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1、报告提纲,立项依据和意义实验材料与方法实验结果分析讨论与展望致谢,立项依据和意义,1.失巢凋亡是一种特殊的程序化细胞死亡形式。失巢凋亡被介导的效应决定细胞生存或凋亡的命运,乃至细胞的病变及癌转移。2.但不同肿瘤细胞都存在抗失巢凋亡现象，因此，不同的肿瘤细胞可能存在着不同的抗失巢凋亡机制。3.前期研究结果表明千层纸素对人类非小细胞肺癌A549体外培养的有显著的生长抑制作用，但其具体机制有待探讨。4.针对非小细胞肺癌，建立其失巢凋亡的研究模型，以初步确定起关键作用的信号通路或信号分子,为其干预措施提供线索。,实验材料与方法,1.药物 千层纸素（oroxylin）由中国药科大学药学院提供2 细胞株
2、非小细胞肺癌A549细胞株引自中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所,实验材料与方法,体外细胞培养,台盼蓝染色,Annexin V/PI流式双染,DAPI染色,免疫印迹,实验结果分析,台盼蓝染色,说明A549细胞悬浮培养发生失巢凋亡抵抗,实验结果分析,Annexin V/PI流式双染,说明A549细胞发生失巢凋亡抵抗,实验结果分析,光镜观察和DAPI染色,非小细胞肺癌A549细胞加药组细胞核出现明显的凋亡现象,加药36小时后，加药组悬浮细胞减少；空白组细胞生长良好,实验结果分析,免疫印迹,Procaspase-3下调，PARP蛋白表达量降低，出现切割形式。,讨论与展望,1.本研究发现：在短时间内悬浮生长的非小细胞肺癌A549细胞并无明显的失巢凋亡作用发生。2.本研究结果表明：一定浓度的千层纸素的确诱导非小细胞肺癌A549失巢凋亡的发生，且其具体作用机制可能是通过激活内源性凋亡通路来实现的。,结论与讨论,1.本研究结果虽然暗示千层纸素A可以诱导肿瘤细胞发生失巢凋亡。但千层纸素诱导失巢凋亡的详细机制尚需进一步研究。2.不同的肿瘤细胞可能存在着不同的抗失巢凋亡机制。因此，建立非小细胞肺癌的失巢凋亡研究模型是十分有必要的。3.非小细胞肺癌细胞抗失巢凋亡过程中起关键作用的信号通路或信号分子尚需进一步鉴定和研究。,讨论与展望,展望与建议,致 谢,
