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1、实验目的,掌握大鼠急性心律失常模型的建立方法。了解急性心肌缺血再灌注损伤时心电图改变、心律失常发生的类型和次数。通过对受试药物的观察，了解药物抗心律失常效果，借此达到筛选抗心律失常药物的目的。,心律失常模型建立方法,急性心肌缺血结扎左冠状动脉前降支,外科手术,药物（氯仿、氯化钙、乌头碱）,电刺激,实验器械,手术器械一套气管插管小动物呼吸机PowerLab生物机能实验系统,潮气量812ml 呼吸比为1：2 呼吸频率7080次/分 呼吸压力1.52.5kPa,呼吸机参数设定：,大鼠正常心率：320450次/分,PowerLab实验系统记录导联心电图,麻醉后插管后缺血0时刻缺血30min再灌5min
2、再灌30min心律失常,记录特殊时间点,设置 通道设置 3通道,20%氨基甲酸乙酯溶液（乌拉坦）受试药物（利多卡因）,实验药品,实验动物,Wistar大鼠，体重250300g，雌雄均可,实验步骤,麻醉、固定、备皮记录导联心电图 气管插管，调节小动物呼吸机（不连接）开胸和心包切开术 复制心肌缺血再灌注损伤模型药物治疗需观察的指标：心电图,实验步骤,1.麻醉、固定、备皮,20%氨基甲酸乙酯溶液,0.6ml/100g,IP,棕色导线-右上肢 绿色导线-右下肢 红色导线-左下肢,2.连接导联心电极,大鼠正常心率：320450次/分,3.,气管插管,在气管上剪一倒T形小口插入气管插管并结扎固定，吸取气管
3、插管内的分泌物保持气管通畅。,4.开胸和心包切开术,在剑突上方沿体轴正中向颈部剪2cm左右开口，将皮肤与左胸部肌肉分开，沿胸肌走行方向用止血钳钝性分离使胸肌下方的肋骨暴露。,4.开胸和心包切开术,在第45肋间打开胸腔，将气管插管与呼吸机相连，观察大鼠胸部起伏幅度，保证呼吸压力为1.52.5kPa。,4.开胸和心包切开术,用开胸器牵拉肋骨，注意不要损伤肺部，以免大量出血，暴露心脏，破坏心包膜。,5.复制心肌缺血再灌注损伤模型及药物治疗,轻按大鼠腹部，将心脏挤出胸腔，在肺动脉干与左心耳之间寻找左冠状动脉前降支主干。,大鼠左冠状动脉 前降支从主动脉 发出后走行于肺 动脉段和左心耳 间，以后沿室间 沟
4、下行但是在心 脏表面无法直接 见到血管，应该 以左心耳和肺动 脉段下缘为参照。,平左心耳下缘结扎左冠状动脉前降支，结扎动作要轻柔迅速。,5.复制心肌缺血再灌注损伤模型及药物治疗,尽量减少对心脏的损伤，控制在1min内完成。结扎后将心脏放回胸腔。缺血30min，再灌30min。药物治疗,5.复制心肌缺血再灌注损伤模型及药物治疗,结扎/再灌注成功的标志,1.肉眼直视观察：结扎打结瞬间，LAD远端供血心肌先变紫绀，而后稍显苍白；松解结扎线，缺血心肌变得较前红润；2.心电图：结扎后出现显著的ST 段抬高，不是所有的ST 抬高均有意义，心电图的改变很准确,但一定要出现J点抬高。3.染色证实：TTC 染色法，可清晰地分辨出正常组织（红色）和梗死区（白色）。4.血清酶学的测量,梗死的地方其实肉眼大致能看出，和其他地方相比发白,6.心电图的观察与记录,心律失常的类型心律失常发生的次数和持续时间,J 点（J 点为QRS 波群的终了与ST 段交接处）,心电图图谱,正常心电图,窦性心动过缓,窦性心动过速,二联律,三联律,【结果】,【讨论】【注意事项】,
