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1、动物实验常用的手术器械及使用方法,P60,动物实验常用的手术器械及使用方法,剪刀粗剪刀用于剪皮肤、毛发，以及较硬的骨骼等组织；手术剪刀有直、弯两型，又分圆头和尖头两种，用于剪肌膜、浅筋膜、神经和血管等软组织；眼科剪刀用于剪较小范围内的神经和血管等组织。正确的持剪方法是以拇指和无名指分别插入剪柄的两环，中指放在无名指的前外方剪柄上，食指轻压在剪柄和刀口交界的轴节处。,P60,动物实验常用的手术器械及使用方法,止血钳除用于止血外，有齿的用于提捏皮肤，无齿的分离皮下组织。蚊式止血钳适于分离小血管及小神经周围的结缔组织。执钳方法与持剪方法相同。关闭止血钳时，两手动作相同，但打开止血钳时则是用拇指和食指
2、持住止血钳一个环口，中指和无名指持住另外一个环口，将拇指和无名指轻轻用力对顶一下即可打开。,P60,动物实验常用的手术器械及使用方法,手术刀由刀柄和刀片组成，用于切开皮肤和脏器。常用持刀法有持弓式、指压式、执笔式、反挑式等，如图。镊子用于夹捏组织和牵提切口处的皮肤，眼科镊子用于夹捏细软组织。,P60,动物实验常用的手术器械及使用方法,探针 玻璃分针 蛙板 锌铜弓 蛙心夹 动脉夹 静脉夹 气管插管 血管插管 膀胱插管 颅骨钻 咬骨剪和咬骨钳,P60,【实验目的】1、观察并分析某些因素对呼吸运动的影响。2、采用肺水肿的方法复制急性呼吸功能不全的动物模型，观察其呼吸运动的指标变化，并初步探讨其机制。
3、,呼吸运动调节的影响因素和急性呼吸功能不全,P119,提问：1、呼吸、呼吸运动概念?2、人体呼吸运动主要的反射性调节？,呼吸运动是呼吸中枢节律性活动的反映。在不同生理状态下，呼吸运动所发生的适应性变化有赖于神经系统的反射性调节，其中较为重要的有化学感受性呼吸反射和肺牵张反射等。因此，体内外各种刺激可以直接作用于中枢部位或通过不同的感受器反射性地影响呼吸运动。通过快速、大量静脉输液增加心脏前负荷；静脉注射肾上腺素增加心脏后负荷两者都造成急性心衰引起肺水肿。,【实验原理】,麻碎,【实验方法】,固定,颈部切口,分离迷走神经、颈总静脉,气管插管,仪器连接,软件操作,10%乌拉坦10ml/kg 或 2.
4、5%戊巴比妥钠2ml/kg耳缘静脉（耳背、薄侧）缓慢注射,方法：兔的捉持（）称重（称的用法）抽取麻醉药（）辨清耳缘静脉（兔耳或板图）进针（）推药并观察,麻碎,又名乌拉坦、乌来糖、尿酯。易溶于水可配成10-20%的溶液，静脉或腹腔注射。常用于兔、狗、猫等动物，特别是对兔的作用较强，是家兔实验常用的麻醉药。该药价廉，使用方便，麻醉速度快，作用较持久，且麻醉过程平稳，对动物呼吸、循环无明显影响但动物苏醒慢，麻醉深度和使用剂量较难掌握。可诱发大鼠和兔产生肿瘤，一般用于急性实验，需长期存活的慢性实验动物最好不用它麻醉。,氨基甲酸乙酯,P55,适用于大多数动物。易溶于水，水溶液稳定，但久置易析出结晶，稍加
5、碱性溶液可防止析出结晶。根据实验动物不同，可配制成1-5%的水溶液，由静脉或腹腔注射。一次给药的有效麻醉时间约 3-4小时，如在实验过程中动物醒来或未达到麻醉效果时，可补注原剂量的 1/5，切不可随意加药，麻醉过量可导致呼吸、循环抑制，甚至动物死亡。,戊巴比妥钠,P55,兔的捉持,一手抓住颈背部皮肤,轻轻提起，另一手托其臀部，使兔呈坐位姿势；或一手抓住颈背部皮肤，另一手托住兔体下方部，使兔呈平卧位姿势。切忌捉拿兔的双耳。,P47,1、准备用品：麻醉药、针筒、头皮针、纱布、静脉夹。2、持针及抽药方法：3、排气方法：4、注意事项：（1）注意对药标（药物名称和浓度）。（2）注意抽药量。（2）小心拿、
6、放针筒，防止内筒脱出。（3）手不要触及针筒内筒。（4）排气时药液不要喷到电脑。,抽取麻醉药,兔耳缘静脉注射法,辨清耳缘静脉（耳背薄侧外侧缘）拔去或剪去被毛轻弹或轻揉兔耳压迫耳根部耳缘静脉以阻断血液回流，使血管充分扩张左手食指和中指夹住静脉近心端，拇指和小指夹住耳廓末端，并使其拉直,P56,兔耳缘静脉注射法,兔耳缘静脉注射法,右手持注射器由静脉末端向心端方向刺入顺血管平行进针约11.5cm，放松左手拇指和食指对血管的压迫，右手试推注射器（静脉夹夹住）。判断针是否进入静脉管腔：见静脉血回流 推药顺畅 局部无肿胀,P56,兔耳缘静脉注射法,若注射阻力较大或出现局部肿胀，说明针头没有刺入静脉，应立即拔
7、出针头重刺；若推注阻力不大，可将药物缓慢注入。注射完毕拔出针头后，随即用纱布压迫针眼，以防止出血；注射器及时用清水冲洗。,P56,兔耳缘静脉注射法,最佳麻醉深度指标：皮肤夹捏反应消失，头颈、四肢及腹壁肌肉松驰，呼吸深慢而平稳，瞳孔缩小，角膜反射消失。,P57,1、不同个体对麻醉药的耐受性是不同的。因此，在麻醉过程中，除参照一般药物用量标准外，还必须密切注意动物的状态，以决定麻药的用量。若已达到所需的麻醉深度，应立即停止给药，不必全部给完所有药量。2、进针部位应尽量靠静脉远心端，以备进针不成功时可再次进行。3、注意药物是否推入血管内。,麻醉注意事项,P57,4、推药时开始可稍快，过半剂量后一定要
8、缓慢注入，并注意观察动物状况（先快后慢）。5、实验过程中如麻醉过浅，可临时补充麻醉药，但一次注射剂量不宜超过总量的1/5，且须经一定时间后才能补充。6、因麻醉药的作用，可使动物体温缓慢下降，所以，特别是寒冷季节应注意动物保温。,麻醉注意事项,P57,-四肢及两只上门牙固定,将缚绳打活结绑在兔前肢腕关节上部和后肢踝关节上部将两后肢分开拉直，用缚绳缠绕固定于手术台后缘的钩上将两前肢平直放在两侧，绑两前肢的左右绳子从家兔的背部交叉穿过压住对侧前肢分别绑在手术台对侧的钩上用一根棉绳勾住兔两颗上门齿，将兔头拉直后用棉绳在手术台的固定柱上绕两圈后打结固定。,P47,固定,1,2,3,4,1、剪毛：用粗剪刀
9、-范围大于切口-平贴皮肤，逆毛的朝向剪-不要把毛提起来剪-剪下的毛放入盛水的杯中浸湿。,于喉头下方至胸骨上缘之间作颈正中切口4-5cm。,2、颈正中线切口：,P62,颈部切口,根据实验需要确定切口的位置和大小必要时要作出标志。切口大小以便于手术操作为宜。用拇指和食指绷紧皮肤，另一手持手术刀以适当力量一次切开皮肤及皮下组织，直到肌层。肌层可用组织剪先剪一小口，再顺肌纤维用组织钳钝性分离。,切口方法及注意事项：,颈部切口,P62,各层切口大小要一样。注意解剖结构特点，以少切断血管、神经为原则因而尽可能使切口与各层组织纤维走向一致。手术过程中必须及时止血，保持手术野清晰。颈部切口位置不要太低，以防气
10、胸。,切口方法及注意事项：,P62,颈部切口,止血：,出血的处理应视血管大小而定。微血管渗血，可用温热盐水纱布轻轻按压止血较大血管出血，先用止血钳夹住出血点及周围少许组织，再用线结扎止血；肌肉血管丰富，出血时要与肌组织一起结扎。在实验暂歇期间，应将切口暂时闭合用温盐水纱布盖好，以防组织干燥和体热散失。,应特别注意保持局部的自然解剖位置和比邻关系。遵循先神经后血管、先细后粗的原则。,分离迷走神经、颈总静脉,用左手拇指、食指捏住颈部皮肤切口缘和部分肌肉向外侧牵拉，中指和无名指从外面将背侧皮肤向腹侧轻轻顶起，以显露颈总动脉及伴行的三条神经和减压神经。其中迷走神经最粗，交感神经次之，减压神经最细。在迷
11、走神经下方穿一以浸透生理盐水的黑线备用（不能打结）。,迷走神经的分离（双侧）：,P63,颈总静脉分布很浅，位于颈部左、右两侧皮下。用左手拇指、食指捏起颈部切口皮缘，向外侧牵拉，中指和无名指从外面将颈外侧皮肤外翻，右手用玻璃分针将颈部肌肉推向内侧，即可清晰显露附着于皮肤的颈总静脉（紫蓝色，较粗）。用玻璃分针或蚊式止血钳钝性分离颈总静脉周围结缔组织，游离颈总静脉23cm，在其下方穿2根黑丝线备用。,颈总静脉的分离（一侧）：,P64,游离气管穿1线备用喉头下2-3厘米气管两软骨环间“”型切口气管插管（向肺端插入）固定（打死结，并再绕在气管插管叉上结扎固定）。喉头处容易出血，如气管内有出血或分泌物，应
12、用棉球插净后再行插管。,P63,气管插管,1,2,3,4,将气管插管一侧的橡胶管与呼吸流量传感器相连。,仪器连接,1.与呼吸流量传感器相连的通道选“常用项目”“呼吸运动”“流量法”。2.示波观察图型。根据情况适当调整扫描速度、灵敏度，或工具条中的横、纵向缩放。3.点击“记录”工具按钮。4.在字符标记功能区选“标记类型”“标记组”“呼吸运动调节组”。做每个项目之前，先在“标记字符”的框内选好实验项目名称，进行实验项目的时，点击“打标记”（“”图标）。,软件操作,（与书上不同）,1、记录正常呼吸运动曲线。2、吸入CO2：CaCO3+稀HCl。3、缺氧：4、增大无效腔（长管呼吸）：5、增加H+：3%
13、乳酸2ml耳缘静脉快速注射6、切断左、右侧迷走神经：（观察呼吸的节律、频率、幅度）,【实验项目】,CO2,中枢化学R,外周化学R,延髓呼吸中枢,+H2OHCO-3+H+,呼吸,CO2、H+和低O2对呼吸运动的调节,低O2,H+,肺扩张 牵张R延髓吸气切断机制 迷走N 切断吸气，转向呼气,肺牵张反射,指由肺扩张或缩小引起呼吸的反射性变化。,反射过程：,？,1、结束实验：点击“停止记录”保存（记住保存部位和文件名）。2、重显、编辑资料：结合纵、横缩放调节图形至适当；每个项目的实验波形前后要有一段正常曲线作对比。3、打印实验结果：每人1份+1份；曲线上注明图意；分析和讨论。,【实验结果编辑与打印】,
14、9、复制急性呼吸功能不全（急性肺水肿）的动物模型,【实验项目】,颈总静脉插管：颈总静脉远心端牢固结扎，近心端可不夹闭提起结扎线，用眼科剪于近结扎处的下侧将颈总静脉剪一小口将静脉导管向心脏方向插入颈总静脉约2cm牢固结扎 并再将线固定在插管胶布圈上。,【实验项目】,按80ml/kg输入量、于160滴/min的速度输入（37C）生理盐水，在输液几近完成时，按体重往输液管中直接加入0.5mg/kg的肾上腺素，输完后可酌加适量生理盐水缓慢维持，以便必要时重复用药。,9、复制急性呼吸功能不全（急性肺水肿）的动物模型,1.呼吸指标（呼吸急促、口唇紫绀）。2.肺部听诊（湿性罗音）。3.气管插管口是否有粉红色
15、泡沫状液体溢出。4.症状和体征明显后，放血处死动物；用止血钳夹闭气管，剪开前胸壁，于气管分叉上方约2cm处结扎并切断远端气管，以防水肿液外漏。观察胸腔内有否积液及肺部表面改变。,【实验项目】,密切观察以下情况：,5.结扎连接心脏与肺的大血管，在心脏与结扎线之间剪断，取出肺并吸干表面液体后称重；计算肺系数。肺系数=肺重量（g）/兔体重（kg）正常雄兔为4.23，雌兔为5.04。6.观察肺切开情况，以及是否有液体溢出。,【实验项目】,密切观察以下情况：,【注意事项】1、辩认清动物的性别以便判断肺系数正常与否。2、剑突切口位置不要太高,以免造成气胸。3、做每个项目时都要打实验标记。4、要等呼吸恢复后再进行下个实验项目。,【思考题】1、给兔子增加CO2、制造缺氧、注射乳酸时，对呼吸运动有何影响？说明它们的作用机制。2、试述通过快速输液导致急性呼吸功能不全的原理。,实验报告要求：1、每人1份。2、实验结果：贴上打印的曲线，并做好注明。3、实验讨论：实验结束后填写实验记录卡、仪器使用登记卡、考勤表；安排值 日；仪器清洗、擦干、整理桌、椅、地面；兔子不能带走。,预习下次课内容：实验22 影响家兔血压的因素,
