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1、前 言,血瘀证 中医临床,涉及内、外、妇、儿各科疾患心血瘀阻:心痹,与冠心病有关;血瘀脉络:半身不遂、关节肿痛血瘀下焦:少腹疼痛、闭经、尿血肝郁气滞、瘀久成疾:形成肝脾肿大或肿瘤,血瘀证现代研究,多系统生理异常及病理变化,不仅限于循环系统疾患:血瘀证与循环障碍(包括全身性或局部循环障碍,特别是微循环障碍)有密切联系与代谢异常、炎症反应、免疫功能异常及组织异常增生等多方面改变有关。,治则-活血化瘀,针对血瘀证特点而确立的一个重要治疗原则“活血”,即活其血脉 通过调整心血管功能及血液流变性等,改善和促进循环生理功能;“祛瘀”,即祛其瘀滞 通过改善血凝状态,调节血脂代谢,预防血栓形成,防治动脉粥样硬

2、化及组织异常增生等,解除已经发生的病理状态。,活血化瘀中药复方发展,神农本草经收载活血化瘀作用83药物(365)伤寒论、金匾要略活血化瘀方剂11首医林改错记载50多种瘀血证和22首活血化瘀方剂 活血化瘀治则及有关方药的研究,成为现代中医药研究中最为活跃的领域常用活血化瘀药物达数百种活血化瘀方剂近百首,活血化瘀复方的现代药理研究进展,药理研究:扩张冠状动脉增加冠脉流量和心肌营养改善微循环免疫功能双向调节改善血液物理化学性状抑制炎症反应调节糖脂代谢抑制组织异常增生抗感染和镇痛镇静,临床应用:心脑血管疾患免疫性疾患妇科疾病感染性疾患肿瘤,研究较多方剂:血府逐瘀汤冠心2号方复方丹参制剂益气活瘀胶囊舒心

3、益脉胶囊,活血化瘀方药研究热点,活血化瘀复方与血小板功能活血化瘀复方和血管平滑肌细胞(VSMC)活血化瘀复方和内皮细胞活血化瘀复方和血管的生成活血化瘀中药与离子通道活血化瘀复方与抗纤维化,关于血小板的粘附聚集,血小板的粘附聚集是血栓形成的基础,是现代医学血栓性疾病防治研究的一个热点活血化瘀中药及其复方具有耐受性好,副作用(如血小板减少、出血)较少,作用环节不单一等优点。若能结合临床进行验证,会为现代冠心病,中风等血栓性疾病的防治提供一个可靠的途径。,活血化瘀复方与血小板功能,在血栓性疾病发生发展的过程中,血小板机制贯穿始终。血小板聚集和血栓形成学说认为(1)在开始阶段,动脉内膜损伤,血小板活化

4、因子增多,血小板在该处粘附聚集,随后发生纤维蛋白沉积,形成微血栓。,活血化瘀复方与血小板功能,(2)血小板聚集后释出一些活性物质,如血栓素(TXA2)、血小板源生长因子、5-羟色胺、成纤维细胞生长因子、血小板第4因子等,在这些活性物质的作用下,血小板进一步粘附、聚集,血栓形成 近年来,在活血化瘀中药复方对血小板功能影响方面,中医药进行了很多有益的探索。,活血化瘀复方与血小板功能,1降低血小板聚集率单味药:丹参、川芎、银杏叶、赤芍、红花、当归等均有抑制血小板聚集的作用。复方药:能够抗血小板聚集的有冠心2号方、当归芍药散、桃核承气汤、补阳还五汤等;中成药:血府逐瘀汤系列制剂、冠心2号方制剂、复方丹

5、参制剂、麝香心脑通片、地奥心血康、灯盏花注射液等。,活血化瘀复方与血小板功能,2降低血小板粘附率有关血小板粘附率,多数活血化瘀复方皆显示有降低血小板粘附的作用血府逐瘀汤系列制剂、冠心2号方制剂、复方丹参制剂等。尤其是临床治疗冠心病病人,得到广泛证实。,活血化瘀复方与血小板功能,3抑制5-羟色胺(5-HT)的释放5-HT是血小板活化时从致密颗粒释放出的活性物质,能导致血管收缩和血小板的进一步聚集。活血化瘀中药或其有效成分如当归、三七总苷。阿魏酸、丹参以及中药复方冠心2号等,均可抑制5-HT的释放。,活血化瘀复方与血小板功能,4抑制血小板球蛋白(-TG)的释放-TG是血小板特异的蛋白质,是反映血小

6、板被激活和释放反应亢进的指标活血化瘀复方(乳香、没药、檀香等)治疗冠心病血瘀证病人,证明其可降低TG。,活血化瘀复方与血小板功能,5抑制血小板活化因子(PAF)的释放PAF可以由多种细胞产生,其中血小板被凝血酶、胶原等激活后也可释放出PAFPAF是一种强烈的血小板诱聚剂。活血化瘀中药或其有效成分:川芎、丹参、当归、三七总苷以及中药活血化瘀复方冠心2号等有抗PAF的作用。,活血化瘀复方与血小板功能,6抑制血栓素B2(TXB2)合成和释放单味中药和有效组分方面:丹参、川芎、阿魏酸、水蛭等具有抑制TXB2合成作用大蒜素、穿心莲、银杏叶提取物也有作用中药复方研究方面证明,许多活血化瘀复方皆有抑制TXB

7、2的合成的作用,此方面在治疗冠心病和中风性疾病的研究报道较多。,活血化瘀复方与血小板功能,7抑制血小板磷酸肌醇系统磷酸肌醇代谢产物三磷酸肌醇(IP3)和二酰甘油酯(DG)有第二信使的作用,在血小板活化过程中起重要作用活血化瘀中药的有效成分川芎嗪、阿魏酸等及一些活血化瘀中药复方,都可抑制磷酸肌醇裂解,从而抑制血小板的活化。,活血化瘀复方与血小板功能,8升高血小板环核苷酸(cAMP)cAMP是血小板活化的抑制性第二信使活血化瘀类中药丹参、当归和其有效成分、组分赤芍精、三七总苷、川芎嗪及活血化瘀复方冠心2号等,都有升高cAMP的作用。,活血化瘀复方与血小板功能,9钙拮抗作用血小板胞质钙离子浓度的调控

8、,是血小板活化的关键。活血化瘀中药川芎、当归、桃仁、红花、赤芍、三棱及有效成分、组分丹参酮、川芎嗪、三七皂苷等有一定的钙拮抗作用,活血化瘀方药研究热点,活血化瘀复方与血小板功能活血化瘀复方和血管平滑肌细胞活血化瘀复方和内皮细胞活血化瘀复方和血管的生成活血化瘀中药与离子通道活血化瘀复方与抗纤维化,活血化瘀复方和血管平滑肌细胞,1抑制血管平滑肌细胞表型转换血管平滑肌细胞表型转换是其迁移、增殖的前提条件血管平滑肌细胞由分化型转变成去分化型后才能获得增殖及迁移能力,同时分泌和合成各种细胞因子和细胞外基质(ECM),在这一过程中伴随着标志基因表达的改变,活血化瘀复方和血管平滑肌细胞,1抑制血管平滑肌细胞

9、表型转换当归能够通过抑制去分化型血管平滑肌细胞标志基因SMemb过度表达,上调分化型血管平滑肌细胞标志基因Sma-actin的表达,发挥抑制内膜增生的作用。血府逐瘀汤可通过抑制血管平滑肌细胞由收缩型向合成型转变而抑制血管平滑肌细胞和内膜增生。,活血化瘀复方和血管平滑肌细胞,2抑制血管平滑肌细胞(VSMC)迁移VSMC的迁移是动脉内膜增生的主要原因之一,其迁移过程依赖于细胞外基质(ECM),特别是基底膜周围基质的降解,该作用是由基质金属蛋白酶MMp-2和MMP-9来完成的。当归、丹参和生蒲黄的血清明显抑制迁移有关基因骨桥蛋白和MMP-2的表达及酶活性,进而抑制VSMC迁移和增殖。丹参明显抑制骨桥

10、蛋白基因表达及由此引起的VSMC迁移的作用。,活血化瘀复方和血管平滑肌细胞,3.抑制血管平滑肌细胞VSMC增殖VSMC的异常增殖是高血压、动脉硬化和血管成形术后再狭窄的共同病理基础,是导致内膜增生的主要原因之一。活血化瘀中药在细胞及整体水平上具有抑制VSMC增殖及内膜增生的作用。川芎嗪通过调节再狭窄部位VSMC增生相关基因的表达,而发挥其抑制内膜增生的作用;复方丹参注射液在体外呈剂量依赖性抑制VSMC3HTdR的掺入,减少DNA合成,抑制VSMC增殖,并在整体水平抑制内膜增生;水蛭和水蛭素明显抑制VSMC3HTdR掺入及在整体水平抑制内膜增生的作用。补阳还五汤、血府逐瘀汤、冠心2号方等有的抑制

11、VSMC增殖作用,活血化瘀复方和血管平滑肌细胞,4诱导血管平滑肌细胞VSMC调亡细胞VSMC的迁移、增殖和调亡与内膜增生和血管重塑关系密切。血管内膜增生可能是VSMC过度增殖与调亡调控失衡的结果诱导VSMC调亡对于抑制血管内膜的增生对防治动脉粥样硬化具有重要意义红花、郁金提取液可有效地抑制体外高糖血清培养的VSMC表型转变和增殖丹参对VSMC的增生和迁移具有显著抑制作用,活血化瘀复方和血管平滑肌细胞,4诱导血管平滑肌细胞VSMC调亡细胞Northern杂交结果表明丹参可抑制与细胞迁移相关的骨桥蛋白基因表达,骨桥蛋白基因缺乏大鼠VSMC中胶原质粘附作用下降并且细胞调亡率上升,丹参有可能通过抑制骨

12、桥蛋白基因表达而使VSMC调亡血府逐瘀浓缩丸、补阳还五汤、消瘀片,可抑制VSMC过度增生和促进细胞调亡.补阳还五汤治疗AS抑制病变内膜增厚,管腔狭窄明显改善。机制除降血脂,减轻高血脂对内皮细胞的氧化损伤外,也与其促进内皮细胞合成与分泌磷酸葡萄糖异构酶2和一氧化氮(NO)等生物活性物质,进而促进中层VSMC调亡,活血化瘀方药研究热点,活血化瘀复方与血小板功能活血化瘀复方和血管平滑肌细胞(VSMC)活血化瘀复方和内皮细胞活血化瘀复方和血管的生成活血化瘀中药与离子通道活血化瘀复方与抗纤维化,活血化瘀复方和内皮细胞,冠脉急性缺血的发作,与冠脉狭窄程度相关性差,却与内皮功能障碍关系密切。内皮功能在冠脉疾

13、病中的重要性越来越受到重视,随着对内皮功能研究的深入,使我们从一个新的视角认识冠心病,同时也为冠心病的防治提供了新的思路。,活血化瘀复方和内皮细胞,内皮素发挥功能是通过调控其衍生的血管活性物质的释放平衡来实现的:一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)、内皮素(ET)尤为重要直接测定血浆NO、NOS、ET的含量可以反映内皮的功能状态。活血化瘀汤提高急性心肌缺血家兔血浆NO、NOS水平,降低ET水平,促使NOET平衡,从而改善心肌缺血。治疗冠心病机制可能通过改善内皮细胞功能,促进缺血心肌血管内皮修复,改善冠状动脉供血来实现的,达到防治冠心病的作用。,活血化瘀复方和内皮细胞,外周循环内皮细胞(C

14、EC)数量外周循环内皮细胞(CEC)数量是判断在体血管损伤的重要指标,与ET的水平存在相关性。给大鼠注射肾上腺素附加冰浴造成重复性好的CEC数量增加,并与全血粘度、纤维蛋白原和红细胞压积增加相平行。丹参与水蛭制剂可使实验动物的外周血CEC数下降,血液流变学改善不稳定性心绞痛患者外周血的CEC数量明显升高,同时有血浆ET水平升高,益气活血的愈心痛胶囊治疗2周后,CEC的数量明显下降,ET亦同时下降活血化瘀中药对抗内毒素性休克大鼠肺微血管通透性指数增高及CEC数升高,从而达到对内皮细胞的保护作用。,活血化瘀方药研究热点,活血化瘀复方与血小板功能活血化瘀复方和血管平滑肌细胞(VSMC)活血化瘀复方和

15、内皮细胞活血化瘀复方和血管的生成活血化瘀中药与离子通道活血化瘀复方与抗纤维化,活血化瘀复方和血管的生成,血管的生成在许多疾病的发生发展及转归、预后中扮演着重要的角色。调节血管生成的研究已成为临床治疗中的热点。,活血化瘀复方和血管的生成,促进血管生成的临床治疗意义心肌梗死患者,梗死部位新生血管的生成对恢复受损心肌组织血供有重要意义。骨折、创伤伤患者,如能促进创伤局部的血管生成,就可以改善局部血供,加快愈合,活血化瘀复方和血管的生成,血管内皮生长因子(VEGF)VEGF是一种特异地作用于血管内皮细胞的强有力的多功能细胞因子。在体内促进血管内皮细胞有丝分裂,增加毛细血管的穿透性生长能力,具有单核细胞

16、趋化作用和蛋白酶的活性,与血管的发生和生长有密切的关系。益气活血复方心脉通胶囊对急性心肌梗死(AMI)患者血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响:心脉通胶囊组患者血清VEGF水平在一周后明显高于对照组。说明心脉通胶囊有促血循环中VEGF表达的作用,可能具有诱导新生血管形成的作用。,活血化瘀方药研究热点,活血化瘀复方与血小板功能活血化瘀复方和血管平滑肌细胞(VSMC)活血化瘀复方和内皮细胞活血化瘀复方和血管的生成活血化瘀中药与离子通道活血化瘀复方与抗纤维化,活血化瘀中药与离子通道,Ca2+是细胞内一种重要的第二信使物质:参与细胞功能代谢调节,参与细胞分化、发育、增殖及凋亡等核功能的调节,活血化瘀

17、中药与离子通道,川芎嗪应用微电极技术观察到川芎嗪可增加心肌细胞钙慢内向电流,可能通过受体而发挥影响。观察大鼠缺血心肌细胞核钙转运功能的变化及川芎嗪的作用。缺血组心肌细胞核膜Ca2+-ATP酶活性较对照组下降,Ca2+摄取率也显著性降低川芎嗪保护组心肌细胞核Ca2+-ATP酶活性及核Ca2+摄取率较缺血组均有显著性升高,且有剂量依赖关系。川芎嗪对大鼠缺血心肌细胞核钙转运功能下降有拮抗作用三七总皂苷对遗传性高血压大鼠可显著提高其心肌细胞内肌浆网膜上钙泵活性,减少心肌细胞Ca2+,减轻左室重量。三七皂苷Rbl对豚鼠心肌细胞膜L型电压依赖性钙通道具有剂量依赖性抑制作用。,活血化瘀方药研究热点,活血化瘀

18、复方与血小板功能活血化瘀复方和血管平滑肌细胞活血化瘀复方和内皮细胞活血化瘀复方和血管的生成活血化瘀中药与离子通道活血化瘀复方与抗纤维化,活血化瘀复方与抗纤维化,近些年,临床运用活血化瘀中药复方治疗肝纤维化或肺纤维化取得显著疗效。其在抗纤维化药理作用机制研究方面亦取得较大进展。,活血化瘀复方与抗纤维化,1、保护肝细胞改善炎症和坏死状况肝纤维化的始动因素是各种原因造成的肝细胞损伤,以致其变性、坏死,炎性细胞浸润及纤维结缔组织增生。以丹参、水蛭,当归为主组成的益肝浓缩煎,具活血化瘀功效,给CCl4 肝纤维化大鼠应用后,光镜和电镜下观察肝细胞水肿、变性明显改善,炎细胞浸润减少,肝组织丙二醛(MDA)显

19、著降低。,活血化瘀复方与抗纤维化,2抑制肝星状细胞(HSC)的活化增殖各种肝损伤均可引起HSC转化为肌成纤维细胞而活化。HSC的活化是导致肝纤维化的中心环节中药复方抗肝纤维化的主要机制之一可能是多途径地阻止HSC的活化增殖。如以丹参、桃仁、冬虫夏草为主,重在扶正化瘀的复方319药物血清可抑制传代大鼠HSC的增殖;,活血化瘀复方与抗纤维化,3、抑制转化生长因子(TGF-)分泌及其活性TGF-是促肝纤维化形成最重要的细胞因子以桃仁、丹参为主的抗纤软坚冲剂能减少肝组织TGF-出的分泌量及其1、型受体的表达量。,活血化瘀复方与抗纤维化,慢性肝炎的中医辨证分型与肝组织病理改变、肝功能、免疫学指标、血清病

20、毒标志物、微量元素、内分泌激素、细胞因子及氧自由基等有一定的关系,这方面研究的不断完善将使活血化瘀中药复方在抗肝纤维化治疗中发挥更重要的作用,充分显示活血化瘀中药复方抗肝纤维化的综合优势。,活血化瘀药化学研究进展,中医药则是从整体着眼针对功能,采取多途径的整合调节性治疗,即“调整阴阳,以平为期”。中医用药讲究组方配伍,整体作用,并且方随证变,辨证施治。方剂中有效成分以低于它们中某一单体治疗剂量进入人体后,有选择地反复作用于某种疾病的多种直接靶点(治标)和间接靶点(治本),它不是针对病因的直接对抗和缺少物质的补充,而是动员机体抗病能力,调节失衡状态,从而达到治疗疾病的目的。,实现中医药的现代化的

21、主要途径就是充分利用现代科技手段,从分子水平来认识和发展中医药的规律和理论。一方面要结合中医证候理论和中药复方配伍规律,一方面还要充分吸收和发展当前最先进的仪器分析手段、分子药理学及分子生物学的最新成果去进行深入研究,探明其作用的化学物质基础、作用的靶点和作用机制。这样中医药才能在发挥自身优势的同时弥补劣势,做到有理有据,更好地被西方医学接受。,(1)生物碱类:,为活血化瘀药中较重要的一类化学成分,川芎所含的吡嗪类生物碱川芎嗪,具有调节心血管功能,改善血液流变性及微循环,抑制血小板聚集及血栓形成等作用,已广泛用于临床。延胡索含有十多种生物碱,特别是原小檗碱类的延胡索乙素,具有活血止痛,改善心肌

22、缺血等作用。益母草的吡咯类生物碱,如益母草碱、益母草定碱等,对心血管功能及心肌缺血也有较好的治疗作用,蒲黄的嘌呤类生物碱如6-氨基嘌呤,发现也具有血管活性。,(2)黄酮类:,活化血化瘀药另一类重要成分为黄酮类,常以苷或游离状态存在,目前已知这类化合物具有30多种药理作用,特别是调整心脏血流动力学,增加冠脉血流量,改善微循环,抑制血小板聚集及血栓形成,降血脂,防治心肌缺血等作用。丹参、葛根、山楂、红花、蒲黄、银杏叶等活血化瘀药,均已发现具有较强生理活性的黄酮类有效成分,有些并已人工合成,经系统实验研究及临床观察,发现一些可喜的苗头,有可能发展一些新型的药物。,(3)酚类:,当归、川芎中的阿魏酚,

23、具有抗血小板聚集作用丹参、四季青的原儿茶酸具有调节心肌代谢,降低心肌耗氧量、改善循环功能等作用。值得注意的是秃毛冬青的3,4一二羟基苯乙酮,丹参的一3,4二羟基苯基乳酸(丹参素)及丹参、四季青中的3,4二羟基苯甲醛(原儿茶醛),具有相同的基本结构,有相似的药理作用,如调节心脏血流动力学,增加冠脉血流量,抗心肌缺血等。在此基础上如能改造结构,合成系列衍生物,有可能找到更为理想的药物姜黄、郁金、莪术等活血化瘀药中都含有酚类成分,与其药理作用有密切关系。,(4)挥发油:,川芎、当归、乳香、没药、三棱、莪术、郁金、血竭等,以及大蒜、洋葱等食物都含有一定量的挥发油。这类成分具有镇痛、调节心血管功能、抗凝

24、血等作用,有的还可降血脂、预防动脉粥样硬化;桂枝及肉桂的挥发油(主要为桂皮醛)并有调节外周循环等作用,由于这类成分具有挥发性,可制成气雾剂吸入给药,作为冠心病的速效止痛或速效急救药,将有较好的发展前景。,(5)香豆精类:,秃毛冬青、柿树叶、白芷、前胡等均含有香豆精类成分,具有降血脂,扩张冠状动脉,防治冠心病等多方面的药理作用。,(6)醌类:,丹参、茜草、虎杖、大黄等活血药,含有多种醌类化合物,多具有抑菌、降血脂、抗心肌缺血等作用,也是值得重视的一类有效成分。,(7)单萜苷类:,丹皮、赤芍、白芍等活血化瘀药中含有芍药苷,具有调节心脏血流动力学,增加冠脉血流量,抑制血小板聚集,改善血液流变性,以及

25、镇痛、抑菌、消炎等作用,(8)其他:,水蛭的多肽类成分水蛭素具有抗凝血、保护心肌缺血等作用。三七及牛膝的皂昔,桃仁的氰苷红花的多炔类乳香、没药的树脂类成分等有些已证实有较好的生理活性,可用于临床防治多类瘀血证。,运用中药复方进行整体性治疗,是中医学临床药物治疗的主要方法与手段,也是其特色和优势之所在。当前中药复方的现代研究是中药现代化研究的主旋律,中药复方的现代药理学研究是研究的热点,从近年来中药复方药理学研究的现状来看,主要有以下几方面的特点:,(1)从局限于对中药复方某种药理作用的研究走向从多系统功能的角度进行系统的药理学研究;(2)逐步与化学研究进行合作,结合物质基础的研究进行研究,这将

26、有助于使中药复方药理作用的研究走向微观;,(3)“血清药理学”在中药复方药理学研究中广泛应用,通过中药复方的含药血清在细胞和分子水平进行了大量的研究,发现了许多在整体条件下不曾观察到的现象;(4)新技术已广泛应用于中药复方药理学的研究,如分子生物学技术正被广泛地应用于中药复方药理学的研究;(5)逐步开展了中药复方药代动力学的研究。,活血化瘀中药复方,与其他中药复方一样也是一个复杂的巨系统,其作用具有多效性,量效关系复杂,方中所含多种化学成分,哪些成分在起主要作用,哪些成分在起次要作用?成分之间的相互作用如何?这些皆需进一步深入研究,加以阐明,深入中医药现代研究是与现代科技发展密不可分的。,以基

27、因芯片技术为例,目前该技术己广泛应用于现代分子生物学研究领域,主要包括基因表达谱分析、基因组文库做图、新基因发现、基因测序、基因突变及多态性分析、疾病诊断和预测、药物筛选等。许多国际制药公司己开始运用基因芯片技术帮助识别药物干预治疗的合适靶标,检测药物作用下基因表达的改变,在药物筛选和预测药物的毒副作用方面也发挥着越来越重要的作用。,今后活血化瘀方药防治疾病研究的重点方向之一就是如何应用基因芯片技术,探讨活血化瘀方药多层次、多靶点的作用机制,筛选活血化瘀方药的作用靶标,进一步筛选活血化瘀方药的有效成分或组分,建立以药物作用靶标为基础的药物筛选体系,为活血化瘀方药的用药个体化提供依据。相信不久的

28、将来一定会涌现出许多像川芎嗪一样令人信服的活血化瘀中药,不断提高人们健康水平。,活血化瘀方药实验设计举例,圣方软胶囊、明显治疗心肌缺血,可减轻心肌损伤程度,减小心肌梗死面积。、可增加冠脉血流量,降低左室内压,减少做事做功,降低心肌耗氧量,改善心血管功能。、明显保护缺血性损伤及免疫性损伤。、调节血流变形、改善微循环。、抗血小板聚集、抗血栓形成。、改善细胞、胶原组织和脂质代谢,抑制平滑肌细胞和纤维组织增生。,芪丹通脉片(活血通脉片)能明显改善血液流变学、细胞流变学指标,改善微循环,降低血脂;能降低血清中CK活性,缩小心肌梗死区面积;降低心肌细胞线粒体MDA含量,保护线粒体结构的完整性,减轻氧自由基的损伤,使缺血心肌细胞表面的ICAM-1表达下降,减轻中性粒细胞表面的配体与之结合损伤心肌细胞,Thank You!,

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