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4、等)、激素(如细胞分裂素、生长素等)及其他条件(无菌、适宜的温度和pH等)。提醒幼嫩的组织脱分化较为容易，如茎尖、根尖、形成层细胞易脱分化，而植物的茎、叶和成熟的组织则较难。对外植体要进行消毒处理，而对各种器械要彻底灭菌。植物组织培养中用到的有机碳源一般为蔗糖，用葡萄糖也可以，但后者的成本高。诱导愈伤组织再分化形成胚状体或丛芽及生根的过程中，要进行换瓶处理，以改变培养基中的激素配比及浓度。2脱分化和再分化的比较比较内容脱分化再分化过程外植体愈伤组织愈伤组织幼苗形成体特点排列疏松、高度液泡化的薄壁细胞有根、芽需要条件a.离体b.适宜的营养c.生长素/细胞分裂素的比例适中d.不需光a.离体b.适宜
5、的营养c.生长素/细胞分裂素的比例高或低诱导生根或生芽d.光照提醒愈伤组织再分化形成植物幼苗时，需光照处理，以便诱导叶绿素的形成。生长素和细胞分裂素在植物体内含量很低，因此植物组织培养中常用人工合成的生长素类似物和细胞分裂素类似物。细胞分裂素/生长素的比例适中，有利于外植体脱分化，比例升高有利于愈伤组织再分化形成丛芽，比例降低则有利于生根。3原理：全能性(1)含义：生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能。(2)物质基础：生物的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成完整个体所必需的全部基因。(3)在生物体内细胞并没有表现出全能性的原因：基因在特定的时间和空间条件下选择性表
6、达，细胞分化形成不同的组织、器官。(4)全能性的实例：花药的离体培养、植物的组织培养、克隆技术等。1(2011江苏卷，14)关于现代生物技术应用的叙述，错误的是()A蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质B体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体C植物细胞培养技术可用于植物茎尖脱毒D动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育考点117实践应用植物组织培养技术的应用1植物繁殖的新途径(1)微型繁殖：不仅可以保持优良品种的遗传特性，还可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。(2)作物脱毒：生产上许多无性繁殖作物均受到病毒的侵染，从而导致品种严重退化、产量降低和品质变差。利用植物分生组织(如茎尖、根尖)进
7、行培养，可以使新长成的植株脱除病毒。(3)人工种子：植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽或腋芽，包上人工种皮就可以形成人工种子。下图是人工种子的结构示意图。注意人工种皮中可以加入适量的养分、无机盐、有机碳源以及农药、抗生素、有益菌等，以利于胚状体生长发育成幼苗。2作物新品种的培育(1)单倍体育种：花药离体培养过程就是植物组织培养过程。花药单倍体幼苗纯合子单倍体育种的优点是后代不发生性状分离，都是纯合子，能够稳定遗传，明显缩短了育种年限。(2)突变体的利用：在植物组织培养过程中，由于培养细胞一直处于不断的分生状态，因此容易受到培养条件和外界压力(如射线、化学物质等)的影响而发生突变。从这些产生
8、突变的个体中可以筛选出对人们有用的突变体，进而培育成新品种。(3)细胞产物的工厂化生产：可以利用植物组织培养技术大量生产某些细胞产物，如蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等。2(2010课标全国理综，38)请回答：(1)植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的_，繁殖种苗的速度_。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部_。(2)把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作台上进行，其原因是避免_的污染。(3)微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗_，而与_配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长，促进
9、愈伤组织产生和生长，需要使用的生长调节剂是_(脱落酸、2,4D)。(4)将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后，单株鲜重和光合作用强度的变化如图。据图分析，随着培养基中蔗糖浓度的增加，光合作用强度的变化趋势是_，单株鲜重的变化趋势是_。据图判断，培养基中不含蔗糖时，试管苗光合作用产生的有机物的量_(能、不能)满足自身最佳生长的需要。(5)据图推测，若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力，应(降低，增加)培养基中蔗糖浓度，以便提高试管苗的自养能力。考点118技术原理植物体细胞杂交1概念：植物体细胞杂交就是将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成
10、新的植物体的技术。2图示过程3考点解读(1)植物体细胞杂交的障碍植物细胞都有细胞壁。根据酶的专一性原理，用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。原生质体融合。人工诱导方法包括物理法，如离心、振动、电激；化学法，如聚乙二醇(PEG)诱导等。(2)杂种细胞的类型有三种：AA、BB、AB，符合要求的只有AB，需要进行筛选。(3)杂种细胞AB形成的标志：新的细胞壁的生成。(4)杂种植株遗传物质的变化：细胞融合属于染色体变异，杂种植株的染色体数通常是两亲本细胞染色体数目之和，形成异源多倍体。(5)植物体细胞杂交的原理：原生质体融合的过程利用了细胞膜的流动性，杂种细胞发育成杂种植株利用了细胞的全能性。3据下面体细胞
11、杂交技术流程图回答下列问题：(1)若运用传统有性杂交(即用番茄、马铃薯杂交)能否得到杂种植株？为什么？_。(2)在利用杂种细胞培育杂种植株的过程中，运用的技术手段是_，依据的原理是_，其中过程称为_，与过程密切相关的具有单层膜结构的细胞器为_，过程相当于_，过程涉及的分裂方式为_。(3)已知番茄、马铃薯分别为四倍体、二倍体，则“番茄马铃薯”属于_倍体植株。(4)随“神六”太空旅行的种苗中，最受关注的是柴油树试管苗。柴油树种子含有的柴油是植物细胞的代谢产物，可用植物组织培养来实现柴油的工业化生产。若利用此技术，将柴油树细胞培养进行到_过程(填字母编号)即可。考点119解读操作流程图动物细胞培养1
12、概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。2操作流程3考点解读(1)培养条件无菌、无毒的环境无菌处理、加抗生素杀菌、定期更换培养液。营养葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐和微量元素血清或血浆等天然成分。温度和pH(36.50.5)和(7.27.4)。气体环境95%空气5%CO2。提醒CO2作用调节培养基pH；空气中O2作用细胞有氧呼吸；所用装置CO2培养箱。(2)原理：细胞增殖。(3)动物细胞培养时，一般选取幼龄动物的组织、器官，其细胞的分化程度较低，增殖能力强，有丝分裂旺盛，容易培养。(4)在动物细胞培养过程中，一般情况下10代以前
13、的细胞核型不变，10代以后有些细胞核型发生改变，50代以后的细胞可能发生癌变。(5)胰蛋白酶在动物细胞培养过程中的作用包括将组织分散成单个细胞，以及将贴壁细胞从瓶壁上分离下来，这样做的目的是避免动物细胞的接触抑制现象。4应用(1)生产细胞产品：干扰素、疫苗、单克隆抗体。(2)检测并判断某毒性物质毒性的大小。(3)临床医学研究。植物组织培养与动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养培养基的物理性质基固体液体(合成培养基)培养的成分水、矿质元素、维生素、蔗糖、氨基酸、琼脂等葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等结果新的植株或组织新的细胞系或细胞株目的 植株快速繁殖 脱毒植株的培育人工
14、种子 生产药物、杀虫剂等 转基因植物的培育 蛋白质生物制品的生产皮肤移植材料的培育检测有毒物质生理、病理、药理学研究取材植物细嫩的部位或花药等动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织其他条件均为无菌操作，需要适宜的温度、pH、O2等条件4如图是动物细胞培养的基本过程示意图，请据图回答。(1)容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自_。(2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是_，然后用_酶处理，这是为了使细胞分散开来。这样做的目的是_。(3)培养首先在B瓶中进行。瓶中的培养基成分有_等。在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，这时培养到第_代，到这时的培养称为_。(4)为了把B瓶中
15、的细胞分装到C瓶中，用_处理，然后配制成_，再分装。(5)在C瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞全部死亡，原因是_。考点120关注生物新技术动物细胞融合与单克隆抗体1动物细胞融合(1)概念：两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。(2)原理：生物膜的流动性。(3)方法：聚乙二醇、灭活的病毒、电激等。(4)意义：突破有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能；成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段；制备单克隆抗体。2单克隆抗体(1)取相应B细胞前必须先注射相应抗原，形象地说先“打针”，否则失败。(2)诱导融合的两种细胞名称及作用。免疫过的B淋巴细胞(浆细胞)产生抗体；骨髓瘤细
16、胞无限增殖。(3)诱导融合与原生质体融合的不同方法。动物细胞诱导融合的特有方法灭活的病毒诱导。(4)两次筛选的目的及方法：在特定的选择培养基上，未融合的亲本细胞(浆细胞和骨髓瘤细胞)和融合的具有同种核的细胞(BB融合细胞、瘤瘤融合细胞)都会死亡，只有融合的杂种细胞(杂交瘤细胞)才能生长。这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖，又能产生单一的特异性抗体。经选择性培养的杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞(很多种杂交瘤细胞)，需经克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。(5)两种培养提取场所体外培养培养液提取。 体内小鼠腹腔中培养小鼠腹水中提取。植物体细胞杂交和单
17、克隆抗体的制备的比较理论基础细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞增殖融合前处理酶解法去除细胞壁(纤维素酶、果胶酶)注射特定抗原，免疫处理正常小鼠促融方法(1)物理法：离心、振动、电刺激等(2)化学法：聚乙二醇(PEG)(1)物、化法：与植物细胞融合相同(2)生物法：灭活的病毒过程第一步原生质体的制备(酶解法)正常小鼠免疫处理第二步原生质体的融合(物、化法)动物细胞的融合(物、化、生法)第三步杂种细胞的筛选和培养杂交瘤细胞的筛选与培养第四步杂种植株的诱导与鉴定单克隆抗体的提纯意义和用途(1)克服远缘杂交不亲和的障碍，大大扩展杂交的亲本组合范围(2)克服有性杂交的母系遗传现象、获得细胞
18、质基因的杂合子、研究细胞质遗传(1)制备单克隆抗体(2)诊断、治疗、预防疾病。例如：单抗诊断盒、“生物导弹”治疗癌症5 1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。请据图回答问题：(1)病原体注入小鼠体内后，要经过_细胞处理后，才能被免疫细胞识别。(2)制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞一般从脾中采集，然后以_作诱导剂，使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。通过筛选和克隆培养，获得的杂交瘤细胞具有_的特点。(3)单克隆抗体的特点是_。根据上图写出应用杂交瘤技术获得单克隆抗体的两种主要方法_。考点121关注生物学热点内容动物细胞核移植与克隆技术引起的伦理问题1概念：动物细胞核移植是将动物的
19、细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。2操作流程3考点解读(1)原理：动物细胞核的全能性(不能说动物细胞全能性)。(2)卵母细胞选择时期及原因减中期的卵母细胞，此时具备受精能力，细胞质中合成与分裂、分化有关的物质能刺激融合后重组细胞进行分裂分化，形成重组胚胎。(3)选卵细胞作为受体细胞的原因大，易于操作；卵黄多，营养丰富，为发育提供充足的营养；能激发重组细胞分裂分化。(4)供体细胞：取供体动物的体细胞培养，一般选用传代10代以内的细胞，因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，保证了供体细胞正常的遗传基础。(5)动物体细胞
20、不能经培养直接发育成完整个体，原因是动物体细胞的全能性受到限制。用体细胞核移植技术能够得到克隆动物，说明动物体细胞的细胞核具有全能性。(6)该过程用到的技术手段：动物细胞培养、动物细胞融合、早期胚胎培养和胚胎移植。(7)核移植产生的克隆动物与提供细胞核的亲本不同的原因克隆动物细胞质基因来源于另一个亲本。所以与植物组织培养不同(只来自于一个亲本)，克隆动物遗传物质来自2个亲本。在发育过程中可能发生基因突变，染色体变异导致性状改变。外界环境条件的影响引起不可遗传的变异。4应用及存在问题(1)应用：加速家畜遗传改良进程、促进优良畜群繁育、保护濒危物种、克隆器官用于移植等。(2)存在问题：成活率低；克
21、隆动物的健康问题；克隆动物食品的安全性问题。5克隆人(1)过程(2)分类类型项目治疗性克隆生殖性克隆区别目的治疗人类疾病用于生育，产生新个体水平细胞水平个体水平联系都属无性繁殖；产生新个体、新组织，遗传信息相同6.克隆技术引发的伦理问题观点理由不赞成(1)克隆人严重违反了人类伦理道德(2)克隆人冲击了现有的婚姻、家庭和两性关系等传统的伦理道德观念(3)克隆人是人为地制造在心理上和社会地位上都不健全的人(4)克隆技术尚不成熟赞成(1)技术性问题可以通过胚胎分级、基因诊断和染色体检查等方法得到解决(2)克隆人是一项科学研究，既然是科学，就应该允许研究克隆人中国政府的态度中国政府的观点：不赞成，不允
22、许，不支持，不接受任何生殖性克隆人的实验，不反对治疗性克隆6一只羊的卵母细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵母细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下了一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途，但是不能()A有选择地繁殖某一性别的家畜 B繁殖家畜中的优秀个体C用于保存物种D改变动物的基因型1.组织培养在实践中的应用考纲能力利用所学知识解决生产实践的能力考题1某二倍体植物是杂合子，下图为其花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。据图回答：(1)图中表示的是该花粉培养过程中的_过程，表示的是_过程，X代表的是_，表示的是_过程，表示的是诱导_过程。(2)图中从愈伤组织形
23、成完整植株的途径有两条，具体通过哪一条途径主要取决于培养基成分中_的种类及其浓度配比，最后获得的来源于未成熟花粉的完整植株都称为_植株(甲)。未成熟花粉经培养能形成完整植株，说明未成熟花粉具有_。(3)对植株甲进行_，才能使其结实产生后代(乙)，否则植株甲只有通过_的方式才能产生后代(丙)。乙、丙两种植株中，能产生可育花粉的是_植株，该植株群体中每一植株产生可育花粉的基因组成种类数为_种，该群体植株产生可育花粉的基因组成种类数为_种。花药培养在育种上的特殊意义是_，从而开辟育种新途径。2.动物细胞培养在实践上的应用考纲能力对生物学问题进行初步探究能力考题2动物器官的体外培养技术对于研究器官的生
24、理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。(1)肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细胞_。(2)气室中充入5% CO2气体的主要作用是_。(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长，但要注意选择抗生素的，以保证抗生素对肝脏无害。(4)有机物X有毒性，可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具，探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。材料用具：肝脏小块，外周血淋巴细胞，淋巴细胞培养液，植物凝集素(刺激淋巴细胞分裂)；显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，滴管；吉姆萨染液(使染色体着色)，有机物X溶液等。实验过程：在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养
25、淋巴细胞，取4等份，备用。利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置，按下表步骤操作(“”表示已完成的步骤)。甲乙丙丁步骤一：加入肝脏培养液步骤二：加入有机物X溶液步骤三：放置肝脏小块上表中还需进行的操作是_。培养一段时间后，取4组装置中的等量培养液，分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察，并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常，而甲组的淋巴细胞正常，则说明_。(5)已知癌细胞X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A、
26、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的_或_合成水平的差异，确定Y的药效。1.对克隆、组织培养和试管动物(婴儿)区分不清典例1试管婴儿、试管苗和克隆羊这三者可以说是现代生物科技的杰出成果，下列对其生物学原理及技术的叙述，正确的是()A都属于无性生殖 B都属于细胞工程的某些技术C都不会发生基因重组D都体现了分化的细胞具有全能性纠错笔记克隆组织培养试管动物(婴儿)生殖方式无性无性有性遗传物质来源2个亲本1个亲本2个亲本性别决定提供核亲本一般没有精子类型用途优良种畜快速繁育，可选择性别快速繁殖无病毒植株解决不孕不育现状不成熟成熟成熟2.对植物细胞工程和动物细胞工程辨析不清典例2某
27、同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为有几处是不正确的 ()植物细胞工程动物细胞工程技术手段植物组织培养、植物体细胞杂交动物细胞培养和融合、单克隆抗体的制备特殊处理机械法去除细胞壁胰蛋白酶处理，制成细胞悬液融合方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法、生物方法典型应用人工种子、杂种植株单克隆抗体的制备培养液区别生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化动物血清不可缺少A.1B2C3D4纠错笔记(1)核移植和植物体细胞杂交产生的后代中都含有两个亲本的遗传物质；植物组织培养和人工种子产生的后代中都只含一个亲本的遗传物质。(2)植物细胞培养中去掉细胞壁的原因是这层细胞壁
28、阻碍了植物体细胞杂交融合；动物细胞培养中用胰蛋白酶处理动物组织的目的是使组织分散成单个细胞。课时规范训练【组题说明】考点题号错题统计错因分析植物组织培养1、2动物细胞培养4细胞核移植7单克隆抗体制备5综合检测3特别推荐流程图解1；实践应用与实验探究41.“白菜甘蓝”是科学家用植物细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长周期短，耐热性强和易储存等优点。下图是“白菜甘蓝”培育过程示意图，请完成下列有关问题：(1)由杂种细胞D培育成“白菜甘蓝”植株，采用的技术手段是_。该过程说明植物细胞具有_。(2)要制备“白菜甘蓝”的人工种子，要在d步骤选取具有生根发芽能力的_(结构)，包裹上人造种皮制得。
29、(3)在a过程中诱导原生质体融合最常用的诱导剂是_，融合依据的原理是_。(4)要获得上图中白菜和甘蓝的原生质体，首先需要分别除去白菜和甘蓝细胞的细胞壁。现提供以下材料和用具：紫色洋葱磷片叶、适宜浓度的蔗糖溶液、纤维素酶和果胶酶、蒸馏水、镊子、显微镜、载玻片等。请你从中选择合适的材料，完成下面检验是否已除去细胞壁实验的方法步骤，并预测和解释实验结果。主要实验步骤：选取适宜浓度的蔗糖溶液，加入适量纤维素酶和果胶酶配制成细胞壁分解液。其中选取适宜浓度的蔗糖溶液而不用蒸馏水的理由是：适宜浓度的蔗糖溶液_。检验细胞壁分解液除去细胞壁。第一步：用镊子撕取一小块紫色洋葱鳞片叶放在载玻片中央，滴加适量细胞壁分
30、解液，制成临时装片，得到实验组装片。第二步：_。第三步：_。结果预测和解释： _。2人工种子的培育过程如图所示，请回答下列问题：(1)人工种子依据的原理是_，是经过_技术培育而成的。(2)包埋胚状体的胶质可以看作是种子的哪部分结构？_。(3)某二倍体植物基因型为DdTt，利用这种生物技术采用花药离体培养的方法，可培育成“花粉胚”，也可制成人工种子，这种种子萌发形成的个体为_，基因型为_。(4)如果外植体为植物的茎尖，通过的处理可使细胞彼此分离，可加入下列哪种试剂。()A15%的盐酸B淀粉酶C果胶酶D胰蛋白酶(5)表示脱分化过程，其实质是_；表示再分化的过程，其实质是_。(6)从上面所述胚状体的
31、类型分析，人工种子萌发长成的植株是否可育？_。3细胞工程是按照人们的意愿通过某种工程手段改变细胞内遗传物质或获得细胞产品的综合科学技术。(1)科学家从红豆杉的体细胞中分离出具有独特抗肿瘤的物质紫杉醇。由于全世界每年紫杉醇的需求量是4 000 kg，但全世界紫杉醇的产量是250 kg，供求严重失衡，导致一些地区红豆杉资源遭到严重破坏。现在可以采用植物组织培养技术解决这一问题。植物组织培养依据的原理是_。在得到红豆杉的_后，经过消毒就可以在培养基上进行培养。人工合成的培养基中除水、蔗糖、维生素、有机添加物外，_是其生长必需的，_是植物细胞脱分化及再分化不能缺少的调节物质。从该生产的目的看，得到_就
32、可以提取紫杉醇。(2)德国科学家豪森是2008年生理学或医学奖获奖者之一。他的研究证实宫颈癌和人乳头状瘤病毒(HPV)之间存在联系，为宫颈癌疫苗的研制奠定了基础。现在宫颈癌疫苗已经开发出来，使宫颈癌成为人类可以预防和根除的第一种恶性肿瘤。理论上讲，将纯化的HPV在_中培养、增殖。收获病毒后用灭活剂杀死，但要确保灭活HPV的_不被破坏，并且能被人的免疫细胞识别。这样就能得到预防宫颈癌的疫苗了。HPV疫苗的作用是使一部分淋巴细胞在反应阶段形成_，当_病毒再次入侵时，机体能产生更强的特异性免疫反应，包括_。4现有甲、乙两种可能有一定致畸、致癌作用的化学物质，利用动物细胞培养的方法能够鉴定它们是否有毒
33、性，并比较二者毒性的强弱。请完成下列实验报告。.实验材料：小白鼠胚胎。.药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、细胞培养箱、载玻片、盖玻片、光学显微镜、小 白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片。.实验原理：_，根据这些变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值)，可判断该化学物质的毒性。.实验步骤：(1)制备细胞悬液把小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬液。(2)进行细胞培养取A、B、C三个洁净的培养瓶，_。_。_。(3)制作临时装片当细胞繁殖到大
34、约第8代左右时，同时从细胞培养箱中取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞从瓶壁上脱落，再加入动物细胞固定液迅速杀死细胞，并将细 胞固定在不同的分裂时期。静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬液。滴在与培养瓶有相同编号的载玻片中央，加12滴适宜浓度的_染色，35 min后，盖上盖玻片，制成临时装片。(4)镜检和统计把临时装片放在显微镜下，按照_的顺序观察，寻找处于_期的细胞，并与_对比以确认发生上述变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占细胞总数的百分数(Q值)。.实验结果：培养瓶ABCQ值1.3%12.5%0.1%.实验结论： _。5下图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单
35、抗的实验研究。据图回答相关问题。(1)X、Y、Z细胞的名称分别是_、_、_。(2)过程类似于植物组织培养技术中的_过程。与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较_。过程的实质是_。(3)过程中需用到的生物诱导剂是_。(4)处需要筛选，其目的是_。(5)若用含放射性32P标记的核苷酸的培养基培养Z细胞，能检测到放射性32P的细胞器是_、_。6 2007年诺贝尔生理学或医学奖分别授予美国人马里奥卡佩基、奥利弗史密斯和英国人马丁埃文斯。3位科学家的获奖原因是其研究为“基因靶向”技术的发展奠定了基础。所谓“基因靶向”技术(人们大都称之为基因“敲除”技术)是指利用细胞脱氧核糖核酸(DNA)可与外源性DNA
36、同源序列发生同源重组的性质，定向改造生物某一基因的技术。借助这一从上世纪80年代发展起来的技术，人们得以按照预先设计的方式对生物遗传信息进行精细改造。有了“基因靶向”这一高精度瞄准镜，科学家就可以精确瞄准任何一个基因，使其失去活性，进而研究该基因的功能。请回答下列问题：(1)“敲除”一种基因需要分两步来完成：第一步是利用化学“剪刀”，例如用某种酶切除哺乳动物染色体中有某种功能的基因。第二步是用修改过的基因取代原有基因。这里的“某种酶”应该是_酶。用修改过的基因取代原有基因时还需要_酶。(2)假如要“敲除”小鼠的胰岛素基因，请设计出实验步骤： _。给出一种检验胰岛素基因是否被“敲除”的方法：_。
37、(3)利用细胞工程也可获得可供老鼠移植之用的“敲除排斥基因”的老鼠，其过程大致如下图所示：促进卵细胞融合最常用的试剂是_。重组细胞培养成胚胎的过程所用的培养基，从物理性质上看属于_，培养基中至少要加入水、无机盐、葡萄糖、氨基酸、维生素、促生长因子、微量元素和_等物质，同时要创造适宜温度、pH和无菌条件，其中需要无菌环境的原因是_。7供体器官的短缺和排斥反应是制约器官移植的两个重要问题。而治疗性克隆能最终解决这些问题。下图是治疗性克隆的过程图解：(1)正常情况下，去核的卵细胞取自于女性卵巢排卵后在输卵管中的_期的卵母细胞。(2)重组细胞发育的过程中，细胞开始分化发生在_期。(3)治疗性克隆所用到的技术名称是_，要想获得基因型完全相同的两个胚胎，可采用_技术。(4)请你运用上述知识举一例说明干细胞在临床治疗上的应用。_ _。答案突破考点提炼方法对位训练1B对位训练2(1)遗传特性快遗传信息(2)微生物(3)生根细胞分裂素2,4D(4)逐渐下降先增加后下降不能(5)降低对位训练3(1)不能，不同种的植物间存在生殖隔离(2)植物组织培养细胞全能性原生质体融合高尔基体脱分化有丝分裂(3)六(4)e对位训练4 (1)动物胚胎或幼龄动物的器官、组织(2)剪碎组织胰蛋白(或胶原蛋白)使细胞与培养液充分接触(3)葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清10原代培养(4)胰蛋白酶
