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1、WHAT CAN WE DO NOW?,大骨瓣减压术脱水剂激素冬眠疗法高压氧自由基清除剂钙离子拮抗剂神经营养药物,约10%轻度损伤患者和66-100%中、重度损伤患者遗留有永久的神经功能障碍,疗 效?,中枢神经系统不可再生?,神经干细胞(Neural stem cells,NSCs),自我更新,多向分化,可塑性,迁移性,全新的治疗思路!,干细胞治疗中枢神经系统损伤,替代治疗:移植外源性干细胞补充治疗:激活内源性干细胞,一、外源性性干细胞的 实验研究,胚胎干细胞(ESC),神经干细胞(NSC),神经元(Neuron),ESC分离培养,ESC诱导分化,ESC的实验研究,NSC的实验研究,葡萄糖对神
2、经干细胞增殖分化的影响 离子浓度变化对神经干细胞凋亡的影响,干细胞微环境变化,存在问题,更好的干细胞?,二、内源性性干细胞的 实验研究,内源性神经干细胞具有以下优势,碱性成纤维细胞生长因子(basic Fibroblast Growth Factor,bFGF),建立创伤性脑外伤模型,采用改良的Feeney氏自由落体撞击来制作创伤性脑外伤模型,40g重的铁质圆柱体自25cm高处自由落体撞击,左侧顶骨咬除5.0mm5.0mm,显露硬脑膜,脑室内注射,损伤侧海马组织中BrdU阳性细胞BrdU-positive cells at the DG of the hippocampus on the da
3、mage side,结果,重型颅脑损伤?,侧脑室室管膜下区(SVZ)海马齿状回颗粒细胞下层(DG/SGZ),脐带间充质干细胞(UMSC),骨髓间充质干细胞(BMSC),体外研究,+,动物实验,BrdU(Ipsilateral cerebral cortex,Week 1,100),BrdU(Ipsilateral cerebral cortex,Week 2,100),BrdU(Ipsilateral cerebral cortex,Week 3,100),BrdU(Ipsilateral cerebral cortex,Week 4,100),BrdU(Ipsilateral hippoca
4、mpus Week 2,100),BrdU(Ipsilateral hippocampus Week 4,400),BrdU(Ipsilateral hippocampus Week 3,400),BrdU(Ipsilateral hippocampus Week 2,400),BrdU,BrdU,GFAP,NeuN,Merge,Merge,GFAP(Ipsilateral cerebral cortex),NeuN(Ipsilateral hippocampus),Ipsilateral cerebral cortex,Ipsilateral hippocampus,Neun/-actin,
5、Neun/-actin,Horizontal motion,Vertical motion,Tiltboard time,Beam-walking,Behavior Scales,A:BMSCs+NGF B:BMSCs C:Injury control D:Blank Control,三、临床实验研究,Progress,HBMSCs(P1),HBMSCs(P3),CD34,CD105,NeuN,GFAP,Day 2,Day 8,BMSC临床实验,自体BMSC体外扩增,BMSC移植,BMSC移植,美国多学科PVS研究组提出的“植物状态”(1994),评分参考,脑卒中患者临床神经功能缺损程度评分标
6、准(1995),神经功能缺失的临床评估,影像学检查,效果评估,神经电生理学检查,功能学评价,移植前(2008/07/01),移植后(2008/09/08),移植后(2009/03/03),干细胞与周围组织建立了突触联系干细胞分泌各种营养因子,可能的机理?,存在问题,老年人的骨髓脂肪化-来源少成年人骨髓干细胞-活性差急性颅脑损伤病人-周期长,数量丰富,易于采集 基因稳定,安全可靠免疫性低,免疫调节发育更早,环境单纯修复损伤,重建功能,UMSC的特点,强强联合,温总理强调:“北科从事的干细胞研究是生物科技的最前沿,是最有希望超越西方发达国家的领域。正如你们所期盼的,让一个国家、一个民族在一个大的科学领域领先世界!”,UMSC移植方案,选择病例(签署知情同意书),完善相关检查,脐带间充质干细胞分离提纯培养制备鉴定,每周1次,共4次脐带间充质干细胞治疗。第1次:静脉 2107(30mL);第2次:鞘内 2107(1mL);第3次:鞘内 2107(1mL);第4次,鞘内 2107(1mL),治疗后观察、检查、并进行定期随访,定期汇总分析,进行有效性、安全性评估,研究项目获军队专项课题资助,干细胞项目是国家和军队的十二五重大研究课题,谢谢!,