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1、,考核方法,1、考勤（10%）2、课前预习（10%）3、课堂表现：规范操作+随堂抽查（50%）4、实验报告：书写工整、画图及文字说明清楚、分析准确（30%）,实验一、四大基本组织的观察,目的要求,联系功能观察了解四种基本组织的结构特点及分布。学习体腔膜或肠系膜平铺片的制作方法。学习疏松结缔组织新鲜平铺片的制作方法及活体染色方法。,材料与器械,蛙，小鼠，解剖器械一套（手术剪、解剖针、眼科镊），注射器及针头，滴管，盖玻片，显微镜;1%硝酸银水溶液，1%台盼蓝生理盐水溶液，甘油，蒸馏水，组织切片,手术剪：弯、直、眼科剪,手术剪 主要用于剪皮肤或肌肉等粗软组织。此外，也可用来分离组织，即利用剪刀的尖端
2、，插入组织间隙，分离无大血管的结缔组织等。手术剪分尖头剪和钝头剪。其尖端还有直、弯之别。生理学实验中常习惯于用弯型手术剪剪毛。另外，还有一种小型手术剪，称眼科剪，主要用于剪血管或神经等柔软组织。眼科剪也有直头与弯头之分。正确的执剪姿势即用拇指与环指(即无名指)持剪，示指(即食指)置于手术剪的上方。,镊子：圆头、眼科镊,手术镊主要用于夹持或牵拉切口处的皮肤或肌肉组织。眼科镊用于夹持细软组织。手术镊有圆头、尖头两种，又有直头和弯头、有齿和无齿之别，而且长短不一，大小不等，可根据手术需要选用。通常，有齿镊主要用于夹持较坚韧或较厚的组织，如皮肤、筋膜、肌腱等；无齿镊主要用于夹持较细软的组织，如血管、黏
3、膜等；正确的执镊姿势类似于执笔式，较为灵活方便。,止血钳：有齿、无齿,止血钳 主要作用是分离组织和止血，不同类型的止血钳又有不同的用途。执止血钳的姿势均与执剪刀的姿势相同。常用止血钳有以下3种：(1)直止血钳 分长短两种类型，又有有齿和无齿之别。无齿止血钳主要用以夹住浅层出血点，以便止血，也可用于浅部的组织分离。有齿止血钳主要用于强韧组织的止血，提起皮肤等。(2)弯止血钳 与直型的大同小异，也分长短两种，主要用于深部组织或内脏出血点的止血。(3)蚊式止血钳(蚊嘴钳)此种止血钳头端细小，又称小止血钳，适用于细嫩组织的止血和分离，不宜钳夹大块或坚硬组织。,动物的抓取与固定方法,目的：限制动物的活动
4、，持安静状态 以便正确操作和记录要求：不损伤实验动物 不影响观察指标 实验者不被动物咬伤 保证实验顺利进行小心细致、大胆敏捷，切忌粗暴。,小鼠的抓取,小鼠的抓取保定：器材：小鼠饲养盒+盒盖1套。方法步骤：1、用右手拇指和食指捏 住小鼠尾巴中部将小鼠提 起，放在饲养盒盖上。2、用左手拇指和食指迅速、准确地捏住小鼠的两耳后、颈背部的皮肤，将小鼠提起。,3、翻转左手掌，以左手掌心和中指夹小鼠背部的皮肤，使小鼠整个呈一条直线。4、用左手无名指压住小鼠背部的皮肤，小指压住小鼠的尾巴根部。5、松开捏住小鼠尾巴的右手拇指和食指。,皮下注射,蛙类的抓取,实验步骤,上皮组织,构成：大量形态较规则、排列紧密的细胞
5、特点：无血管、有极性（游离面、基底面和侧面）、有基膜分类：被覆上皮分布于体表，体内管、腔、囊的内表面*腺上皮构成腺体功能：保护、吸收、分泌、排泄,上皮组织,被覆上皮：排列成膜状、被覆在身体和某些器官的外表面，或衬附于体内各管、腔、囊的内表面。被覆上皮的种类如下：,单层扁平上皮表面观：细胞呈多边形，胞核扁圆形，位于细胞中央垂直观：细胞扁平，中央有核处较厚，其余部分胞质很薄,单层扁平上皮 3.540 蟾蜍肠系膜涂片 镀银染色,上皮组织,分布：内皮心血管、淋巴管内表面间皮心包膜、胸膜、腹膜其它肺泡、肾小囊,蛙体腔膜或肠系膜平铺片的制作和观察：将蛙双毁髓处死，取体腔膜或肠系膜放于载玻片上，以解剖针 将
6、其挑开展平，稍晾干；加1%硝酸银水溶液数滴于标本上，将标本浸盖；立即放在日光下晒35min（或在日光灯下1015min）；至标本变为浅褐色时，倾去载玻片上的溶液，用蒸馏水洗净，加上12滴甘油，盖上盖玻片，即可用于显微镜观察。,上皮组织,单层立方上皮,取甲状腺切片（HE染色）观察：表面观：细胞呈六角形垂直观：细胞立方形，核圆居于细胞中央,上皮组织,分布:肾小管甲状腺,单层柱状上皮,上皮组织,取小肠上皮切片观察：表面观：细胞呈六角形垂直观：细胞呈柱状，核长圆形，靠近基底部,分布：胃、肠、胆囊、子宫等,假复层纤毛柱状上皮,由柱状细胞、梭形细胞、锥体形细胞和杯状细胞构成 游离面常见有纤毛 基细胞 一种
7、腺细胞,假复层纤毛柱状上皮 人气管 H-E染色 3.540 纤毛 杯状细胞 基膜,上皮组织,分布：呼吸道,复层扁平上皮,复层扁平上皮(stratified squamous epithelium)由基底面向游离面依次是：基底细胞 多边形细胞 扁平细胞 分布：皮肤的表皮 口腔、食管、阴道,复层扁平上皮 H-E染色3.540 A 未角化型 人食管 表皮细胞B 角化型 人手指表皮 真皮乳头,上皮组织,复层扁平上皮,上皮组织,浅层细胞扁平 中部细胞多边形基底层细胞立方或矮柱状,变移上皮,取膀胱切片（HE染色）观察：特点：上皮的层次和细胞形态随所在器官的收缩或舒张而改变由基底面向游离面依次是：基底细胞
8、中间层细胞 表面细胞（盖细胞）,上皮组织,分布：膀胱、输尿管等,结缔组织,疏松结缔组织1、疏松结缔组织活体染色标本的制作与观察：取小鼠一只，皮下注射1%台盼蓝生理盐水溶液少许，3060min后，颈椎脱臼法处死；剪开皮肤，在注射处附近剪取一小块皮下结缔组织，置于载玻片上；双手各持一解剖针将组织平铺于载玻片上；待标本稍干后，加12滴甘油，盖上盖玻片即可观察。,结缔组织,疏松结缔组织切片的观察：,结缔组织,致密结缔组织,取跟踺纵切片（HE染色）观察：,结缔组织,特点:细胞和基质相对较少,纤维成分较多分类：1.规则致密结缔组织：大量密集平行排列的粗大胶原纤维，其间有成行排列的成纤维（腱）细胞；主要构成
9、肌腱、腱膜2.不规则致密结缔组织：粗大胶原纤维纵横交错，形成致密板层结构，其间有成纤维细胞，小血管和神经等。构成真皮、脑硬膜、器官的被膜等处；3、弹性组织：粗大的弹性纤维或平行排列，或编织成膜状，其间有胶原纤维和成纤维细胞分布；构成韧带、声带、大动脉弹性膜等。,脂肪组织,取小肠切片（HE染色）观察：特点：HE染色标本中，脂滴被溶解，细胞呈空泡状，胞 核和胞质被挤向细胞的一侧（宝石戒指状）,骨组织,取骨横磨片观察：特点：由于骨组织内的软组织（神经、血管、淋巴管、结缔组织）及细胞都已腐烂，仅剩下空腔和管道。长骨骨干部的横断面，在低镜下可见34层外环骨板、12层内环骨板、内外环骨板之间的骨单位和间骨
10、板。骨单位是由中央管和其周围呈同心圆排列的多层骨板构成。高倍镜下观察可见骨板内或骨板间的卵圆形骨陷窝及骨陷窝向四周发出的骨小管。,血液,采血、涂片、染色制作血液涂片：取末捎血一滴置于玻片的一端，左手持载玻片，右手以边缘平滑的推片的一端从血滴前方后移接触血滴，使推片与载片夹角保持3040度平稳地向前移动，载片上保留下一薄层血膜。手持玻片在空气中挥动，使血膜迅速干燥，以免血细胞皱缩。加瑞氏染液23滴，覆盖整个血膜，固定0.51.0min，滴加等量或稍多的新鲜蒸馏水，与染料混匀染色510min。用清水冲去染液，待干燥后即可置于显微镜下进行观察。,镜下观察血涂片。低倍镜下分辨白细胞和红细胞，高倍镜观察
11、、辨别各种血细胞和血小板。,人血液涂片 Wright染色 3.31001、红细胞质 2、中性粒细胞（杆状核）3、中性粒细胞（分叶核）4、嗜酸性粒细胞 5、嗜碱性粒细胞 6、单核细胞 7、淋巴细胞,肌组织,组成：,肌组织,肌细胞（肌纤维）结缔组织,分类：,肌组织,横纹肌平滑肌,骨骼肌 心肌,不随意肌,随意肌,肌组织,骨骼肌取骨骼肌纵、横切片（HE染色）观察：观察肌纤维的形态、胞核的形状，纵切片上还可见明显的横纹，比较纵切和横切面上的细胞核的位置和结构差异。,骨骼肌纤维光镜图,心肌,取心室肌纵、横切片（HE染色）观察：镜下可见纵切片上，心肌纤维彼此分支吻合成网状，卵圆形胞核位于中央。缩小显微镜虹彩
12、光圈可见心肌纤维的横纹，但不如骨骼肌纤维明显。在肌纤维及其分支上可见深蓝色的梯形闰盘。横切片上，心肌纤维为不规则的圆形，有或无胞核，注意细胞核的形态和位置。,人心肌纤维纵切片HE 染色3.340 闰盘 脂褐素,分布：心脏，收缩具自动节律性，无肌卫星细胞,心肌,心肌光镜结构模式图,平滑肌,取小肠纵、横切片（HE染色）观察：观察平滑肌纤维的形态、胞核的形状，比较纵切和横切面上的结构差异。,平滑肌纵横切片HE染色 3.340,分布：广泛分布于中空性器官管壁内 形态：长梭形，大小和形状因所在部位和器官的功能状态而异；无横纹，胞质嗜酸性；单核，棒状或椭圆形,三种肌纤维光镜比较,三种肌纤维电镜比较,神经组织,取神经细胞分离装片（Cajal银染色）观察：观察神经细胞的胞体、胞核、突起的形态。,神经细胞分离装片 Cajal银染色 3.340,实验报告,四种基本组织标本的制备、观察与绘图（高倍镜40物镜），要求标注出重点结构，并作简要的文字说明。,
