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1、高频考点突破考点一 动物细胞培养技术1.动物细胞培养的操作流程2.考点解读(1)培养条件 无菌、无毒的环境无菌处理、加抗生素杀 菌、定期更换培养液。,营养葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机 盐和微量元素+血清或血浆等天然成分。温度和pH(36.50.5)和(7.27.4)。气体环境95%空气+5%CO2。提醒 CO2作用调节培养基pH;空气中O2作用细胞有氧呼吸;所用装置CO2培养箱。(2)原理：细胞增殖。(3)动物细胞培养时,一般选取幼龄动物的组织、器官,其细胞的分化程序较低,增殖能力强,有丝分 裂旺盛,容易培养。,(4)在动物细胞培养过程中,一般情况下10代以前 的细胞核型不变,10代以后有
2、些细胞核型发生改 变,50代以后的细胞可能发生癌变。(5)胰蛋白酶在动物细胞培养过程中的作用包括将 组织分散成单个细胞,以及将贴壁细胞从瓶壁上分 离下来,这样做的目的是避免动物细胞的接触抑制 现象。,3.应用(1)生产细胞产品：干扰素、疫苗、单克隆抗体。(2)检测并判断某毒性物质毒性的大小。(3)临床医学研究。拓展提升 动物细胞培养与植物组织培养的比较,对位训练1.关于动物细胞培养的有关叙述，正确的是()A.细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡 过程中 B.动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等 C.动物细胞培养的目的只是获得大量的细胞分泌 蛋白 D.动物细胞培
3、养前和培养过程中都要用胰蛋白酶 处理,D,2.回答下列有关动物细胞培养的问题：（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长 到细胞表面 时，细胞会停止分裂增殖，这 种现象称为细胞的。此时，瓶壁上形成的 细胞层数是。要使贴壁的细胞从瓶 壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是_。（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂 停止，进而出现 的现象；但极少数细 胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生 改变而变成 细胞，该种细胞的黏着性降低,细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量。,相互接触,接触抑制,单层（或一层）,胰蛋白,酶,衰老甚至死亡,不死性,减少,（3）现用某种大分子染料，对细胞进行染色时
4、，观 察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是。（4）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到 期的细胞用显微镜进行观察。,由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）,中,（5）在细胞培养过程中，通常在_ 条件下保存细胞。因为在这种条件下，细 胞中 的活性降低，细胞 的速率降低。（6）给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发 生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当 作 进行攻击。,冷冻（或超低温、,液氮）,酶,新陈代谢,抗原,考点二 动物体细胞核移植技术与克隆动物1.动
5、物体细胞核移植技术操作流程2.考点解读(1)原理：动物细胞核的全能性(不能说动物细胞全能性)。(2)卵母细胞选择时期及原因减中期的卵母细胞,此时具备受精能力,细胞质中合成与分裂分化有关的物质能刺激融合后重组细胞进行分裂分化,形成重组胚胎。,(3)选卵细胞做受体细胞原因 大,易于操作；卵黄多,营养丰富,为发育提供 充足的营养；激发重组细胞分裂分化。(4)供体细胞：取供体动物的体细胞培养,一般选 用传代10代以内的细胞,因为10代以内的细胞一般 能保持正常的二倍体核型,保证了供体细胞正常的 遗传基础。(5)动物体细胞不能经培养直接发育成完整个体,原因是动物体细胞的全能性受到限制。用体细胞 核移植技
6、术能够得到克隆动物,说明动物体细胞的 细胞核具有全能性。,(6)该过程用到的技术手段：动物细胞培养、动物 细胞融合、早期胚胎培养和胚胎移植。(7)核移植产生的克隆动物与提供细胞核的亲本不 同原因：克隆动物细胞质基因来源于另一个亲本。所以 与植物组织培养不同(只来自于一个亲本),克隆动 物遗传物质来自2个亲本。在发育过程中可能发生基因突变,染色体变异导 致性状改变。外界环境条件的影响引起不可遗传的变异。,3.应用及存在问题(1)应用：加速家畜遗传改良进程、促进优良畜群 繁育、保护濒危物种、克隆器官用于移植等。(2)存在问题 成活率低 克隆动物的健康问题 克隆动物食品的安全性问题。,对位训练4.下
7、列哪项不属于体细胞核移植技术的应用（）A.加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育 B.保护濒危物种 C.获得组织器官异体移植的供体 D.大量产生紫杉醇,D,5.下列有关体细胞核移植技术的说法，不正确的是（）A.体细胞核移植技术在多种动物中获得了成功，成功率非常高 B.克隆技术的各个环节有待于进一步改进 C.大多数克隆动物还存在一些遗传和生理缺陷类 的健康问题 D.克隆动物食品的安全性问题仍然存在争议,A,2.2.2 动物细胞融合与 单克隆抗体,一、动物细胞融合二、单克隆抗体,考点三 动物细胞融合与单克隆抗体1.单克隆抗体的操作流程,2.考点解读(1)诱导融合的2种细胞名称及作用 免疫过的B淋巴
8、细胞(浆细胞)产生抗体;骨髓瘤细胞无限增殖。(2)诱导融合与原生质融合的不同方法 动物细胞诱导融合的特有方法灭活病毒诱导。(3)2次筛选的目的及方法 在特定的选择性培养基上,未融合的亲本细胞(浆细胞和骨髓瘤细胞)和融合的具有同种核的细 胞(BB融合细胞、瘤瘤融合细胞)都会死亡,只有融,合的杂种细胞(杂交瘤细胞)才能生长。这种杂种 细胞的特点是既能迅速大量繁殖,又能产生单一的 特异性抗体。经选择性培养的杂交瘤细胞并非都是能分泌所 需抗体的细胞(很多种杂交瘤细胞),需经克隆化培 养和抗体检测,经多次筛选后就可获得足够数量的 能分泌所需抗体的细胞。(4)2个培养提取场所 体外培养培养液提取。体内小鼠
9、腹腔中培养小鼠腹水中提取。,提醒 取相应B细胞前必需先注射相应抗原,形 象地说先“打针”,否则失败。(5)原理：细胞膜的流动性和细胞增殖。拓展提升 植物体细胞杂交和单克隆抗体的制备的比较,对位训练3.利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗 原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（）A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产 生的血清抗体为单克隆抗体 B.体外培养单个B淋巴细胞可以获得大量针对SARS 病毒的单克隆抗体 C.将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱 导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D.利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异 性结合的方法可诊断出病毒感染者,D,
10、解题思路探究思维误区警示易错分析对克隆与组织培养、试管动物(婴儿)区分不清,纠正训练 试管婴儿、试管苗和克隆羊这三者可以说是现代 生物科技的杰出成果,下列对其生物学原理及技术 的叙述,正确的是()A.都属于无性生殖 B.都利用了细胞工程的某些技术 C.都不会发生基因重组 D.都体现了已分化的细胞具有全能性,B,解析 试管婴儿的原理为有性生殖,但该过程需要 动物细胞培养和胚胎移植等技术;试管苗是植物组 织培养的结果,体现了细胞的全能性;克隆羊利用 了核移植技术,体现了动物细胞核的全能性。在三 项成果中,试管婴儿培育的第一步是体外授精,而 参与受精的精子和卵细胞在经减数分裂形成的过 程中会发生基因重组,综合以上分析,只有B项叙述 正确。答案 B,
