医院病理科分子病理实验室实施方案.doc

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1、SEEPOO TECH*医院病理科分子病理实验室推荐方案目录第一部分 分子病理概述31.1分子病理诊断的应用范围51.2常用分子病理技术51.3 FISH-荧光原位杂交61.4部分FISH产品对比(厂家提供,仅供参考)71.5实时荧光定量PCR91.6 基因测序10第二部分 分子病理实验室设施与环境11第三部分 病理科实验室质量管理标准12第四部分 分子病理常用检测设备131、荧光显微镜原位杂交图像分析系统132、Leica Bond-Max全自动免疫组化和原位杂交多功能染色机133、罗氏LightCycler 480 模块式高通量实时荧光定量PCR系统144、罗氏BenchMark GX 全

2、自动多功能组织病理检测系统155、Illumina HiSeq 2000高通量测序仪156、NatureGene TermoBrite 原位杂交仪167、力康HFsafe-1200 Class Type A2 生物安全柜178、Neofuge1600 Healforce 台式高速冷冻大容量离心机18第五部分 分子病理实验室推荐设备型号及预算19方案一 初级配置方案19方案二 专业性配置方案19方案三 科研型配置方案20第六部分 分子病理常用试剂及价格20第七部分 分子病理经济效益分析257.1荧光原位杂交(FISH)检测项目的经济价值257.2 实时荧光定量PCR项目的经济价值27第一部分 分

3、子病理概述病理为医之本 As is our pathology, so is our medicine器官病理学组织细胞病理学临床病理免疫组化分子病理18-19世纪19世纪19世纪中叶取活体病变组织做病检提高病理诊断准确性20世纪早期诊断、靶向治疗20世纪手术切除组织标本病理检测病理学发展过程分子病理学中常用的分子生物学技术主要有核酸分子杂交、PCR相关技术、免疫荧光化学、基因芯片以及DNA序列分析等。由于分子病理学的应用,使得我们对疾病本质的认识更加深化,对于肿瘤的诊断和治疗也取得很大的进展。主要表现在以下几个方面:1、肿瘤易感基因的检测:肿瘤遗传相关的易感基因检测对于肿瘤高危人群的筛检具有

4、实用价值,已明确的肿瘤易感基因及其相关肿瘤有Rb1(视网膜母细胞瘤)、WT1(肾母细胞瘤)等。除了检测高危人群的易感基因外,有方法也应用于正常人群肿瘤易感性检测,如检测Ret基因突变用于诊断型多发性内分泌肿瘤,通过分析GST基因型以判断个体暴露于致癌物时的致癌危险性等。2、肿瘤相关病毒的检测:如HPV病毒与宫颈癌的发生有很大关系,通过对HPV病毒的检测可起到预防和提早治疗的作用。而当前国际上诊断HPV感染以DNA检测为主。3、肿瘤的早期诊断:K-ras基因突变在结肠癌、胰腺癌和肺癌等肿瘤中发生率较高。应用细针穿刺活检材料检测胰腺癌的第12密码子变突。应用PCR-RFLP方法检测结肠癌患者粪便中

5、的Ras基因突变,其检出率与瘤组织中相似,可用于高危人群的筛选。4、疑难肿瘤的诊断和分类:传统的病理学诊断主要通过形态学和免疫表型来判断淋巴细胞增生与淋巴细胞性肿瘤,但对对医生的经验要求较高,且难度较大。应用RFLP分析免疫球蛋白或T细胞受体基因重排,具有鉴别诊断作用,且这种分子病理分型比免疫学分型更为准确。对Bcr区基因重排的检测,可对慢性粒细胞性白血病和急性粒细胞性白血病进行鉴别诊断。N-myc和C-myc扩增和表达的检测,对鉴别神经母细胞瘤和神经上皮瘤具有应用价值,因前者N-myc明显扩增,而后者则为C-myc明显扩增。 5、肿瘤的预后监测:利用癌症患者的全基因序列开发出的个性化血液检测

6、方法有助于医生调整癌症患者的治疗方案,可以监测癌症治疗后的情况以及发现癌症是否复发。6、为肿瘤个体化和预见性治疗提供依据:肿瘤在发生、发展的不同时期,可能涉及不同基因的不同变化形式,而这种变化与肿瘤临床治疗的敏感性密切相关,如能在分子水平对肿瘤基因变化提供指标,对肿瘤的个体化和预见性治疗具有指导意义。如在90%的胰腺癌、50%的结肠癌、30%的非小细胞肺癌中存在Ras基因的激活,50%左右的肿瘤有P53基因不同形式的突变,这些基因的异常,使肿瘤对某些放疗或化疗的方法具有抵抗性,如能从基因水平上改变异常基因的状态,则可提高放、化疗的敏感性。 7、肿瘤的预后判断:肿瘤基因的突变、扩增及过表达等改变

7、常与肿瘤的预后密切相关。如HER2基因扩增与乳腺癌发生发展及临床预后密切相关, HER2的阳性表达提示预后不良,可通过荧光原位杂交(FISH)技术进行检测,配合术后治疗,指导临床用药。组织病理学诊断免疫病理学诊断分子病理学诊断病理学诊断及鉴别诊断肿瘤“个体化”靶向治疗断药物疗效的评价临床预后评估及预测1.1分子病理诊断的应用范围n 人类遗传病的基因诊断和产前诊断 n 肿瘤分子靶向治疗 n 明确感染性疾病的病源体(细胞、真菌、病毒) n 多基因病研究 n 组织器官移植配型 n 辅助病理诊断 n 法医学 n 性别鉴定 n 基础研究通过PCR技术确认Ig和TCR基因是否发生重排,判定淋巴造血系统疾病

8、的良恶性。FISH法检测乳腺癌her-2基因是否发生扩增,指导临床靶向药物(赫赛汀)治疗。FISH法检测滑膜肉瘤SYT基因是否发生易位,协助临床诊断。通过对结直肠癌KRAS基因的突变测序分析,指导靶向用药(爱比妥)。HPV多亚型检测,提示宫颈癌的发病风险。肺癌分子靶向治疗 EGFR酪氨酸激酶抑制剂:吉非替尼(gefitinib, 商品名Iressa) 、埃罗替尼 (Erlotinib, 商品名Tarceva)检测HER2状态的临床价值胃癌靶向治疗患者筛选、疗效预测 1.2常用分子病理技术免疫组织化学(IHC)技术检测蛋白 分子原位杂交DNA,RNA 荧光原位杂交(FISH)技术DNA,RNA多

9、聚酶链式反应PCR技术DNA,RNA 荧光定量PCRDNA,RNADNA测序技术DNA突变 生物芯片技术DNA,RNA,蛋白质等DNA印迹(Southern blot)微卫星不稳定检测(MSI) 医院病理科开展分子病理实验项目,一般从实用出发,二级医院主要开展荧光原位杂交(FISH)项目,三级医院主要开展荧光原位杂交(FISH)、荧光定量PCR项目,有条件的三级医院可以开展DNA基因测序项目。1.3 FISH-荧光原位杂交FISH技术是一种通过荧光标记的DNA探针与细胞核内的DNA靶序列杂交,在荧光显微镜下能原位显示细胞核内杂交信号的分子细胞遗传学技术。FISH技术检测基因扩增的准确性比其他检

10、测技术高,可以避免由于染色体的多体而呈现的假阳性,被誉为“金标准”。实验流程 FISH样本的制备-探针的制备-探针标记-杂交-(染色体显带)-荧光显微镜检测-结果分析FISH优点1.荧光探针商业化、采购方便、保存安全。2.实验周期短、特异性好、定位准确。3.可定位1KB的DNA序列,灵敏度高4.一次染色可获取24种不同颜色的染色体,对于隐匿性的缺失、异位诊断准确。FISH技术在医院的运用 一切与染色体相关的科室。特别是病理科、血液科、妇产科、生殖中心(产前诊断、植入前诊断)等。目前应用于临床检测的FISH基因探针有接近于一百种。在美国,FISH探针已被FDA列为“特异性分析试剂”,不需批准即可

11、用于临床医学检测。所以,FISH检测在国外应用非常广泛和迅速。如Vysis、Cytocell等公司,其产品已遍布全球,但其价格较贵,严重阻碍了在我国国内的推广。国内厂家,如金菩嘉和广州安必平,近年来发展迅速,品种覆盖范围较广,且产品质量保证、性价比高。并且,更为有利的是,国内公司供货快速及时、售后服务好。由于国内厂家的崛起,近年来国内医院开展FISH检测的速度大大加快。FISH技术实验室基本要求实验室环境:样本准备区、暗室(10-15平米左右);实验设备:荧光显微镜以及荧光成像分析系统、水浴锅、原位杂交仪、冰箱、离心机、恒温箱办公设备:电脑、打印机实验耗材:FISH探针,进口如雅培、罗氏 细胞

12、类探针:诸如血液病类,如白血病、淋巴瘤、骨髓瘤等。其次,产前诊断和产后筛查类;实体肿瘤类探针:病理科在检测乳腺癌、子宫颈癌、膀胱癌、肺癌、宫颈癌、软组织肉瘤、前列腺癌、甲状腺癌等方面。技术人员:1人1.4部分FISH产品对比(厂家提供,仅供参考)品牌比较广州安必平金菩嘉雅培(Vysis)探针种类覆盖70种肿瘤探针,品种齐全,覆盖了实体瘤及血液疾病。约40种,部分肿瘤没有覆盖。覆盖70种肿瘤探针,品种齐全,覆盖了实体瘤及血液疾病。探针质量用多个克隆标记探针,信号灵敏,背景低,质量与国外相当。实体瘤探针质量与国外相当,但血液病探针信号不佳。探针信号灵敏,背景低,质量好。价格由于有自己的研发团队,探

13、针都为自产,成本较低,具有强大的价格竞争力,本公司的出现也打破了国内公司一家独大的垄断。价格比雅培低,但高于安必平。由于异国操作,运营成本高,价格高。操作便利性即用型探针:探针溶液已包含杂交液组分,可直接点样杂交,无需杂交前溶解探针和混匀探针及杂交液,方便操作和减少出错。探针与杂交液分开,杂交前需在黑暗环境中混合两者,操作不变、容易出错。探针与杂交液分开,杂交前需在黑暗环境中混合两者,操作不变、容易出错。辅助试剂配送FISH所需的常规试剂(蛋白酶K或胃蛋白酶、NP-40、多聚甲醛、20SSC等),节约客户采购时间及成本。搭配蛋白酶K一起销售。搭配蛋白酶K、NP-40等一起销售。荧光显微系统配置

14、从客户出发,帮客户选用性价比高的荧光显微镜及图像分析软件,操作便利,性价比高。满足要求,但价格较高。满足要求,但价格较高,且客户可能需自己配置系统。显微镜明场观察配相差功能,可镜下仔细观察蛋白酶消化状态,对小体积样本及珍贵样本处理特别有效,避免消化不佳导致杂交结果不好。不配相差功能。不配相差功能。标配滤块对新客户标配四种颜色的荧光滤块(DAPI、绿、红、青),可同时满足实体瘤及产前诊断。只标配三种颜色滤块(DAPI、绿、红),如需开展产前诊断的话客户还要额外购买青色滤块。只标配三种颜色滤块(DAPI、绿、红);如需开展产前诊断的话客户还要额外购买青色滤块,且需用到金色滤块(容易出现窜色),滤块

15、配置要求太高。检测靶标因为标配了四种滤块,可同时检测三个靶标(绿红青),临床检测效率高、能降低试剂成本、且能应用于多靶标检测的科研课题。只有两个靶标的试剂(绿红),靶向选择及组合受限。有同时检测三个靶标的试剂,但因为不是标配,应用受限。图像分析软件有自主研发的图像分析软件,降低客户采购成本。外购。外购。品种设计因为所有探针都为自主研发,可为客户灵活设计产品探针组成,以便临床、科研充分使用及降低试剂成本探针不能根据客户需求进行调整,可能存在试剂成本较高的风险。探针不能根据客户需求进行调整,可能存在试剂成本较高的风险。特色产品能设计多个“二合一”探针组合;15种微缺失探针(用于流产原因筛查及其他少

16、见综合症);只有部分基因探针。不能根据客户需求设计“二合一”探针。国内SFDA证书两个产品取得注册受理号,即将取得注册证书。几个产品取得注册证书。两个产品取得注册证书。地理位置位于广州,华南地区客户地理位置近,送货及服务及时到位。位于北京,华南地区服务不便。位于国外,国内虽有代理,但售后服务及技术支持不能最快反应。平台支持有多年其他产品的网络支持,如病理科中的液基细胞学平台,与客户建立了多年来的良好关系。产品单一,只有FISH试剂,设备、人员投入高。有其他试剂,但病理科中只有FISH,无其他平台支持。售后服务借助于广泛的液基细胞学网络及合作公司达安基因的全国网络,售后服务迅速周到。售后服务网络

17、单一,售后服务风险较高。售后服务网络单一,售后服务风险较高。优势资源与达安基因合资,充分利用全国广泛的销售及技术支持资源。特殊资源有自己的学术核心期刊分子诊断与治疗,方便客户课题研究。无无1.5实时荧光定量PCR实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。临床疾病诊断:各型肝炎、艾滋病、禽流感、结核、性病等传染病诊断和疗效评价;地中海贫血、血友病、性别发育异常、智力低下综合症、胎儿畸形等优生优育检测;肿瘤标志物及瘤基因检测实现肿瘤病诊断;遗传基因检测实现遗传病诊断。实时荧光定量PCR分子病理诊

18、断应用 绝对定量(Absolute Quantification) 病原体检测(HiV,HBV,结核杆菌,H1N1等) 基因表达研究(白血病融合基因表达检测) 相对定量(Relative Quantification) 肿瘤组织中的特定基因表达(EGFR,VEGFR,BRCA1&2,ERCC1&2,RRM1) 肿瘤Bio-Marker特定miRNA检测1900多个试剂盒 CNV研究超过160万个TaqMan Copy Numer Assay 药物疗效考核 突变分型(Allelic Discrimination) 基因突变分析-肿瘤个体化医疗 SNP研究2600 个药物代谢试剂盒,个体化医疗 物

19、种鉴定、菌株鉴定 阴阳性检验(Plus/Minus with IPC) 稀有突变检测(早期肿瘤诊断:外周血痕量肿瘤细胞等荧光定量PCR显著优点 (1)、可以进行准确的定量检测,可适用于基因诊断的各种疾病; (2)、定量范围极宽,样品无需做梯度稀释; (3)、特异性更强,克服了假阳性的主要来源; (4)、操作快速,无需PCR后处理; (5)、技术简单,易于学习和掌握; (6)、安全,对操作员和环境都无危害。 (7)、易于进行电脑化操作和数据管理,有利于医院的现代化建设。实时荧光定量PCR检测肿瘤的有关项目 CEA mRNA、 AFP mRNA、uPA mRNA、CK19 mRNA、CK20 mR

20、NA、 MDRI mRNA。1.6 基因测序DNA 测序技术主要依据 Sanger 的双脱氧链终止法。以 DNA 单链为模板,在特定条件下,用特异的引物在测序级 DNA 聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则,不断将 4 种脱氧核糖核苷酸 (dNTP) 加到引物的 3- 羟基末端并使引物链得到延伸。将测序结果用DNA sequencing analysis 5.1软件自动分析原始测序数据,获取测序电泳图和序列图。临床基因测序检测对病理科的形态诊断金标准含金量的提升和分子病理技术的开发及经济效益改善有现实意义。对于可疑癌前病变患者可以明确其病变标本是否真正含有候选基因的突变,以解除大量由免疫组化标

21、记癌基因阳性患者的心理恐慌和经济负担。对癌症家族有血缘关系的亲属检测相关癌基因突变或多态性,具有亚健康诊断和体检意义。第二部分 分子病理实验室设施与环境1、布局合理、实验室各区域的划分;2、水电、照明、通风符合实验室基本要求;3、消防设施齐全、消防通道畅通;4、石蜡组织、DNA样本的存放;5、实验室记录、操作手册等文件存放;6、实验室耗材、试剂的存放;7、安装生物安全防护设施;8、废弃物的处置9、实验室的清洁与日常消毒、并有相关记录其中:PCR实验环境要求明确分区,一般分为4个工作区;各区独立,互不相通;设置缓冲间,设置传递窗;单一方向FISH实验环境要求:需要避光独立的暗室,专门的荧光显微镜

22、观察室第三部分 病理科实验室质量管理标准1、卫生部【2009】31号文件病理科建设与管理指南(试行)2、2006年6月1日实施的医疗机构临床实验室管理办法3、全国各省市的关于临床病理专业质量检查及评价标准4、美国CAP认可标准5、欧洲NordiQC认证标准6、国际标准化组织制定并于2003年正式发布医学实验室的管理标准:ISO15189:2003医学实验室质量和能力的专用要求,由国际实验室认可合作组织(ILAC)推荐执行。适合临床多学科实验室对检验前、中、后全过程的管理。第四部分 分子病理常用检测设备1、徕卡Leica荧光显微镜原位杂交图像分析系统 品牌/型号:LEICA DM 2500 技术

23、参数一、荧光显微镜部分1、配显微镜主机2、光学系统:无限远校正光学系统。3、具有明场、荧光观察功能。4、6位物镜转换器。5、总放大倍数:50X-1000X。6、*三目观察镜筒,分光比例:100%/0,50%/50%,0/100%7、透射光照明:12V100W卤素灯。8、底座带滤片架和日光滤光片。9、*单手操作样夹, 方便同时记录。10、*调焦与X-Y调节全对称, 实现无疲劳操作。11、*调焦旋钮高度可调12、*3步聚焦(粗/中/细),钮距可调,停焦可调。13、*聚光镜:带与物镜放大倍数相匹配的孔镜光栏彩色标记, 方便聚光镜调节14、超硬镀陶瓷载物台 15、*载物台调节左右手可以更换。16、X-

24、Y移动无暴露齿条。17、配平场半复消色差物镜:1.25x(NA=0.04),平场半复消色差荧光物镜10x(NA=0.30),平场复消色差荧光物镜63x(NA=1.30)oil,平场半复消色差荧光物镜100x(NA=1.30)oil。18、目镜:10X宽视野目镜,视野数为25mm;19、荧光装置:5位荧光滤块转换器,配紫外、蓝色、绿色荧光激发。UV 激发: 激发340-380nm; 阻挡400nm; 发射: 425nm;Blue激发:激发480/40nm; 阻挡505nm; 发射: 527/30nm;Green激发:激发546/12nm; 阻挡565nm; 发射: 600/40nm20、外置荧光

25、光源:外置金属卤化物光源,长寿命,免调节工作时间2000小时以上。光源通过光纤传输,无热力传输。 21、*有荧光“零像素点漂移”技术。22、*有光陷設計可以确保有很黑的背景:倾斜的发射光滤块,吸收雜 光的黑色涂层,磨光表面和减少反射的涂层。23、配1 x接口二、数码成像系统部分:配高灵敏度双速单色冷CCD数码摄像头参数,半导体式制冷,-20度。 2/3英寸CCD,像素1392 x 1040(1.4 Mpixel),像素大小6.45x6.45um pixels,感光面积8.9 * 6.6 mm。三、细胞染色体核型及荧光原位杂交分析软件 1、CytoVision karyotyping染色体核型及

26、荧光原位杂交分析1.1、有完备的染色体图象处理技术,对染色体之间的重叠交叉和连接等都可用单键自动分割或手动画线分割,划线切割时画错可以任意后退回擦;1.2、画中轴线分离染色体时,不同染色体自动用不同颜色突出;1.3、可对显带不够清晰的染色体应用不同的高斯数阵显示格式使条带明晰;1.4、染色体放大、缩小、旋转、翻转、镜向翻转;1.5、可自动或人工干预识别着丝粒位置,可自动或手动将染色体拉直1.6、可以创建用于自己染色体样品的分类体系以增加分类的精确性,也可以对已有的分类器进行训练,使之与分析对象更匹配1.7、快速校正错放和未识别的染色体1.8、可以编辑定义染色体标准模式图1.9、强大的(CASE

27、VIEW)功能,可对捕获的中期相图进行分类标记,可根据需要选择不同的中期相分别进行核型分析、染色体数目直接计数和中期染色体直接标记1.10、强大的多细胞平行比较(MULTICELL)功能,方便比较同一或不同玻片上的同一号染色体的差异1.11、强大的主任管理(DIRECTOR REVIEW)功能,方便和复查相关病例的核型结果;1.12、可识别G、R、Q、C、DAPI的显带分型,G带有300、400、550、700、850条带的分类标准、R带有400、550条带的标准;1.13、强大的实验室管理、质量控制和数据统计功能,可追踪染色体分析的数量,可对各种不同类型病例进行分类统计。2、CytoVisi

28、on FISH荧光原位杂交分析模块2.1、多通道颜色采集,不限数量2.2、可以识别出DAPI和PI染色的染色体分带细节2.3、可对FISH图像的探针信号对比度调节2.4、可对部分选择对目标信号单独修饰2.5、有对信号的感兴趣区采集功能2.6、可用于探针标记和G-带染色体比较2.7、可计算FISH信号的强度面积距离等2.8、可测量P端长度比(FLPTER)值2.9、可对中期FISH图中的信号进行定位2.10、可对中期FISH图进行染色体分割排列2.11、核型图可显示为反转黑白条带(与G带带纹匹配)2.12、FISH核型图可显示为彩色荧光图2.13、彩色荧光信号可明确显示位于哪条染色体具体什么位置

29、2.14、强大的捕获中和铺货后图像处理功能(除常规GAMMA、对比度、锐化柔化、消除等等功能外,还可以使用多种高斯数阵改变图像显示方式)2.15、可手工直接对间期细胞进行分类标记,然后自动统计每一类细胞的数量和百分比2.16、可在FISH图像上添加文字和图谱2.17、可与染色体标准模式图或核型图比较2.18、可与染色体核型图出在一张报告上;2.19、Z轴分层采集:每种荧光素独立设置不同参数,分别进行分层采集,然后自动合彩色图像,层间距根据细胞大小灵活设置,层数根据目标厚度灵活设置,探针大小可灵活设置,克服了荧光信号不在同一焦平面上倒置部分信号虚化或缺失的问题,使FISH信号点数清晰可数,使FI

30、SH图像漂亮美观2.20、荧光点分类计数:自动搜索间期细胞、定位间期细胞、自动采集、统计每个间期细胞上不同荧光信号数量,统计融合信号,统计不同类细胞数量和百分比,可在扫描捕获中使用z轴分层采集3、原装进口Dell电脑, Windows 7 控制系统; 22” LCD 显示屏。选配:建议核型加荧光原位杂交一起购买这样对用户老师使用范围更广,含盖的面就比较全,如细胞中期和间期的荧光原位杂交都可以观察,而且精度就会很高。2、Leica Bond-Max全自动免疫组化和原位杂交多功能染色机Bond-Max是一台性能卓越的全自动免疫组化染色机,免疫组化的所有步骤-烤片、脱蜡、抗原修复、阻断、标记一炕、标

31、记二抗、显色直到复染-都可以由Bond-Max自动完成,每个Bond-Max有3个玻片盘,同时最多可容纳30张玻片,而每个玻片盘可独立执行不同程序3、罗氏LightCycler 480 模块式高通量实时荧光定量PCR系统超过10年的实时定量PCR系统与试剂研发的丰富经验,凝聚成今日业界的经典之作。先进Therma-BaseTM 热循环技术和改良光路设计确保检测均一性,彻底消除边缘效应。可以进行高分辨率熔解曲线分析的模块式高通量荧光定量PCR系统。配合LIMS系统及自动进样机械臂可实现远程控制和自动化运作。准确度高动力学范围广,可检测到100 -1010 个拷贝DNA。重复性高,CV0.15%。

32、高重复性,孔间温度均一性可达 0.1 高分辨率,轻松区分1000与2000拷贝模板浓度差异。灵活96孔、384孔热循环模块用户自助更换。荧光染料和试剂完全开放。5个激发通道,6个检测通道,支持多种检测模式。可广泛应用于绝对定量、相对定量、产物鉴定、终点法基因分型、熔解曲线基因分型、Micro RNA研究、DNA甲基化研究、HRM基因扫描等研究。高速反应时间(40个循环):384孔40分钟,96孔60分钟。4、罗氏BenchMark GX 全自动多功能组织病理检测系统柔性自动化使IHC、ISH和FITC载片的所有制备步骤实现完全自动化;可单独或同步处理IHC、ISH和FITC检测。灵活优化临床研

33、究方案可选择您自己的原抗体,也可选择Ventana提供的即用型抗体可根据您的比容量/通量要求选择一个或多个BenchMark一触式双色方案染色自动烤片一流技术自动烤片自动脱蜡自动细胞调节自动染色5、Illumina HiSeq 2000高通量测序仪HiSeq 2000测序涉及生物学各领域,包括DNA测序、RNA测序、宏基因组测序、甲基化测序、外显子捕获测序、ChIP-Seq等。因此,HiSeq 2000能够为基因调控分析、转录组分析、SNP位点、结构变异分析和疾病分析等提供迅捷、庞大、准确的信息数据。6、NatureGene TermoBrite 原位杂交仪 一次可进行12张切片的实验反应舱密

34、封禁闭,温度适宜精确的温控,温室均匀一致三种固定运行模式四十种自定义编辑程序数字键盘操作,方便易行 TermoBrite是原位杂交领域的领航者,其优质的性能在广大原位杂交用户中得到好评。严格温度控制 温差在设定温度1 超强的温度均一性 不受切片数量影响 理想的温度控制 简单程序设置 40种使用者自定义的程序 3种已设置运行模式 显示屏随时显示实验条件,实验过程一目了然 尺寸146mm228mm451mm重量8.5kg容量12张玻片功率240VAC1.6A处理时间可持续0-100小时温度控制温度范围30-99环境温度5-407、力康HFsafe-1200 Class Type A2 生物安全柜H

35、eal Force做为中国最早和最权威的生物安全柜品牌之一,一直凭借优异的产品品质、良好的用户口碑和专业的售后服务品质深得全球100多个国家用户的肯定,是中华人民共和国医药行业YY0569-2005生物安全柜产品标准的主要起草单位。Heal Force 品牌生物安全柜在中国各级疾病控制中心、医院临检系统和科研院所系统是广大科研工作者进行生物安全研究的重要防护屏障。8、Neofuge1600 Healforce 台式高速冷冻大容量离心机HEAL FORCE是中国唯一一家同时获得德国TUV ISO9001质量管理体系认证和欧盟CE产品质量认证的离心机品牌,全系列产品获得中国SFDA认证的品牌,是全

36、球首家采用“Strong-Drive”驱动轴技术、真正掌握膨胀阀反馈调节制冷技术以及离心机转子硬质阳极氧化处理工艺的离心机品牌,采用德国的工艺技术,优质的售后服务,多年的客户好评,保证了绝对的市场占有率。Heal Force Neofuge 15台式高速离心机 最高转速 16000rpm最大容量 4100ml最大离心力 24900g驱动系统 无碳刷变频电机温度控制范围 1040/-温度控制精度 1时间设定 9h59min内重量 79/58 Kg外形尺寸(长宽高) 580520315mm 第五部分 分子病理实验室推荐型号及预算方案一 初级配置方案序号设备品牌 型号单价数量金额备注01荧光显微镜成

37、像分析系统奥林巴斯BX41或者NIKONEclipse 50i或者国产3900001390000低端显微镜国产CCD荧光激发器国产软件02恒温加热平台常州菲普DB-3A型650016500高温变性及烤片用03电热恒温水槽常州菲普SHA-CA型11000111000洗涤用04电热恒温培养箱上海精宏DNP-9052型460014600杂交用05生物安全柜上海力康HF safe900A22680012680006PCR扩增仪Hema 9600基因扩增仪47000147000合计485900(适合二级医院,标本量少,常规检测,不涉及科研)方案二 专业性配置方案序号设备品牌 型号单价数量金额备注01荧光

38、显微镜成像分析系统德国LeicaDM250005700001570000生物显微镜 双速单色冷 CCD5位荧光滤块软件CytoVision karyotyping02原位杂交仪美国StatSpinThermobrite8900017900003台式高速离心机国产3200013200004实时荧光定量PCR凯杰Rotor-Gene Q 6plex360000136000005生物安全柜上海力康HFsafe-1200TE380001380001089000适合三级医院病理科方案三 科研型配置方案序号设备品牌 型号单价数量金额备注01荧光显微镜成像分析系统德国LeicaDM4000750000175

39、0000智能显微镜高端配置02原位杂交仪美国StatSpinThermobrite8900018900003台式高速冷冻离心机国产4000014000004实时荧光定量PCR罗氏LightCycler 4806800001680000最先进的PCR05生物安全柜上海力康HFsafe-1200TE3800013800006基因测序仪Illumina HiSeq 2000270万1选配1597000适合综合性医院病理科,承担科研项目。第六部分 分子病理常用试剂及价格序号名称规格单位生产厂家中标价1丙肝病毒荧光定量检测10人份盒中山大学达安基因760.00 2结核杆菌DNA-PCR20T(定量)盒中

40、山大学达安基因760.00 3乙肝病毒PCR荧光定量20T(定量)盒中山大学达安基因760.00 4乙肝病毒PCR荧光质控低值300ul*7盒中山大学达安基因70.00 5BCR/ABL融合基因检测试剂盒10人份盒北京金菩嘉医疗科技4520.00 6EGFR基因扩增检测盒10人份盒北京金菩嘉医疗科技7000.00 7EGFR基因突变检测盒10人份盒北京金菩嘉医疗科技4250.00 8HER-2 基因扩增检测盒20人份盒北京金菩嘉医疗科技18000.00 9TOP2A基因异常检测盒10人份盒北京金菩嘉医疗科技7000.00 10膀胱癌细胞染色体及基因异常10人份盒北京金菩嘉医疗科技10540.0

41、0 11子宫颈细胞TERC位点扩增10人份盒北京金菩嘉医疗科技3680.00 12kras基因突变检测盒10人份盒北京金菩嘉医疗科技11800.00 13Vysis SS18 Break Apart FISH Probe Kit (CE)150ul+20ul包vysis12694.00 14N-MYC SpectrumGreen (2p24)/CEP 2 SpectrumOrange Probe150ul+20ul包vysis19231.00 15EWSR1 (22q12) Dual Color, Break Apart Rearrangement Probe 150ul+20ul包vysis

42、12681.00 161p36 / LSI 1q25 and LSI 19q13/19p13 Dual Color Probe 1000ul*2包vysis21023.00 17IGH/MYC, CEP 8 Tri-color, Dual Fusion Translocation Probe150ul+20ul包vysis12925.00 18IGH/MALT1 t(14;18)(q32;q21) Dual Color, Dual Fusion Translocation Probe , 20 uL150ul+20ul包vysis13124.00 19IGH/CCND1 Dual Color,

43、 Dual Fusion Translocation Probe150ul+20ul包vysis12925.00 20IGH/BCL2 Dual Color, Dual Fusion Translocation Probe (CE)200ul+200ul盒vysis12925.00 21TaqMan预混试剂盒200R盒ABI美国生物应用5170.00 FISH技术其他试剂及耗材编号说明编号说明试剂1二甲苯(脱蜡)2无水乙醇(脱蜡脱水、老化)3蛋白酶K(组织切片消化)4胃蛋白酶(细胞滴片消化)520SSC(预处理及洗涤)620PBS(配制蛋白酶K溶液、样本处理)7SDS(配制蛋白酶K溶液)8NP-40(杂交后洗涤)9聚乙二醇1500(细胞保存液

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