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1、与酶有关的实验,比较过氧化氢在不同条件下的分解探究酶的高效性探究酶的专一性探究温度对酶活性的影响探究PH对酶活性的影响,高考实验范围、类型和要求,实验原理:新鲜肝脏中有较多的过氧化氢酶。经计算,质量分数为3.5%的FeCL3溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比,每滴FeCL3溶液中的Fe3+数,大约是每滴研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍。实验材料:新鲜的质量分数为20%的肝脏研磨液(如猪肝、鸡肝)新配制的体积分数为3%的过氧化氢溶液 质量分数为3.5%FeCL3溶液,实验步骤:,常温,90,FeCl3,肝脏研磨液,2滴,2滴,不明显,少量,较多,大量,不复燃,不复燃,变亮,复燃,过氧化氢在
2、不同条件下的分解速率不一样,反应条件,对照组,实验组,探究酶的高效性,2.验证或探究酶具有高效性 高效性是一种比较性概念,是指与无机催化剂相比具有高效性。因此应设置酶与无机催化剂对同一反应的催化效率的对照。不能用酶和蒸馏水做对照,若这样是验证酶的催化功能。设计思路,底物+酶溶液底物分解速率底物+等量无机催化剂底物分解速率,实验组:对照组:,检测,检测,H2O2 H2O+O2,过氧化氢酶,Fe3,实验原理:,新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶,氯化铁是一种无机催化剂,都可以催化H2O2分解成H2O和O2。,注意观察实验现象,并分析实验设计思路,自变量、因变量和无关变量,并设计表格记录实验步骤和结果。,试
3、管,1号,2号,H2O2溶液,3mL,3mL,鸡肝匀浆,少许,少许,Fe3,点燃后无明火的卫生香,很快复燃,不复燃,实验结论,与无机催化剂相比,过氧化氢酶具有高效性。,(1)自变量:,催化剂的种类,(2)因变量:,底物分解速率,检测方法:,点燃但无明火的卫生香复燃程度,火焰大小气泡产生的速度、多少,(3)无关变量:,过氧化氢溶液的量、浓度、配制的时间;鸡肝匀浆的新鲜程度;实验室温度等。,验证或探究酶的高效性,检测 实验组:底物+相应酶溶液底物被分解 检测 对照组:另一底物+等量相应酶溶液底物不被分解,3.验证或探究酶的专一性,检测 实验组:底物+相应酶溶液底物被分解 检测 对照组:相同底物+等
4、量另一种酶溶液底物不被分解,自变量:不同底物,自变量:不同酶溶液,因变量:底物是否被分解,因变量:底物是否被分解,设计思路一,设计思路二,设计温度(或pH)对酶活性的影响实验要注意三点:(1)设置多组不同温度(或pH)相互对照(2)注意在酶发挥作用前设置实验要求的不同温度或pH(3)鉴定反应速度的两种方法:检测生成物增加的速度。检测反应物减少的速度。要选择恰当的试剂检测因变量,4.验证或探究温度对酶活性的影响:,实验材料:,淀粉酶,验证或探究温度对酶活性的影响:自变量是温度,应设置具有一定梯度的多个不同温度条件,比较某种酶的催化效率。一般至少应设置“低温、适温、高温”三个指标。不同的酶有不同的
5、最适温度。动物的体温就是自身各种酶的最适温度(35-40)。植物体内的酶最适温度在40-50 之间细菌和真菌体内的酶最适温度差别较大(如Taq酶)淀粉酶最适温度是60,如何控制自变量?,水浴法,探究温度对淀粉酶活性的影响,冰水中,60水浴,沸水浴,放置2min,1ml,1ml,1ml,1滴,1滴,1滴,摇匀混合,放置反应5min,变蓝,变蓝,不变蓝,淀粉酶在60 中活性最强,步骤2、3不能颠倒,先控制条件再混合,5.验证或探究pH对酶活性的影响:自变量是pH,应设置具有一定梯度的多个不同pH条件,比较某种酶的催化效率。一般至少应设置“低pH、最适pH、高pH”三个指标。注意:胃蛋白酶最适pH在1.5左右。,操作时必须先将酶置于不同环境条件下(加蒸馏水、加氢氧化钠、加盐酸),然后再加入反应物(如可溶性淀粉液)。注意:若加入酶后,先加入反应物,再加入盐酸或氢氧化钠,易使反应物在酶的作用下水解,无法证实环境过酸和过碱对酶活性的影响。,如何控制自变量?,用氢氧化钠、盐酸调节不同的pH梯度,实验材料:,过氧化氢酶,探究PH对过氧化氢酶活性的影响,盐酸,蒸馏水,氢氧化钠,2ml,2ml,2ml,过酸、过碱都会使酶失活,无气泡产生,无气泡产生,有大量气泡产生,