蛋白质还原糖脂肪的检测.ppt

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1、组成细胞的化合物,无机物,有机物,水,无机盐,糖类,脂质,蛋白质,核酸,脂肪,知识回顾,斐林试剂,苏丹,橘黄色,红色,砖红色沉淀,紫色,苏丹,双缩脲试剂,鉴定物质,试剂,实验现象,还原性糖(苹果匀浆),脂肪(花生),蛋白质(豆浆),淀粉(马铃薯匀浆),碘,蓝色,某些 能够使生物组织中的有关 产生。,预习提问:1、实验原理?,特定的颜色反应,化学试剂,有机化合物,试比较斐林试剂与双缩脲试剂在成分和使用方法上的区别。,甲液:0.1g/ml NaOH乙液:0.05g/ml CuSO4,A液:0.1g/ml NaOHB液:0.01g/ml CuSO4,可溶性还原糖,蛋白质,甲乙两液等量混匀、现配现用,

2、先加A液1毫升,再滴加B液34滴,水浴5065加热,不需加热,摇匀即可,样液变砖红色沉淀,样液变紫色,3、以下植物器官中最好选哪几种做为实验材料?为什么?,没有颜色或颜色较浅;分别富含可溶性还原糖(葡萄糖、麦芽糖、果糖)、淀粉、蛋白质、脂肪。,有色素,会掩盖颜色反应的结果,蔗糖不是还原糖,苹果浆,花生种子,鉴定物质,材料,还原性糖,脂肪,蛋白质,淀粉,请确定具体的检测实验材料,豆浆,马铃薯匀浆,1)实验原理:淀粉+碘液蓝色,一:检测生物组织中的淀粉,2)实验材料:,3)试剂:碘液,4)检测的方法步骤,向试管内注入2mL待测组织样液。,向试管内滴加两滴碘液,摇匀。观察颜色变化。,三:检测生物组织

3、中的还原性糖类,1)实验原理:还原糖+斐林试剂(温水浴)砖红色沉淀,2)实验材料:,3)试剂:斐林试剂甲液:质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液乙液:质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液,4)检测的方法步骤,向试管内注入2mL待测组织样液。向试管内注入1mL斐林试剂(甲乙液等量混合均匀后再注入)。将试管放入盛有5065温水的大烧杯中加热2min。观察试管中出现的颜色变化。,检测梨匀浆的实验现象(浅蓝色 棕色 Cu2O砖红色沉淀),请小组内或小组间交流实验结果并记录,如果有差别,请分析原因?,二:检测生物组织中的蛋白质,3)试剂:双缩脲试剂A液:质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液B液

4、:质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液,1)实验原理:蛋白质+双缩脲试剂紫色,4)检测的方法步骤,向试管内注入2mL待测组织样液。,向试管内注入双缩脲试剂A液1mL,摇匀。,2)实验材料:,向试管内注入双缩脲试剂B液4滴.(边滴边摇),5)实验现象,四:检测生物组织中的脂肪,1)实验原理:脂肪+苏丹橘黄色脂肪+苏丹红色,2)实验材料:,3)试剂:苏丹,4)检测的方法步骤,方法一:向待测组织样液中滴加3滴苏丹染液,观察样液被染色的情况。,请熟悉检测步骤(注:1滴管是1 mL)一、淀粉的检测和观察(注:淀粉易沉淀,使用前请先混匀)第一步:向试管内注入2 mL待测组织样液马铃薯匀浆。第二步:向

5、试管内滴加2滴碘液,观察颜色变化。二、还原糖的检测和观察 第一步:向试管内注入2 mL待测组织样液梨匀浆。第二步:向试管内注入1 ml斐林试剂(甲乙液等量混合均匀后再注入)。第三步:将试管放入盛有5065温水的大烧杯中加热约2 min。第四步:观察试管中出现的颜色变化。三、蛋白质的检测和观察 第一步:向试管内注入2 mL待测组织样液豆浆。第二步:向试管内注入双缩脲试剂A液1 mL,摇匀。第三步:向试管内注入双缩脲试剂B液4滴,边滴边摇。第四步:观察试管中出现的颜色变化。四、脂肪的检测和观察 方法一:第一步:向试管内注入2 mL待测组织样液花生种子匀浆。第二步:向试管中滴加3滴苏丹染液,观察样液

6、被染色的情况。,方法二:制作子叶临时切片,用显微镜观察子叶细胞的着色情况(以花生为例)。(该方法现象明显,但比较难操作,一定要注意实验操作的流程和注意事项,并注意安全)取材 取一粒浸泡过的花生种子,去掉种皮。切片 用刀片在花生子叶的横断面上平行切下若干薄片,放入盛有清水的培养皿中待用。制片 从培养皿中选取最薄的切片,用毛笔蘸取放在载玻片中央;在花生子叶薄片上滴23滴苏丹染液,染色3 min;用吸水纸吸去染液,再滴加上2滴体积分数为50的酒精溶液,洗去浮色;用吸水纸吸去花生子叶周围的酒精,滴一滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片。观察 在低倍显微镜下找到花生子叶的最薄处,移到视野中央,将物像调节清

7、楚;换高倍显微镜观察,视野中被染成橘黄色的脂肪颗粒清晰可见。,四:检测生物组织中的脂肪,5)实验现象,注意事项:1.淀粉使用前需摇匀。2.水浴加热试管底部不能接触烧杯底部(用试管夹),且试管口不能对准人。3.斐林试剂及双缩脲试剂的使用。,以上实验是同学们根据生活常识,选择了富含该化合物的植物组织进行检测。1、该组织中还含有其它化合物吗?请各小组任选一种组织样液探究是否含有另外一种化合物。2、老师从超市购买的某品牌奶制品是否含有以上四种化合物?请同学们设计实验探究。具体分工如下:1、2组探究是否含有蛋白质?3组探究是否含有脂肪?4、5组探究是否含有可溶性还原糖?6、7组探究是否含有淀粉?)将以上

8、两题的实验预测及结果填入课本P18 页的表格中。,拓展提升,请检察并熟悉材料用具 1实验材料:(梨匀浆,马铃薯匀浆,花生种子匀浆,豆浆)4个小烧杯,花生种子。2仪器:双面刀片,试管,试管架,试管夹,大烧杯2个,温度计,载玻片,盖玻片,毛笔,吸水纸,显微镜。3试剂:斐林试剂(甲液:质量浓度为0.1 gmL的Na0H溶液,乙液:质量浓度为0.05 gmL的CuSO4溶液),苏丹染液,双缩脲试剂(A液:质量浓度为0.1 gmL的NaOH溶液,B液:质量浓度为0.0l gmL的CuSO4溶液),体积分数为50%的酒精溶液,碘液,蒸馏水。共7瓶,牛奶,+,+,+,+,+,+,+,+,要点归纳实验步骤:取

9、材分组,对照编号。第一步:取2个试管编号为A、B,向A试管内注入2 mL待测组织样液梨匀浆。向B试管内注入等量(2 mL)的蒸馏水。对不同液体进行相同处理。第二步:向A、B2个试管内分别注入1 ml斐林试剂(甲乙液等量混合均匀后再注入)。给予相同适宜的条件,进行结果(预测)。第三步:将A、B2个试管分别放入盛有5065温水的大烧杯中加热约2 min。观察记录实验现象,并根据结果(现象)进行分 析,得出结论。实验设计应遵循的原则:科学性原则、可行性原则、单一(因子)变量原则、对照原则(空白对照、自身对照、条件对照、相互对照)、等量原则。,检测梨匀浆中可溶性还原糖的实验现象(浅蓝色 棕色 砖红色沉

10、淀),B试管取等量(2ml)蒸馏水作对照,知识结构,2、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同?,还原糖中的醛基(CHO)将Cu(OH)2中的Cu2+还原成Cu+,形成Cu2O砖红色沉淀,在碱性环境下的Cu2+与蛋白质结合成紫色络合物,NaOH浓度为0.1g/mLCuS04浓度为0.05g/mL,NaOH浓度为0.1g/mLCuS04浓度为0.01g/mL,先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合,后立即使用。,先加入Na0H1mL,然后再加CuS044滴,摇匀。(不能过量),水浴加热,不需要,练习:1.某学生用徒手切片法制作花生子叶切片,用苏丹染液染色后,在显微镜下观察。在高倍镜下转动细准焦螺旋,有一

11、部分细胞看得比较清晰,而另一部分细胞比较模糊,其原因最可能是 A细准焦螺旋没有调节好 B子叶切片切得厚薄不均 C子叶切片染色不均匀 D 反光镜未调节好2.把一定浓度的NaOH溶液和CuSO4溶液加入某人的尿液中,微热时,如果观察到红色沉淀,说明该尿液中含有 A乙醇 B葡萄糖 C氨基酸 D蛋白质,3、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国,引起世人注目。鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品,肯定不需要用到的化学试剂是()A.斐林试剂 B.红墨水C.双缩脲试剂 D.苏丹染液,B,拓展提高:学案P17,已知鸡蛋的蛋清主要成分是蛋白质,在碱性环境中,蛋白质与Cu2+反应产生紫色物质,即蛋白质的双缩脲反应。在此基础上,利

12、用一定的实验材料和器具设计实验证明唾液淀粉酶是蛋白质。以下是此完整实验的一部分,请完善并回答下列问题。实验步骤:第一步:制备蛋清液。取生鸡蛋一个,打破蛋壳(不能破坏蛋黄),取少许蛋清注入烧杯中,加入30mL清水,用玻璃棒搅拌均匀备用。第二步:取两只规格相同的试管编号为1、2,分别注入一定量的实验液体。(如图)第三步:向2支试管中各加入5滴NaOH溶液并振荡,再向2支试管中各加入23滴CuSO4溶液,振荡。问题:(1)第二步2号试管中加入的“某溶液”是,加入的量是,它体现了实验设计应遵循 原则。(2)预测实验结果:。(3)实验结论:。,蛋清液,2mL,等量、对照,1、2号试管都呈现紫色反应,唾液中主要成分是唾液淀粉酶,所以唾液淀粉酶是 蛋白质,谢谢!,

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