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1、生产产品检测标准文件名称化验室内控标准版本文件编号ZJBZ-02制定部门质检部页次1、目的:保证所的生产的产品符合公司规定,满足客户品质要求,确保我公司才产品质量,保证消费者; 2、范围:公司所有生产产品; 3、职责:仓库主管:负责物料的接收、整理、保管、通知; 品管主管:负责安排检验人员进行验收检验; 检验员: 负责对包材进行验收检验;4.内容4.1 取样原则:半成品:按批次,每锅取一个样品。成品:按批次取一个样品。原料:每个批次去一个样品。空气:室内取样纯水:纯水室内出水点取样4.2取样方法:抽样时,必须带口罩,带手套,以免污染样品。 取样瓶,不锈钢匙须用75%的酒精消毒。送检样品,应严格
2、保持原有的包装状态,容器不应有破裂,在检验前不得开启,以防再污染.若一个样品,须同时做多种分析,宜先取出部分样品做细菌检验,再将剩余样品作其它分析.4.3产品检验产品(半成品和成品)的检验包括理化指标检验和微生物检验。1.1 产品(半成品和成品)理化指标的标准 批准 审核编制文件名称化妆水标准版本文件编号ZJBZ-02-01制定部门质检部页次1、目的:保证所的生产的产品符合公司规定,满足客户品质要求,确保我公司才产品质量,保证消费者; 2、范围:所有生产产品; 3、职责:仓库主管:负责物料的接收、整理、保管、通知; 品管主管:负责安排检验人员进行验收检验; 检验员: 负责对包材进行验收检验;4
3、.检测内容项 目要 求单层多层感官指标外观 均匀液体,不含杂质两层或多层液体香气符合规定香型理化指标耐热(401)保持24h,恢复至室温后与试验前无明显性状差异耐寒(51)保持24h,恢复至室温后与试验前无明显性状差异pH值4.08.5(直测法)(、羟基酸类产品除外)相对密度(20/20)规定值0.02微生物指标细菌总数/(CFU/g)1000(儿童用产品500)霉菌和酵母菌总数/(CFU/g)1005.检测方法5.1外观 取试样在室温和非阳光直射下目测观察5.2香气 先将等量的试样和规定试样 ( 按企业内部规定) 分别放在相同的容器内, 用宽0.5cm1.0cm、长10 c m-15c m的
4、吸水纸作为评香纸,分别蘸取试样和规定试样约1 cm-2 cm ( 两者应接近) ,用嗅觉来鉴别 。5.3耐寒实验:仪器:恒温培养箱:温控精度1操作程序:预先将恒温培养箱调节到( 4 0 士1 )C, 把包装完整的试样一瓶置于恒温培养箱内。24 h后取出, 恢复至室温后目测观察5.4耐寒实验:仪器:恒温培养箱:温控精度1操作程序:预先将恒温培养箱调节到( 5士1 )C, 把包装完整的试样一瓶置于恒温培养箱内。24 h后取出, 恢复至室温后目测观察5.5 PH值检测方法按GB/T 1353 .1 中规定的方法测定( 直测法)5.6相对密度检测方法按GB/T 13351.4中规定的方法测定。 批准
5、审核编制文件名称护肤乳标准版本文件编号ZJBZ-02-02制定部门质检部页次1、目的:保证所的生产的产品符合公司规定,满足客户品质要求,确保我公司才产品质量,保证消费者; 2、范围:所有生产产品; 3、职责:仓库主管:负责物料的接收、整理、保管、通知; 品管主管:负责安排检验人员进行验收检验; 检验员: 负责对包材进行验收检验;4.检测内容项 目要 求水包油型(型)油包水型(型)感官指标外观 均匀一致(添加不溶性颗粒或不溶粉末的产品除外)香气符合规定香型理化指标耐热(401)保持24h,恢复至室温后与试验前无分层现象耐寒(-82)保持24h,恢复至室温后与试验前无分层现象pH(25)4.08.
6、5(直测法)(、羟基酸类产品可按企标执行)-离心实验2000r/min,30min不分层(添加不溶性颗粒或不溶粉末的产品除外)微生物指标细菌总数/(CFU/g)1000(儿童用产品500)霉菌和酵母菌总数/(CFU/g)1005.检测方法5.1外观 取试样在室温和非阳光直射下目测观察5.2香气 取试样用嗅觉进行鉴别 。5.3耐热实验:仪器:温度计:分度值0.5:电热恒温培养箱:温控精度1操作程序:将试样分别倒入2支20mm120mm的试管内,使液面高度约80mm,塞上干净的塞子,把一致待验的试管置于预先调节到40恒温培养箱内,24 h后取出, 恢复至室温后与另一支试管的试样进行目测比较。5.4
7、耐寒实验:仪器:温度计:分度值0.5:冰箱:温控精度2操作程序:将试样分别倒入2支20mm120mm的试管内,使液面高度约80mm,塞上干净的塞子,把一致待验的试管置于预先调节到-8冰箱内,24 h后取出, 恢复至室温后与另一支试管的试样进行目测比较。5.5 PH值检测方法按GB/T 1353 .1 中规定的方法测定( 稀释法)5.6离心实验方法仪器:a)角型低速台式离心机,最大相对离心力19.6N30.7N; b)离心管:刻度10ml2支; c)电热恒温培养箱:温控精度1 d)温度计:分度值0.5操作:于离心管中注入试样约2/3高度并装实,用塞子塞好,然后放入预先调节到38的电热恒温培养箱内
8、,保持1h,立即移入离心机中,并将离心机调整到2000r/min的离心速度,旋转30min取出观察。 批准 审核编制文件名称洗面奶 ,洗面膏标准版本文件编号ZJBZ-02-03制定部门质检部页次1、目的:保证所的生产的产品符合公司规定,满足客户品质要求,确保我公司才产品质量,保证消费者; 2、范围:所有生产产品; 3、职责:仓库主管:负责物料的接收、整理、保管、通知; 品管主管:负责安排检验人员进行验收检验; 检验员: 负责对包材进行验收检验;4.检测内容项 目要 求乳化型(型)非乳化型(型)感官指标质感 均匀一致(含颗粒或灌装成特定外观的产品除外)色泽符合规定色泽香气符合规定香型理化指标耐热
9、(401)保持24h,恢复至室温后与试验前无分层现象耐寒(-82)保持24h,恢复至室温后无分层、泛粗、变色现象)pH(25)4.08.5(直测法)(、羟基酸类产品可按企标执行)4.0-11.0(、羟基酸类产品可按企标执行)离心实验2000r/min,30min无油水分离(颗粒沉淀除外)-微生物指标细菌总数/(CFU/g)1000(儿童用产品500)霉菌和酵母菌总数/(CFU/g)1005.检测方法5.1质感取试样适量,在室温下涂于手背或双臂内侧观察。5.2色泽 取试样在室温和非阳光直射下目测观察5.3香气 取试样用嗅觉进行鉴别 。5.3耐热实验:仪器:温度计:分度值0.5:电热恒温培养箱:温
10、控精度1操作程序:预先将恒温培养箱调节到40, 把包装完整的试样一瓶置于恒温培养箱内。24 h后取出, 恢复至室温后目测观察。5.4耐寒实验:仪器:温度计:分度值0.5:冰箱:温控精度2操作程序:预先将恒温培养箱调节到-8, 把包装完整的试样置于恒温培养箱内。24 h后取出, 恢复至室温后目测观察。5.5 PH值检测方法按GB/T 1353 .1 中规定的方法测定( 稀释法)5.6离心实验方法仪器:a)角型低速台式离心机,最大相对离心力19.6N30.7N; b)离心管:刻度10ml2支; c)电热恒温培养箱:温控精度1 d)温度计:分度值0.5操作:于离心管中注入试样约2/3高度并装实,用塞
11、子塞好,然后放入预先调节到38的电热恒温培养箱内,保持1h,立即移入离心机中,并将离心机调整到2000r/min的离心速度,旋转30min取出观察。 批准 审核编制文件名称面膜标准版本文件编号ZJBZ-02-04制定部门质检部页次1、目的:保证所的生产的产品符合公司规定,满足客户品质要求,确保我公司才产品质量,保证消费者; 2、范围:公司所有生产产品; 3、职责:仓库主管:负责物料的接收、整理、保管、通知; 品管主管:负责安排检验人员进行验收检验; 检验员: 负责对包材进行验收检验;4.检测内容项 目要 求膏(乳)状面膜啫喱面膜面膜贴粉状面膜感官指标香气 符合规定香型外观均匀膏体或乳液透明或半
12、透明凝胶润湿的纤维贴膜或胶状成形面膜贴均匀粉末理化指标耐热(401)保持24h,恢复至室温后与试验前无明显差异-耐寒(-5-10)保持24h,恢复至室温与试验前无差异-pH(25)3.5-8.55.0-10.0微生物指标细菌总数/(CFU/g)1000(儿童用产品500)霉菌和酵母菌总数/(CFU/g)1005.检测方法5.1外观取试样在室温和非阳光直射下目测观测5.2香气 取试样用嗅觉进行鉴别 。5.3耐热实验:仪器:a)试管:20mm20mmb) 电热恒温培养箱:温控精度2操作程序:a) 非透明包装产品将试样分别倒入2支20mm20mm的试管内,使液面高度约80mm,塞上干净的塞子,把一致
13、待验的试管置于预先调节到(401)冰箱内,24 h后取出, 恢复至室温后与另一支试管的试样进行目测比较。b)面膜贴和透明包装产品取两袋包装完整的试样,把一袋(瓶)试样置于预先调好至(401)的恒温培养箱中,24 h后取出,恢复至室温后,剪开面膜贴膜包装与另一袋试样进行目测比较;透明包装产品则直接与另外一瓶试样进行目测比较。5.4耐寒实验:仪器:a)试管:20mm20mmb)冰箱:温控精度2操作程序:a) 非透明包装产品将试样分别倒入2支20mm20mm的试管内,使液面高度约80mm,塞上干净的塞子,把一致待验的试管置于预先调节到(-5-10)冰箱内,24 h后取出, 恢复至室温后与另一支试管的
14、试样进行目测比较。b)面膜贴和透明包装产品取两袋包装完整的试样,把一袋(瓶)试样置于预先调好至(-5-10)的恒温培养箱中,24 h后取出,恢复至室温后,剪开面膜贴膜包装与另一袋试样进行目测比较;透明包装产品则直接与另外一瓶试样进行目测比较。5.5 PH值检测方法a)膏(乳)状面膜、啫喱面膜、粉状面膜按GB/T 1353 .1 中规定的方法测定( 稀释法)b)面膜贴(纤维面膜贴)将贴膜中的水或黏稠液体挤出,按GB/T 1353 .1 中规定的方法测定( 稀释法)5.6离心实验方法仪器:a)角型低速台式离心机,最大相对离心力19.6N30.7N; b)离心管:刻度10ml2支; c)电热恒温培养
15、箱:温控精度1 d)温度计:分度值0.5操作:于离心管中注入试样约2/3高度并装实,用塞子塞好,然后放入预先调节到38的电热恒温培养箱内,保持1h,立即移入离心机中,并将离心机调整到2000r/min的离心速度,旋转30min取出观察。 批准 审核编制文件名称面膜标准版本文件编号ZJBZ-02-04制定部门质检部页次1、目的:保证所的生产的产品符合公司规定,满足客户品质要求,确保我公司才产品质量,保证消费者; 2、范围:公司所有生产产品; 3、职责:仓库主管:负责物料的接收、整理、保管、通知; 品管主管:负责安排检验人员进行验收检验; 检验员: 负责对包材进行验收检验;4.检测内容项 目要 求
16、膏(乳)状面膜啫喱面膜面膜贴粉状面膜感官指标香气 符合规定香型外观均匀膏体或乳液透明或半透明凝胶润湿的纤维贴膜或胶状成形面膜贴均匀粉末理化指标耐热(401)保持24h,恢复至室温后与试验前无明显差异-耐寒(-5-10)保持24h,恢复至室温与试验前无差异-pH(25)3.5-8.55.0-10.0微生物指标细菌总数/(CFU/g)1000(儿童用产品500)霉菌和酵母菌总数/(CFU/g)1005.检测方法5.1外观取试样在室温和非阳光直射下目测观测5.2香气 取试样用嗅觉进行鉴别 。5.3耐热实验:仪器:a)试管:20mm20mmb) 电热恒温培养箱:温控精度2操作程序:a) 非透明包装产品
17、将试样分别倒入2支20mm20mm的试管内,使液面高度约80mm,塞上干净的塞子,把一致待验的试管置于预先调节到(401)冰箱内,24 h后取出, 恢复至室温后与另一支试管的试样进行目测比较。b)面膜贴和透明包装产品取两袋包装完整的试样,把一袋(瓶)试样置于预先调好至(401)的恒温培养箱中,24 h后取出,恢复至室温后,剪开面膜贴膜包装与另一袋试样进行目测比较;透明包装产品则直接与另外一瓶试样进行目测比较。5.4耐寒实验:仪器:a)试管:20mm20mmb)冰箱:温控精度2操作程序:a) 非透明包装产品将试样分别倒入2支20mm20mm的试管内,使液面高度约80mm,塞上干净的塞子,把一致待
18、验的试管置于预先调节到(-5-10)冰箱内,24 h后取出, 恢复至室温后与另一支试管的试样进行目测比较。b)面膜贴和透明包装产品取两袋包装完整的试样,把一袋(瓶)试样置于预先调好至(-5-10)的恒温培养箱中,24 h后取出,恢复至室温后,剪开面膜贴膜包装与另一袋试样进行目测比较;透明包装产品则直接与另外一瓶试样进行目测比较。5.5 PH值检测方法a)膏(乳)状面膜、啫喱面膜、粉状面膜按GB/T 1353 .1 中规定的方法测定( 稀释法)b)面膜贴(纤维面膜贴)将贴膜中的水或黏稠液体挤出,按GB/T 1353 .1 中规定的方法测定( 稀释法)5.6离心实验方法仪器:a)角型低速台式离心机
19、,最大相对离心力19.6N30.7N; b)离心管:刻度10ml2支; c)电热恒温培养箱:温控精度1 d)温度计:分度值0.5操作:于离心管中注入试样约2/3高度并装实,用塞子塞好,然后放入预先调节到38的电热恒温培养箱内,保持1h,立即移入离心机中,并将离心机调整到2000r/min的离心速度,旋转30min取出观察。 批准 审核编制文件名称护肤啫喱标准版本文件编号ZJBZ-02-05制定部门质检部页次1、目的:保证所的生产的产品符合公司规定,满足客户品质要求,确保我公司才产品质量,保证消费者; 2、范围:公司所有生产产品; 3、职责:仓库主管:负责物料的接收、整理、保管、通知; 品管主管
20、:负责安排检验人员进行验收检验; 检验员: 负责对包材进行验收检验;4.检测内容项 目要 求感官指标香气 符合规定香型外观透明或半透明凝胶状,无异物(允许添加起护肤或美化作用的粒子)理化指标耐热(401)保持24h,恢复至室温后与试验前外观无明显差异耐寒(-5-10)保持24h,恢复至室温与试验前外观无明显差异pH(25)3.5-8.5微生物指标细菌总数/(CFU/g)1000(儿童用产品500)霉菌和酵母菌总数/(CFU/g)1005.检测方法5.1外观取试样在室温和非阳光直射下目测观测5.2香气 取试样用嗅觉进行鉴别 。5.3耐热实验:仪器:a)试管:20mm120mmb) 恒温培养箱:温
21、控精度2操作程序:a) 非透明包装产品将试样分别倒入2支20mm120mm的试管内,使液面高度约80mm,塞上干净的塞子,把一致待验的试管置于预先调节到(401)冰箱内,24 h后取出, 恢复至室温后与另一支试管的试样进行目测比较。b)透明包装产品取两袋包装完整的试样,把一袋(瓶)试样置于预先调好至(401)的恒温培养箱中,24 h后取出,恢复至室温后,与另外一瓶试样进行目测比较。5.4耐寒实验:仪器:a)试管:20mm120mmb) 冰箱:温控精度2操作程序:a) 非透明包装产品将试样分别倒入2支20mm120mm的试管内,使液面高度约80mm,塞上干净的塞子,把一致待验的试管置于预先调节到
22、(-5-10)冰箱内,24 h后取出, 恢复至室温后与另一支试管的试样进行目测比较。b)透明包装产品取两袋包装完整的试样,把一袋(瓶)试样置于预先调好至(-5-10)的恒温培养箱中,24 h后取出,恢复至室温后,与另外一瓶试样进行目测比较。5.5 PH值检测方法按GB/T 1353 .1 中规定的方法测定( 稀释法) 批准 审核编制文件名称洗发水标准版本文件编号ZJBZ-02-06制定部门质检部页次1、目的:保证所的生产的产品符合公司规定,满足客户品质要求,确保我公司才产品质量,保证消费者; 2、范围:公司所有生产产品; 3、职责:仓库主管:负责物料的接收、整理、保管、通知; 品管主管:负责安
23、排检验人员进行验收检验; 检验员: 负责对包材进行验收检验;4.检测内容项 目要 求洗发液洗发膏感官指标香气 符合规定香型色泽符合规定色泽外观无异物理化指标耐热(401)保持24h,恢复至室温后无分层401)保持24h,恢复至室温后无分离析水现象耐寒(-5-10)保持24h,恢复至室温后无分层(-5-10)保持24h,恢复至室温后无分离析水现象pH(25)成人产品4.09.0(、羟基酸类产品可按企标执行)儿童产品:4.0-8.04.09.0(、羟基酸类产品可按企标执行)泡沫(40)透明型100非透明型50儿童产品40100有效物含量/%成人产品10.0儿童产品8.0-活性物含量/%-8.0微生
24、物指标细菌总数/(CFU/g)1000(儿童用产品500)霉菌和酵母菌总数/(CFU/g)1005.检测方法5.1外观取试样在室温和非阳光直射下目测观测5.2香气 取试样用嗅觉进行鉴别 。5.3耐热实验:仪器:a)试管:20mm120mmb) 恒温培养箱:温控精度2操作程序:a) 非透明包装产品将试样分别倒入2支20mm120mm的试管内,使液面高度约80mm,塞上干净的塞子,把一致待验的试管置于预先调节到(401)冰箱内,24 h后取出, 恢复至室温后与另一支试管的试样进行目测比较。b)透明包装产品取两袋包装完整的试样,把一袋(瓶)试样置于预先调好至(401)的恒温培养箱中,24 h后取出,
25、恢复至室温后,与另外一瓶试样进行目测比较。5.4耐寒实验:仪器:a)试管:20mm120mmb) 冰箱:温控精度2操作程序:a) 非透明包装产品将试样分别倒入2支20mm120mm的试管内,使液面高度约80mm,塞上干净的塞子,把一致待验的试管置于预先调节到(-5-10)冰箱内,24 h后取出, 恢复至室温后与另一支试管的试样进行目测比较。b)透明包装产品取两袋包装完整的试样,把一袋(瓶)试样置于预先调好至(-5-10)的恒温培养箱中,24 h后取出,恢复至室温后,与另外一瓶试样进行目测比较。5.5 PH值检测方法按GB/T 1353 .1 中规定的方法测定( 稀释法) 批准 审核编制文件名称
26、PH值检测方法版本文件编号ZJBZ-02-06制定部门质检部页次1、目的:保证所的生产的产品符合公司规定,满足客户品质要求,制定准确可行的试验方法,真是有效的反应出产品的各种检测指标。2、范围:公司所有生产产品; 4.试验仪器:PH剂5.检测步骤5.1试样的制备5.1.1稀释法称取试样一份(精确至0.1g),加入经煮沸冷却后的实验室用水九分,加热至40,并不断搅拌至均匀,冷却至规定温度,待用。如为含油量较高的产品,可加热至7080,冷却后去油块待用,粉状产品可沉淀过滤后待用,5.1.2直测法(粉类,油膏类化妆品及油包水型乳化体除外)将适量包装容器中的试样放入烧杯中或将小包装试样去盖后,调节至规
27、定温度,待用。6分析结果的表述 PH值的测定结果以两次测量的平均值表示,精确到0.1 批准 审核编制文件名称微生物检测方法样品的制备版本文件编号ZJBZ-02-06制定部门质检部页次1、目的:保证所的生产的产品符合公司规定,满足客户品质要求,制定准确可行的试验方法,真是有效的反应出产品的各种检测指标。2、范围:公司所有生产产品; 3、仪器和设备天平,0-200g,精确至0.1g。高压灭菌器。振荡器。三角瓶,250mL、150mL。玻璃珠。玻璃棒。灭菌刻度吸管,10mL、1mL。恒温水浴箱。均质器或研钵。灭菌均质袋。4、培养基和试剂4.1 生理盐水 成分: 氯化钠 8.5g 蒸馏水加至 1000
28、mL 制法:溶解后,分装到加玻璃珠的三角瓶内,每瓶90mL,121高压灭菌20min。4.2 SCDLP液体培养基 成分:酪蛋白胨 17g 大豆蛋白胨 3g 氯化钠 5g 磷酸氢二钾 2.5g 葡萄糖 2.5g 卵磷脂 1g 吐温80 7g 蒸馏水 1000mL制法:先将卵磷脂在少量蒸馏水中加温溶解后,再与其它成分混合,加热溶解,调pH为7.27.3分装,每瓶90mL,121高压灭菌20min。注意振荡,使沉淀于底层的吐温80充分混合,冷却至25左右使用。注:如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨,也可用多胨代替。4.3 灭菌液体石蜡。 制法:取液体石蜡50mL,121高压灭菌20min。4.4 灭菌吐温8
29、0。 制法:取吐温80 50mL,121高压灭菌20min。5 样品的采集及注意事项5.1 所采集的样品,应具有代表性,一般视每批化妆品数量大小,随机抽取相应数量的包装单位。检验时,应从不少于2个包装单位的取样中共取10g或10mL。包装量小于20g的样品,采样时可适当增加样品包装数量。5.2 供检样品,应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂,在检验前不得打开,防止样品被污染。5.3 接到样品后,应立即登记,编写检验序号,并按检验要求尽快检验。如不能及时检验,样品应置于室温阴凉干燥处,不要冷藏或冷冻。5.4 若只有一个样品而同时需做多种分析,如微生物、毒理、化学等,则宜先取出部分样品做微生物
30、检验,再将剩余样品做其它分析。5.5 在检验过程中,从打开包装到全部检验操作结束,均须防止微生物的再污染和扩散,所用器皿及材料均应事先灭菌,全部操作应在符合生物安全要求的实验室中进行。6 供检样品的制备6.1 液体样品6.1.1 水溶性的液体样品,用灭菌吸管吸取10mL样品加到90mL灭菌生理盐水中,混匀后,制成1:10检液。6.1.2 油性液体样品,取样品10g,先加5mL灭菌液体石蜡混匀,再加10mL灭菌的吐温80,在4044水浴中振荡混合10min,加入灭菌的生理盐水75mL(在4044水浴中预温),在4044水浴中乳化,制成1:10的悬液。6.2 膏、霜、乳剂半固体状样品6.2.1 亲
31、水性的样品:称取10g,加到装有玻璃珠及90mL灭菌生理盐水的三角瓶中,充分振荡混匀,静置15min。用其上清液作为1:10的检液。6.2.2 疏水性样品:称取10g,置于灭菌的研钵中,加10mL灭菌液体石蜡,研磨成粘稠状,再加入10mL灭菌吐温80,研磨待溶解后,加70mL灭菌生理盐水,在4044水浴中充分混合,制成1:10检液。6.3 固体样品 称取10g,加到90mL灭菌生理盐水中,充分振荡混匀,使其分散混悬,静置后,取上清液作为1:10的检液。使用均质器时,则采用灭菌均质袋,将上述水溶性膏、霜、粉剂等,称10g样品加入90mL灭菌生理盐水,均质1min2min;疏水性膏、霜及眉笔、口红
32、等,称10g样品,加10mL灭菌液体石蜡,10mL吐温80,70mL灭菌生理盐水,均质3min5min。 批准 审核编制文件名称菌落总数的测定版本文件编号ZJBZ-02-06制定部门质检部页次1、目的:保证所的生产的产品符合公司规定,满足客户品质要求,制定准确可行的试验方法,真是有效的反应出产品的各种检测指标。2、范围:本规范规定了化妆品中菌落总数的检验方法;本规范适用于化妆品菌落总数的测定; 3、定义3.1 菌落总数 Aerobic bacterial count 化妆品检样经过处理,在一定条件下培养后(如培养基成分、培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等),1g(1mL)检样中所含菌落的总
33、数。所得结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性和兼性厌氧菌落总数。 测定菌落总数便于判明样品被细菌污染的程度,是对样品进行卫生学总评价的综合依据。4、仪器和设备三角瓶,250mL。量筒,200mL。pH计或精密pH试纸。高压灭菌器。试管,18mm150mm。灭菌平皿,直径90mm。灭菌刻度吸管,10mL、1mL。酒精灯。恒温培养箱,361。放大镜。恒温水浴箱,551。5、培养基和试剂5.1 生理盐水:见总则中3.1。5.2 卵磷脂、吐温80营养琼脂培养基成分:蛋白胨 20g 牛肉膏 3g 氯化钠 5g 琼脂 15g 卵磷脂 1g 吐温80 7g 蒸馏水 1000mL制法:先将卵磷
34、脂加到少量蒸馏水中,加热溶解,加入吐温80,将其他成分(除琼脂外)加到其余的蒸馏水中,溶解。加入已溶解的卵磷脂、吐温80,混匀,调pH值为7.17.4,加入琼脂,121高压灭菌20min,储存于冷暗处备用。5.3 0.5%氯化三苯四氮唑(2,3,5-triphenyl terazolium chloride,TTC) 成分:TTC 0.5g 蒸馏水 100mL 制法:溶解后过滤除菌,或115高压灭菌20min,装于棕色试剂瓶,置4冰箱备用。 6 操作步骤6.1 用灭菌吸管吸取1:10稀释的检液2mL,分别注入到两个灭菌平皿内,每皿1mL。另取1mL注入到9mL灭菌生理盐水试管中(注意勿使吸管接
35、触液面),更换一支吸管,并充分混匀,制成1:100检液。吸取2mL,分别注入到两个灭菌平皿内,每皿1mL。如样品含菌量高,还可再稀释成1:1000,1:10000,等,每个稀释度应换1支吸管。6.2 将融化并冷至4550的卵磷脂吐温80营养琼脂培养基倾注到平皿内,每皿约15mL,随即转动平皿,使样品与培养基充分混合均匀,待琼脂凝固后,翻转平皿,置361培养箱内培养48h2h。另取一个不加样品的灭菌空平皿,加入约15mL卵磷脂吐温80营养琼脂培养基,待琼脂凝固后,翻转平皿,置361培养箱内培养48h2h,为空白对照。6.3 为便于区别化妆品中的颗粒与菌落,可在每100mL卵磷脂吐温80营养琼脂中
36、加入1mL 0.5%的TTC溶液,如有细菌存在,培养后菌落呈红色,而化妆品的颗粒颜色无变化。7 菌落计数方法先用肉眼观察,点数菌落数,然后再用5倍10倍的放大镜检查,以防遗漏。记下各平皿的菌落数后,求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。若平皿中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长时,该平皿不宜计数。若片状菌落不到平皿中的一半,而其余一半中菌落数分布又很均匀,则可将此半个平皿菌落计数后乘以2,以代表全皿菌落数。8 菌落计数及报告方法8.1 首先选取平均菌落数在30300之间的平皿,作为菌落总数测定的范围。当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,即以该平皿菌落数乘其稀释倍数报告之(见表1中例1)
37、。8.2 若有两个稀释度,其平均菌落数均在30300之间,则应求出两菌落总数之比值来决定,若其比值小于或等于2,应报告其平均数,若大于2则以其中稀释度较低的平皿的菌落数报告之(见表1中例2及例3)。8.3 若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1中例4)。8.4 若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1例5)。8.5 若所有稀释度的平均菌落数均不在30300之间,其中一个稀释度大于300,而相邻的另一稀释度小于30时,则以接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1中例6)。8.6 若所有的稀释度均无菌生长,报告数为每g或每mL小于10CF