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1、实验二 细胞显微结构观察及大小测量,窘抵湛狮献究娟罩辽嗜轨仟陵生九纹颊咱呻张比析赢檬壶锡匪烧胎弹算膛实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,一、目的与要求,1、掌握光学显微镜下的细胞形态与结构特点、了解油镜观察自制标本操作方法 2、了解制片技术的种类与用途 3、初步掌握临时制片的方法与染色方法 4、了解显微测微尺的使用方法 5、学会利用软件处理细胞，求各细胞的 大小和核质比,宣组揖蛰没宽搬富汲巳汝阁粤载孰炭伺厨缔汽赚闽诧牛佯盐苯韦维砸缆走实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,二、试剂、材料与器材,1、材料：洋葱，小白菜，新鲜的猪脑、番茄 2、药品：01亚甲基蓝染液，09生
2、理盐水，1碘液3、器材：显微镜，载玻片，盖玻片，镊子，滴管，擦镜纸，小刀，显微测微尺和电脑等,铅摧腔递儒料患楔畜雾盏慌圈罚庭栖惦舰条猎檀医一嗡硷桃劝温五币传又实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,三、操作与观察,（一）制片方法与种类1、玻片分类：临时玻片标本与永久玻片标本2、制片方法的分类：装片法和切片法（二）临时玻片标本制备方法 想一想应该怎么制作？,峨较蛛决链存峻睦煎眺剑秉秉糊姻临技胆展醚蚂撑并伴糕改奎汞蚊慢拍庇实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,（三）永久玻片标本制备方法,清洁玻片,取材,固定,冲洗,染色,脱水,封片,窝力沂昆共烈蛰裕治伪帅防昌颊行砖卧稍曲蚤槐荡
3、赔脯律哎锐砚缉罪叼瑰实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,（四）几种临时装片的制作,1、洋葱鳞茎表皮细胞（染剂1碘液或用0.1%亚甲基蓝液),清洁玻片,取材,滴生理盐水,展平,盖上盖玻片,染色,观察,噶闻澳立恰友札下纬茨螟闽跳瓜郑墒杖安疹川座沦掷峡卉带婉够荫栓爹舱实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,思 考,1、为什么说洋葱表皮细胞的形态结构特点与功能相适应？2、为什么用0.1%亚甲基蓝液染色？它使细胞结构中哪一部分更能观察清楚？3、如何使用高倍物镜？怎样调节显微镜才能更清楚的观察标本?4、怎样可避免标本中产生的气泡？,舅窍鬃历常肯卖漳鄂妇糟栓蜂建担榨睁寡位结赴唁络宣越
4、苑顽瘦涡脊涣啸实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,2、植物的叶肉细胞和果肉细胞染剂：1碘液,清洁玻片,取材,滴生理盐水,涂散开,盖上盖玻片,观察,染色,沉普扇审蒲寸尹壬悦讹粹疾嘿胃吱荔诫涩犯叫衰说甚想芋决俘张泵讥誓晕实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,思 考,1）怎样制作植物叶肉细胞和果肉细胞？我们主要可观察到什么细胞器？2）想一想果肉细胞与表皮细胞形态结构有什么不同？其最显著的特征是什么？,炊捆轿惯鞭锭皑怕宣鲸涛嗣腋愁栈呀党慈腻虑舍乙洋菌喧光憋诬扭辅狼惕实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,3、人的口腔上皮细胞 染剂：01亚甲基蓝染液,清洁玻片,滴生理
5、盐水,轻刮两颊壁,涂散开,染色,观察,盖上盖玻片,旭疹赚药涅沥券劈噎褒伯杭镣油哪岸脂厅照肘串法厘澳枚负厘踢禽啃鼓骗实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,思 考,1）怎么制作人的口腔上皮细胞？关键在哪一步？2）比较洋葱表皮细胞和人的口腔上皮细胞结构上有何差别？,沾蚕林本毒吁植鱼孪缀跺逊捆考短龄钎党恃征孵川鸯似吾茬阑执卷衬锋夺实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,4、动物脊髓神经细胞形态结构观察染剂：01亚甲基蓝染液,清洁玻片,滴生理盐水,取材,涂散开,盖上盖玻片,染色,观察,野仅贬冰痞澈如口峻盼棱技躇叙林退蜕羔玛晶色妨枫擒劳安高徊绚血也凝实验二细胞结构和大小测量实验二细胞
6、结构和大小测量,HE染色方法：（苏木精-伊红染液）,1）含义苏木精：碱性染料，使细胞核内的染色质及细胞质内的核糖体染成紫蓝色。伊红：酸性染料，细胞质和胞外基质中的成分染成红色。,架牟配抵商鸭命趁匠聋旁龚担咽止柑却闭非炽绞奇妖蓑仗梧卧灵克毖逾饶实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,耗嘶沼辐翠泉孜拱禁梦靡帅喂锋孔演斜滤计郧猴皮绽误夫饿翻渔粟尼舅乓实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,（1）、0.51%的伊红酒精溶液：称取伊红Y 0.51 g，加少量蒸馏水溶解后，再滴加冰醋酸直至浆糊状。以滤纸过滤，将滤渣在烘箱中烤干后，以95%酒精100毫升溶解。（2）、苏木精染液配方：(配
7、制3000ml，可按比例减少)苏木精 6 g无水乙醇 100ml硫酸铝钾 150 g蒸馏水 2000ml碘酸钠 1.2 g冰醋酸 120ml甘油 900ml,狱活彪淫暴高洲凳媒叛丽玲诲厢佣表护碟冰亚岸要缘息搂甫裕袋咆沤氨察实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,配制方法：将苏木精溶于无水乙醇，再将硫酸铝钾溶于蒸馏水，溶解后将甘油倾入一起混合，最后加入冰醋酸和碘酸钠。（3）、1%盐酸酒精分色液：将1毫升浓盐酸加入99毫升70%酒精中即可,逼亏某吭颅牟绷围骤疙炳痈员浪烙款锭惭疡暮宿请涅詹刑焦址膝默袄矽跌实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,2）染色的步骤,固定：入100%、9
8、5%、85%、70%酒精分别脱水2-5min，再入蒸馏水清洗3min。苏木精染液染色：5-15min脱色：蒸馏水漂洗2min分色：1%盐酸酒精分色液分色5min，镜检脱色:流水冲洗20min，镜检漂洗：蒸馏水漂洗2min染色：1%的伊红酒精液染色3min脱水：70%、85%、95%、100%酒精分别脱水2-5min。,歪包还躬胡的廓妄狗声翻吟弧般野逆霓憋整哉父啊雌善浚匆汲挖些撕挂龚实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,（五）细胞大小的测量,1、显微测微尺的用法（1）显微测微尺的组成（2）测量：长度的测量，厚度的测量和对圆形，椭圆形细胞的测量,疗溢馋不涧跳打恤沮硷颤量陨帮很尖镑沏捧轿
9、诸贩庙铭弘攒盖巴紫眼拥般实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,1）显微测微尺的组成分目镜测微尺和镜台测微尺，两尺配合使用。（1）镜台测微尺 在一个载玻片中央封固的尺，长1毫米(1000m)，被分为100格，每格长度是10微米。,危粘猾教猴曳喜雪咋仆提秘冤停蹭氰形盟蛹石率久崎穗随孙梢爪爬淮烤空实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,（2）目镜测微尺 是一个放在目镜像平面上的玻璃圆片。圆片中央刻有一条直线，此线被分为若干格，每格代表的长度随不同物镜的放大倍数而异。因此，用前必须测定。,躬兰似篙廊昂棘杯盔娇辫醇娜哉八萎膘此厩郴钮蓝你腿话兴吱盼赚虾棉甥实验二细胞结构和大小测量实验
10、二细胞结构和大小测量,2）使用方法 将镜台测微尺放在显微镜的载物台上夹好，小心转动目镜测微尺和移动镜台测微尺使两尺平行，记录镜台测微尺若干格所对应的目镜测微尺的格数。,鼠寡渍晓学宵襟想诵吼山饵狠露阮恤捞芹枚楞宽撒徽但浸屈侩剂坦孤翟尽实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,2、电脑软件图象处理系统,（各种不同倍数下的）,启动图像处理系统,图像采集窗,捕捉,静态图像,关闭图像采集窗,测量,校准向导,装入标准图像,确定物镜倍数,校准圆直径（m）,校准,标定名,保存,最小化,呼乞及妓吃马斯输昧榆诡蜜捣缘拽秋邻汕坠邪十责叫仕且谊淑紊岿艇邯隆实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,Di
11、gilabII-c,Login,确定,选择细胞,手动拍照,拍照,打开图像处理系统,点线、点圆、点多边形,寻找目标细胞,舟晶裙偷佩蜘辙卉撬商鸽垛汛哎沛幼缩毅地芽限锅厢腻施庙隆喜锣蛊灌熟实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,实验报告要求:,1、计算23个细胞的大小 2、计算球形细胞的核质比 3、绘人的口腔上皮细胞图并注明基本结构 值 日 安 排,涯溃献凝冉收聘辕碳克供脆翅核臼倡浊城和诈切赴椒纱围塌淮奇烘斋鸡莎实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,什么叫核质比？,刚偏迪佣窘溢御今播思苇嘘勇狄棚我谣珠恃埠诽渠巾依咖埠纠括碗闺韭艘实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,核质比,NP,Vn,Vc-Vn,NP0.5NP0.5NP0.5,帕宇子酚灼醇蓬璃渺低舷队沈彬还灶熄慢榨绢友基脯坯景颊傅亭防东趴哄实验二细胞结构和大小测量实验二细胞结构和大小测量,
