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1、主要内容,如何解读微生物检验报告,致 谢,正确的采集与运送检验标本是临床标本检验成功的关键。标本质量的好坏直接影响诊断结果的正误，不当的标本可导致假阴性、假阳性结果的出现。这就需要我们临床医护人员的密切配合。,、标本采集、运送规范化的意义,标本送检率低。一些临床医师在经验性治疗受挫后才送检标本，失去了阳性培养的最佳机会。医护人员对于微生物标本采集、运送的要求和注意事项不甚了解。微生物实验室与临床的交流沟通不够。,、目前存在的问题,发现感染应及时采集标本作检查；最好是病程早期、急性期或症状 典型期；尽可能在使用抗菌药物之前或停药 一周后采集标本,、标本采集与运送的基本原则,采样时严格执行无菌操作
2、；采集的标本均应盛于密闭无菌容器；标本采集后应立即送检，最好2 h内；每份标本都应具有唯一标识。,、标本采集与运送的基本原则,、临床上各类微生物标本的采集与运送方法,下呼吸道标本:自然咳痰 诱导痰 气管内吸取物 肺部组织 支气管肺泡灌洗液 保护性毛刷 支气管灌洗液,一、下呼吸道标本,采集方法:自然咳痰 以晨痰为佳。用清水反复漱口，用力咳出呼吸道深部的痰，痰液直接吐入无菌、清洁、干燥、不渗漏、不吸水的广口带盖的容器中，尽快送检。注意：在抗生素应用前采集 在临床医师或护士直视下采集标本 疑似分枝杆菌感染者，应连续收集 3天晨痰送检,一、下呼吸道标本,小儿取痰法 用弯压舌板向后压舌，用棉拭子深入咽
3、部，小儿经压舌刺激咳嗽时，可喷出肺部和气管分 泌物，粘在棉拭子上送检。支气管镜采集法 用纤维支气管镜可直接在病灶部位 采集高浓度的感染病原菌，但必须注意在操作中尽 可能避免咽喉部正常菌群的污染。,一、下呼吸道标本,胃内采痰法 无自觉症状的肺结核病人，尤其婴幼儿 不会咳嗽，可采集胃内容物做结核分枝杆菌培养。该方法于清晨空腹时，将胃管插入胃内，用注射器 抽取胃液。吸痰管取痰法 对咳嗽乏力或昏迷患者，用吸痰管 经鼻腔或口抵达气管腔内吸引痰液。,一、下呼吸道标本,重症、难治、或伴免疫抑制、或疑似厌氧菌引起的 肺部感染可采用环甲膜穿刺经气管吸引（TTA）、经胸壁穿刺肺吸引（LA）、经纤维支气管镜或人工
4、气道作防污染双套管毛刷（PS）或防污染支气管肺 泡灌洗（PBAL）采集无口咽部菌群污染的痰液，进行精确的感染病原学诊断。,一、下呼吸道标本,注意事项:痰标本不能及时送检者，可暂存4 冰箱；痰标本的检验必须区分是病原菌还是来自上呼吸 道的正常菌群。不主张对咳痰标本进行厌氧菌培养；做结核分枝杆菌检查，痰量要多或留取24 h痰液，婴儿肺结核要用胃管取痰；约有1/41/2肺部感染患者可能发生菌血症，应同时做血培养。,一、下呼吸道标本,主要病原菌:肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、克雷伯菌属、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、不动杆菌属 非病原菌:草绿色链球菌、凝固酶阴性的葡萄球菌,一、下呼吸道标本,采集方法：开放
5、性感染和已溃破的化脓灶 标本采集前 先用灭菌生理盐水拭去表面渗出物，尽可能 用抽吸或将拭子深入伤口，紧贴伤口前沿取 样，从脓肿底部或脓肿壁取样，效果最好。,二、化脓和创伤标本,封闭性脓肿 局部消毒后用针及注射器抽吸脓 肿壁，将所有物质置于无菌试管内送检，疑为 厌氧菌感染时立即作床边接种或置于厌氧转运 装置送检。大面积创伤感染 可取感染组织块或沾有脓汁 的内层敷料送检。,二、化脓和创伤标本,为什么脓性标本常常培养不出细菌？脓标本细菌培养没有细菌生长，首先要明确标本里是有细菌而培养不出细菌，还是标本里本身没有细菌而培养不出细菌？结合标本直接涂片染色镜检可以解决标本中有无细菌的问题。深部脓液内本来是
6、厌氧菌生长，用常规有氧条件培养，细菌不会生长。,二、化脓和创伤标本,为什么脓性标本常常培养不出细菌？标本中可能存在苛养菌或慢生长菌，但受接种的培养基、培养环境和培养时间等因素的影响，可能导致脓标本培养不出细菌。患者体内残余抗生素抑制了细菌的生长。如果标本的采集、保存和运送方法不当，也可能导致细菌无法培养出来。,二、化脓和创伤标本,主要病原菌：金黄色葡萄球菌、化脓链球菌、其他溶血链球菌、铜绿假单胞菌、其他革兰氏阴性杆菌 非病原菌：凝固酶阴性的葡萄球菌、少量的棒状革兰氏阳性杆菌,二、化脓和创伤标本,采血指征：一般患者出现以下一种体征时可作为采血的重要指征：发热（38），寒战，白细胞增多，皮肤黏膜出
7、 血、昏迷、多器官衰竭，血压降低，CRP升高及呼 吸加快，血液病患者出现粒细胞减少，血小板减少 等，或同时具备上述几种体征时而临床可疑菌血症。新生儿可疑菌血症，应该同时做尿液和脑脊液培养。对入院危重感染患者应在未进行抗菌药物治疗之前，及时做血培养。,三、血液培养标本,采血时机：尽量在使用抗菌药物之前进行，在24 h内采集23次 做血培养，但24 h内一般不超过3次。入院前两周内接受抗菌药物治疗的患者，连续3 d，每天采集2份。对间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来之前 0.51 h采集血液，或于寒战或发烧后1 h进行。,三、血液培养标本,采血量:对于成人患者推荐的采血量每瓶不少于5 mL，婴
8、幼 儿患者每瓶不少于2 mL。每位成年患者需采取2 3套（一瓶需氧瓶和一瓶 厌氧瓶为一套）。婴幼儿则只采集一瓶需氧瓶培养。采血培养后的2 5 d内，不需要重复采血，因为 治疗后的2 5 d内血液中的病原菌不会马上消失。,三、血液培养标本,皮肤消毒程序：75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30 s；2%碘酊作用30 s，从穿刺点向外画 圈消毒，至消毒区域直径达3 cm；75%酒精脱碘；对碘过敏的患者，用 75%酒精消毒60 s，待酒精挥发干燥 后采血。,三、血液培养标本,注意：不应从留置导管内取血，因为导管易被正常菌群污染。,培养瓶消毒程序：用75%酒精消毒血培养瓶橡皮 塞，作用60 s。用无菌棉签清除
9、橡皮塞表面剩 余的酒精，然后注入血液。,三、血液培养标本,注意：血标本接种到培养瓶后，轻轻颠倒混匀,以防血液凝固。立即送检，切勿冷藏。,主要病原菌:沙门菌、布氏杆菌、其他革兰氏阴性杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、嗜血杆菌 非病原菌（除1次检出）:芽孢杆菌属、凝固酶阴性的葡萄球菌、草绿色链球菌、棒状革兰氏阳性杆菌,三、血液培养标本,采集指征：有典型的尿路感染症状 肉眼血尿或脓尿 尿常规检查表现为WBC增高或亚硝酸盐阳性 不明显的发热，无其他局部症状 留置导尿管病人出现发热 膀胱排空功能受损 泌尿系统疾病手术前 抗生素停药后，感染症状再次出现,四、尿液标本,采集时间：未使用抗生素前 取晨起第一次
10、尿液送检或尿液在膀胱 内应停留68 h以上 在临床症状明显时收集,四、尿液标本,采集方法：清洁中段尿 膀胱穿刺 肾盂尿 导尿注意：用导尿管采集标本时，应消毒导尿管外部，按无菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸取尿液，操作时应防止混入消毒液，绝对不能从收集袋中采集尿液。,四、尿液标本,运送和保存：用无菌容器盛标本；标本应立即送检，2 h内接种；若不能立即接种可将标本置于4 的冰 箱内保存，但不得超过8 h；尿液中不得加入防腐剂或消毒剂。,四、尿液标本,主要病原菌：大肠埃希菌、变形杆菌、克雷伯菌、其他革兰氏阴性杆菌、肠球菌、腐生葡萄球菌、金黄色葡萄球菌,四、尿液标本,采集时间：腹泻患者应在急性期，并尽可
11、能在使用抗 生素之前采集新鲜粪便；伤寒患者在发病2周以后。,五、粪便标本,采集方法：自然排便采集法 自然排便后，挑取有脓血或黏液部位的粪便23 g，液状粪便取絮状物盛于无菌的容器内送检。,五、粪便标本,直肠拭子采集法 对不易获得粪便或排便困 难的患者及婴幼儿，可采用直肠拭子法采 集标本，其方法是将拭子前端用甘油湿 润，然后插入肛门约45 cm（幼儿约23 cm）处，轻轻在直肠内旋转，擦取直肠表 面粘液后取出，盛入无菌试管中送检。,五、粪便标本,主要病原菌：沙门菌、志贺菌、弯曲杆菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌、产毒素性大肠埃希菌、艰难梭菌,五、粪便标本,采集指征：男性泌尿系统表现：尿频、尿急、尿痛尿道
12、分泌物增多会阴部疼痛及阴囊疼痛性功能障碍泌尿生殖器畸形和缺损,六、生殖道标本,女性泌尿系统表现：分泌物增多及性状异常尿道口搔痒下腹疼痛月经失调阴道出血,采集方法：阴道、子宫颈及前列腺等分泌物应由临床 医师采集，严格遵循无菌操作规程，收集 于无菌试管内送检。,六、生殖道标本,淋病奈瑟菌检查时，取材的深度一定要够，因为淋球菌好发于柱状上皮细胞而不是复层 鳞状上皮细胞。不论男女尿道及子宫颈均需 用拭子插入尿道及子宫颈3 cm深转动并停留 1030 s取样送检。,六、生殖道标本,主要病原菌：淋病奈瑟菌、滴虫、念珠菌、孕妇携带的B群溶血链球菌,六、生殖道标本,采集方法：脑脊液 用腰穿方法采集脑脊液35
13、mL，一般放入3个无菌试管，每个试管内12 mL。如用于检测细菌或病毒，脑脊液量应 1 mL；如果用于检测真菌或抗酸杆菌，脑脊液量应2 mL。,七、穿刺液标本,胆汁及其它穿刺液（胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液等）首先用2%碘酊消毒皮 肤，用针穿刺法抽取标本，然后放入无菌试 管内，立即送检。尽可能采集多的液体，至少1 mL。,七、穿刺液标本,采集方法：经由导管抽取20 mL血液，进行血液培养；导管周围的皮肤经75%乙醇消毒，然后以无 菌剪刀取下约5 cm长度，置于无菌容器送检；再由静脉端抽血进行另外一套血液培养。,八、导管等标本,主要病原菌：凝固酶阴性的葡萄球菌（主要是表葡）是最常见的导致导
14、管相关性感染的细菌；其次是革兰氏阴性的肠杆菌科及真菌；较少见的还有假单胞菌属。,八、导管等标本,九、培养所需的无菌容器,九、培养所需的无菌容器,成人需氧瓶,成人厌氧瓶,儿童专用瓶,、如何解读微生物检验报告,有无细菌生长？结合病史和患者症状、体征判断是感染 部位的正常菌群还是所致感染的病原菌？药敏结果中有无耐药菌株的提示？,一、拿到报告，我们应想到什么？,正常菌群：在人的体表及与外界相通的口腔、鼻咽部、肠道、泌尿生殖道等腔道中寄居着细菌，在正常情况下对宿主无害而有益，统称为正常菌群。,二、人体正常菌群和病原菌,人体各部位的正常菌群,二、人体正常菌群和病原菌,注意：临床上常将病原菌和致病菌的称谓混
15、用，但前者包含的范围显然较后者更广。,致病菌：常见致病菌包括：结核杆菌、伤寒和副伤寒杆菌、霍乱弧菌、炭疽杆菌、淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、白喉杆菌、百日咳杆菌。,二、人体正常菌群和病原菌,条件致病菌：毒力弱或无明显毒力；常为耐药菌或多重耐药菌；长期应用抗菌药物的患者;机体免疫功能下降的患者。,二、人体正常菌群和病原菌,条件致病菌在临床上的三种身份：病原菌：患者由这类细菌引起感染，应用报告提示 的抗菌药物治疗，疗效明显。定植菌：以下现象提示报告的细菌为定植菌：应用报告提示的抗菌药物治疗，该菌消失，感染 症状依然存在。由于该菌泛耐药，临床凭经验联 合用药，感染症状好转，但该菌依然存在。污染菌：留取标
16、本过程中，污染了非感染部位的细 菌。按其治疗无效，多次送检可排除。,二、人体正常菌群和病原菌,阴性结果的解读：非感染性疾病；感染已治愈；感染未治愈，但由各种原因导致病原菌未检出（采样运送不当、抗生素的影响、苛养菌、检验技术受限）。,三、鉴定结果的解读,阳性结果的解读（三种情况）：患者有典型的感染症状，按鉴定结果选用的 抗菌药 物疗效明显，那么该报告的细菌很 有可能为病原菌；患者有典型的感染症状，按鉴定结果选用的 抗菌药物治疗无效，改为凭经验联合用药，那么该报告的细菌很有可能为定植菌或污染 菌；,三、鉴定结果的解读,阳性结果的解读（三种情况）：患者的感染已基本治愈，做鉴定的目的是希 望得到一张阴
17、性报告作为停止治疗、出院的 凭证，但结果却是阳性，那么该报告的细 菌很有可能为定植菌或污染菌。,三、鉴定结果的解读,药敏试验：测定抗菌药物在体外对病 原菌有无抑菌或杀菌作用的方法。最低抑菌浓度（MIC）：测量抗菌药 物的抗菌活性大小。,四、药敏报告的解读,多重耐药菌（MDR）：对临床上使用 的3种或3种以上抗菌药物耐药的细菌。泛耐药菌（PDR）：对除多黏菌素、舒巴坦可能敏感外的所有临床上可获 得的抗菌药物均耐药的细菌。,四、药敏报告的解读,天然耐药：内在的或先天的（非获得）对抗菌药物耐药，反映一个种所有野生型菌株的抗菌谱。天然耐药菌株常规不需要进行药敏试验。,四、药敏报告的解读,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）耐万古霉素肠球菌（VRE）产超广谱-内酰胺酶（ESBLs）的细菌青霉素不敏感的肺炎链球菌（PRSP）多重耐药的不动杆菌、铜绿假单胞菌,五、目前需要关注的细菌,谢谢您的聆听！,
