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1、3.2 体外受精和早期胚胎培养,授课人:雷刚,1978年7月25日世界首例试管婴儿,1988年3月10日我国首例试管婴儿,1992年我国首例三胞胎试管婴儿,2.试管婴儿和母亲正常怀孕，生产的过程有何异同？相同之处：都通过有性生殖产生，在母体子宫内发育形成胎儿。不同之处：受精作用在体外，并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植。,试管动物技术：通过 使卵子和精子在 下成熟和受精，并通过培养发育成 后，再经移植产生后代的技术。,体外条件,人工操作,早期胚胎,国产奶牛：年均产奶量3000公斤左右国际良种奶牛：年均产奶量10000公斤左右引进一头良种成年奶牛需要3万5万元；牛的生育率低，一头牛一胎只生一只，
2、一生只能生育四五次。牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞却相当的多，其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右；公牛产生的精子数目就更多了。,一、从试管牛说起,如何让引进的良种牛快速地大量繁殖呢？,借腹怀胎,试管动物技术过程：,第一步：体外受精,第二步：胚胎的早期培养,第三步：胚胎移植,1982年世界首例试管牛犊问世,实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是 和 的培养。,体外受精,早期胚胎,主要包括,二、体外受精,卵细胞的采集,精子的获取,受精,1.卵母细胞的采集和培养,对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。实验动物如小鼠、兔，以及家畜猪、羊等卵细胞的采集：最常用的方法是卵巢经过 处理，具
3、体做法是给供体注射，使一头母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子，之后从 中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。,超数排卵,促性腺激素,输卵管,大家畜或大型动物，如牛，卵细胞的采集：从屠宰场已屠宰母畜的 中采集卵母细胞，也可以借助、或 等工具确定卵泡位置，直接从活体动物中吸取泡卵液（连同卵母细胞）取出，在体外进行人工培养，使其成熟。,卵巢,超声波(B超)探测仪,内窥镜,腹腔镜,牛卵巢,B超活采仪,卵母细胞的成熟培养：CO2培养箱,采集的卵母细胞，都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精,培养箱,培养箱,2.精子的收集和获能,假阴道法,手握法,电刺激法,在体外受精前，要对精子进行
4、获能处理。通常采用的体外获能方法有 和 两种。对于、和 的精子，一般采用培养法；对于、等家畜的精子常用化学法。培养法：精子在获能液中获能。化学诱导法：精子一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，用化学药物诱导获能。,培养法,化学诱导法,啮齿动物,家兔,猪,牛,羊,为什么要离心？精液包括精子和精清，精清中含有抑制精子获能的物质，离心可以去除去精清，解除抑制作用,3.受精,3.受精,获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下在 或中完成受精过程。,获能溶液,专用受精溶液,三、胚胎的早期培养,培养液成分：水、无机盐、糖类、维生素、氨基酸、激素、核苷酸、血清等,不同动物胚胎移植时间不同牛、羊：桑椹胚或囊胚阶段小鼠、家兔：卵裂期或囊胚阶段试管婴儿：8个或16个细胞阶段,胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。,如何保存剩余的精子？,
