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1、技能训练15 寄生虫的虫卵粪便检查法,学习和掌握用于虫卵检查的粪便材料的采集、保存和寄送的方法及要领学习和掌握饱和盐水漂浮法的操作技术,实训目标,显微镜、显微镜投影仪、天平、粪盒（或塑料袋）、粪筛、260孔英寸尼龙筛、玻璃棒、镊子、铁丝环；茶杯（或塑料杯）、100mL烧杯、离心管、漏斗、离心机、载片、盖片、带胶乳头的移液管、污物桶（或污物缸）、纱布、动物新鲜的粪便等,仪器材料,方法步骤,（一）粪便的采集、保存和寄送方法（二）粪便检查的方法,（一）粪便的采集、保存和寄送方法,被检粪便应该是新鲜没有被污染的，最好从直肠采取。大家畜按直肠检查的方法采集，猪、羊可将食指或中指伸入直肠，钩取粪便。采取自
2、然排出的粪便，需采取粪堆或粪球上部未被污染的部分。粪便采好后按头编号装入清洁的容器（小广口瓶、纸盒、油纸袋、塑料袋等）内。采集的用具应避免相互交叉污染。每采一份，清洗一次。采取的粪便应尽快检查，不能立即检查急需转送寄出的，应放在冷暗处或冰箱中保存。若需寄出检查或需长期保存，可将粪浸入加温至5060的5%10%的福尔马林液中，使粪便中的虫卵失去活力，起固定作用，又不改变形态，还可防止微生物的繁殖。,（二）粪便检查的方法,1沉淀检查法 2漂浮检查法 3直接涂片检查法 4粪便肉眼检查法,1沉淀检查法,（1）反复水洗沉淀法 取粪便510g置于烧杯（或塑料杯）中，加1020倍量水充分搅合，再用金属筛或纱
3、布2层滤过于另一杯中，滤液静置20分钟后倾去上层液，再加水与沉淀物重新搅和、静置，如此反复水洗沉淀物多次，直至上层液透明为止，最后倾去上清液，用吸管吸取沉淀物滴于载玻片上，加盖玻片镜检。,（2）离心机沉淀法 取粪便3g置于小杯中，加1015倍水搅拌混合，然后将粪便用金属筛（4060目）或纱布滤入离心管中，以20002500转/分的速度离心沉淀12分钟。取出后倾去上层液，再加水搅合离心沉淀，如此反复23次，最后倾去上层液，用吸管取沉淀物滴于载玻片上，加盖玻片镜检。,（3）尼龙网淘洗法 取粪便510g置于烧杯（或塑料杯）中，加10倍量的水搅匀，先通过40目或60目的铜筛过滤。滤过液再通过260目锦
4、纶筛兜过滤，并在筛兜中断续加水冲洗，直到洗出的液体清澈透明为止；然后挑取兜内粪渣抹片检查。此法适用于宽度大于60m的虫卵。通过以上处理，粗大粪渣被铜筛扣留，纤细粪渣（直径小于40m）和可溶性色素均被冲洗走而使虫卵集中。,2漂浮检查法,（1）漂浮液的制备 常用的漂浮液是饱和盐水溶液，其制法是将食盐加入沸水中，直至不再溶解生成沉淀为止（1000mL水中约加食盐400g），用四层纱布或脱脂棉滤过后，冷却备用。此外还可使用硫代硫酸钠饱和液（1000mL水加入1750g硫代硫酸钠）、硝酸铵溶液（1000mL水加入1500g硝酸铵）和硝酸铅溶液（1000mL水加入650g硝酸铅）等溶液。后两者大大提高检出
5、效果，甚至可用于吸虫病的诊断。但是用高比重溶液时易使虫卵和卵囊变形，检查必须迅速，制片时补加1滴清水也可。,（2）检查方法饱和盐水漂浮法 试管浮聚法,3直接涂片检查法,这是最简单和常用的方法，但当体内寄生虫数量不多而粪便中排出的虫卵少时，有时不能查出虫卵。方法是：首先在载玻片上滴1滴50%甘油水溶液（或生理盐水、普通水），取少量粪便与甘油水溶液混合后，夹去较大的或较粗的粪渣，最后使玻片上留有一层均匀的粪液，其浓度的要求是将此玻片放于报纸上，能通过粪便膜模糊地辨认其下的字迹为合适。在粪膜上覆以盖玻片，置显微镜下检查。先用低倍镜检查，发现虫卵、卵囊后换取高倍镜检查。检查时应有顺序地查遍盖玻片下的所
6、有部分。,4粪便肉眼检查法,该法多用于绦虫病的诊断，也可用于某些肠道寄生虫病的驱虫诊断，即用药驱虫后检查随粪便排出的虫体。检查时，先检查粪便的表面，看是否有大型虫体和较大的绦虫节片，然后将粪便仔细捣碎，认真进行观察。对检查较小虫体或节片，将粪便置于较大的容器中（如金属桶、玻璃缸等），加入510倍量的水（或生理盐水），彻底搅拌后静置10分钟以上，然后倾去上层液，再重新加清水搅匀静置，如此反复数次，直至上层液体清亮为止。最后倾去上层清亮液，将少量沉淀物放在黑色浅盘（或衬以黑色纸或黑布的玻璃容器）中检查，必要时采用放大镜或实体显微镜检查，发现的虫体和节片用镊子、针或毛笔取出，以便进行鉴定。,课后作业,写出实习报告,
