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1、1.掌握细菌的制片和染色技术2.掌握放线菌形态观察方法3.熟练油镜的使用方法,一、实验目的及要求,二、细菌染色的基本原理,细菌细胞小而透明,在普通光学显微镜下不易识别,必须对它们进行染色。细菌常用碱性染料来进行简单染色,这是因为在中性,碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞通常带负电荷,而碱性染料在电离时,其分子的染色部分带正电荷,很容易使细菌结合使菌体着色,经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比,在显微镜下更易于识别。,三、实 验 材 料,1、菌种 金黄色葡萄球菌、巨大芽孢杆菌、大肠杆菌、灰色链霉菌等。2、器材 显微镜、载玻片、盖玻片、接种针、无菌水、香柏油、碱性染料番红、结晶紫等。,四、实验方法和步
2、骤,1、细菌简单染色 取菌(要求无菌操作)涂片干燥固定染色(1min)水洗干燥镜检(注意形状、大小、排列方式),四、实验方法和步骤,1、细菌简单染色 取菌(要求无菌操作)涂片干燥固定染色(1min)水洗干燥镜检(注意形状、大小、排列方式),葡萄球菌,四、实验方法和步骤,2、放线菌菌落形态观察(1)表面形状 大小、颜色、边缘、紧密程度等。(2)区别营养菌丝、气生菌丝、孢子丝,四、实验方法和步骤,(2)区别营养菌丝、气生菌丝、孢子丝,四、实验方法和步骤,3.气生菌丝、孢子丝的活体观察 将培养皿盖打开,选择菌丝和孢子丝生长较薄的部位,直接用低倍镜和高倍镜观察。4气生菌丝、孢子丝的印片观察 载玻片滴1滴美兰染液盖玻片印片印片面向下置于美兰中吸去多余染液镜检(用油镜观察)维护还原显微镜。,1、绘出所观察的几种细菌和放线菌的形态并注明名称和放大倍数。2、放线菌菌落和细菌菌落有何不同之处?3、放细菌的菌体为何不易挑取?,五、思 考 题,