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1、一、目的与要求 学习并掌握观察放线菌形态的基本方法。初步了解放线菌的形态特征。观察酵母菌的形态及出芽生殖方式，学习鉴别酵母菌死活细胞的方法。掌握酵母菌的形态特征及其与细菌的区别。,二、基本原理1、放线菌形态 放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。常见放线菌大多能形成菌丝，紧贴培养基表面或深入培养基内生长的叫基内菌丝，基内菌丝生长到一定阶段向空中生长出气生菌丝，并进一步分化产生孢子丝及孢子。插片法是将放线菌接种在琼脂平板上，插上灭菌盖玻片后培养，使放线菌菌丝沿着培养基表面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻上。观察时，轻轻取出盖玻片，置于载玻片上直接镜检，这种方法可观察到放线菌自然
2、生长状态下特征，而且便于观察不同生长期的形态。,二、基本原理2、酵母菌形态观察和死活细胞鉴别 酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，其大小通常比常见细菌大几倍甚至十几倍。大多数酵母以芽殖、少数以裂殖进行无性繁殖；有性繁殖则通过结合产生子囊孢子。美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则分别呈蓝色和淡蓝色。,三、实验器材1、菌种：链霉菌、酿酒酵母、裂殖酵母、假丝酵母2、染色剂：0.05%吕氏碱性
3、美蓝染色液 3、仪器或其他用具：载玻片、生理盐水、酒精灯、接种环、盖玻片、显微镜、擦镜纸、滤纸等,四、操作步骤1、放线菌形态用镊子小心拔出盖玻片 擦去背面培养物将有菌的一面盖玻片朝上 置于干净的载玻片上 镜检操作要点：宜用略暗光线观察。先用低倍镜找到适当视野，再换高倍镜观察。,四、操作步骤1、酵母菌形态观察和死活细胞鉴别1）在载玻片上滴加0.05%吕氏碱性美蓝染色液 挑取少许酵母菌，与染液混匀，盖上盖玻片 立刻镜检 放置3min后镜检 放置10min后再次镜检，观察颜色变化操作要点：染液不宜过多或过少，否则影响观察。盖玻片不宜平着放下，以免产生气泡影响观察。先用低倍镜找到适当视野，再换高倍镜观察。,五、实验数据及处理结果 1、绘图说明你所观察到的放线菌的主要形态特征。2、绘图说明你所观察到的酿酒酵母菌、假丝酵母的形态特征，及出芽方式。3、绘图说明你所观察到的裂殖酵母菌的形态特征，及无性和有性繁殖方式。,六、思考与讨论1、镜检时，你如何区分放线菌的基内菌丝和气生菌丝。2、在显微镜下，酵母菌与细菌有何异同？下次实验项目：霉菌的形态观察注意：带上镊子和解剖针,链霉菌,基内菌丝,孢子丝,气生菌丝,酿酒酵母,假丝酵母,子囊,子囊孢子,芽细胞,裂殖,
