静止15分钟后上机制片
6、,胸腹水标本处理,浆膜腔穿刺液采集的注意事项（胸腹水、心包积液等）,浆膜腔穿刺术常由临床医生操作，送检标本量一般为100-200毫升为宜。抽出的标本应立即送检，因积液在离体后各种细胞很快会自溶破坏。积液内如含有较多纤维蛋白原时，抽出后容易凝固，影响细胞学检查，因此在抽取标本时，可按标本总量加入1：10的0.106MOL/L的枸橼酸钠溶液混匀后送检，以防止凝固。,男，72岁,液基薄片诊断：（胸水）上皮源性恶性肿瘤（癌）,胸水,活检诊断：（左肺）低分化腺癌,图,CK（+），CK7（+），TTF-1（-）,男，67岁,液基薄片诊断：（胸水）可见恶性肿瘤细胞，请临床结合病史综合分析。,胸水,活检诊断：
7、送检骨髓穿刺组织考虑为髓系白血病,图,男，67岁,液基薄片诊断：（腹水）考虑淋巴造血肿瘤,腹水,活检诊断：（骨髓穿刺）符合B细胞性淋巴瘤,图,CD3（散在+）,CD20（+）,MPO-,CD10（个别+）,Tdt-,CD5-,CD23-,将样本直接收集到离心管中，加入30ml清洗液,将样本在振荡仪上1500-2000转振荡10分钟后，再置离心机上1500-2000转离心5-10分钟，弃去上清液,观察细胞团外观，若仍有肉眼可见粘液或血则加入30ml稀释10倍的DTT重复步骤2-3或用10%的冰醋酸,将沉淀物加入保存液中，将保存液瓶静止15分钟后上机制片,针吸标本处理,针吸标本适应症与禁忌证,适应
8、症：乳腺囊液、肿大的淋巴结与各部位的肿块。禁忌证 肿块过小，直径小于0.5CM 肿块过深，固定性差，活动性大 动脉瘤和有严重出血性疾病的病人 肿块邻近为生命重要器官,女，38岁,液基薄片诊断：（右乳肿块）乳腺恶性肿瘤,乳腺,活检诊断：（右乳）浸润性导管癌,图,乳腺,女，40岁,液基薄片诊断：（右乳）梭型细胞呈中度不典型增生,活检诊断：（右乳肿物）送检乳腺组织镜下可见大量的管腔样结构，管腔内壁被覆单层扁平上皮，个别管腔内可见浆液；局灶呈丛状、乳头状增生，管腔内上皮细胞个别呈钉突样，具有轻度异型性。病变符合复杂性血管瘤（Complex Hemangioma）。,收集适量的体液样本,将样本置离心机上
9、1500-2000转离心5-10分钟,观察细胞团外观，若仍有肉眼可见粘液或血则加入30ml稀释10倍的DTT重复步骤2-3或用10%的冰醋酸,取细胞团并加入适量的预糊化淀粉，搅拌成面粉团，用包埋纸包住面粉团，放进包埋盒，合好并打上病理号,非妇科标本包埋处理,将包好的包埋盒放进固定液里固定数小时即可,病例回顾,患者，女，40岁，“头痛呕吐12天”寻医，临床以“脑膜炎，继发癫痫”收入院。入院检查：腰穿示脑压、脑脊液白细胞升高；MR示脑干、小脑脑膜及C1-T4脑髓表明脊膜呈线状、结节状增厚强化，考虑脑膜、脊膜炎可能性大（见下页图）。行抗菌抗病毒效果不佳。,影像学资料,病例回顾,后抽少许脑脊液送病理科
10、行液基薄片检验，镜下发现肿瘤细胞（下图），拟行免疫组化进一步明确,遂将剩余脑脊液经处理包埋成蜡块行免疫组化检测（见下页图），结合免疫组化液基薄片报告“(脑脊液）上皮源性恶性肿瘤，组织学类型及来源考虑胃肠道腺癌；建议做相应检查。”,病例回顾,免疫组化结果,CK阳性,CK阳性,CK20阳性,脑脊液包埋成蜡块，箭头示印戒样细胞,胃镜和病理活检所见,胃镜见胃窦部肿物,胃窦部活检,总结,相对于传统涂片而言，液基薄片价格稍贵，但后者明显提高了细胞样本的检测质量，性价比更高传统涂片由于血液、粘液、炎症等因素影响，常使样本模糊，存在检测误差；液基薄片可以明显提高癌变细胞的阳性检出率，并相应减少需要重复做普通涂片的次数，后续还可行免疫组化检测，核算的结果，费用并没有增加，但却降低了患者因被重做测试而引起的不必要的担心。,谢谢！,
