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1、,第三章药品制造过程,大学便民网,3.1药典(pharmacopoeia)是一个国家记载药品标准、规格的法典，一般由国家卫生行政部门主持编纂、颁布实施，国际性药典则由公认的国际组织或有关国家协商编订。,大学便民网,药品标准是药品现代化生产和质量管理的重要组成部分，是药品生产、供应、使用和监督管理部门共同遵循的法定依据。,大学便民网,药品质量的内涵包括三方面：真伪、纯度、品质优良度。三者的集中表现是使用中的有效性和安全性。因此，药品标准一般包括以下内容：法定名称、来源、性状、鉴别、纯度检查、含量（效价或活性）测定、类别、剂量、规格、贮藏、制剂等等。,大学便民网,中国药典(Ch.P)始自1930年
2、出版的中华药典。1949年中华人民共和国成立后，已编订了中华人民共和国药典（简称中国药典）1953、1963、1977、1985、1990、1995、2000、2005年版共 八个版次。,大学便民网,2005年版药典的制订 2002 年10 月经国家药品监督管理局（2003 年9月更名为国家食品药品监督管理局）批准，第八届药典委员会成立。,大学便民网,2002 年10 月召开第八届药典委员会全体大会及执行委员会第一次会议，通过了本届药典委员会提出的“中国药典 2005 年版设计方案”。决定将中国生物制品规程并人药典，设为药典三部；并编制首部中成药临床用药须知。,大学便民网,中国药典 2005
3、年版经过第八届药典委员会执行委员会议审议通过，12 月报请国家食品药品监督管理局批准颁布，于2005 年1 月出版发行，2005 年7 月1 日起正式执行。,大学便民网,本版药典收载的品种有较大幅度的增加。共收载3214 种，其中新增525 种。药典一部收载品种1 146 种，其中新增154 种、修订453 种；药典二部收载1967 种，其中新增327 种、修订522 种；药典三部收载101 种，其中新增44 种、修订57 种。,大学便民网,本版药典在主任委员的积极倡导下，对药品的安全性问题更加重视。药典一部采用原子吸收和电感耦合等离子体质谱法增加了有害元素（铅、镉、砷、汞、铜）测定法，并规定
4、了有害元素的限度；药典一部还增加了中药注射剂安全性检查法应用指导原则。,大学便民网,英国药典(BP)自1864年第一版起，已出至第14版。现行版为1988年版。该药典从1980年版起改为两卷本。第一卷收载绪论，通则和原料药品以及红外对照图谱等；第二卷收载各类药品制剂、血液制品、免疫制品、放射性药品、手术用品以及附录和索引等。1988年版收载各类药品2100种,其中有495种为欧洲药典已收载的品种。,大学便民网,美国药典(USP)创始于1820年,迄今已出至第22版。现行版为1990年版。该药典自1980年版起与国家药方集(NF)合并。USP收载原料药品及其制剂,而NF收载各类辅料和一些非处方药
5、。根据美国药典委员会1975年第3号决议,凡已被批准投放市场的药物均应载入药典。现行版美国药典(USP XXII-NF XVIII)收载各类药品3204种，是目前世界上规模最大的一部药典。,大学便民网,欧洲药典(Ph.Eur)1963年欧洲共同体各国共同商定编订欧洲药典，于1969年开始出第一版,分3卷陆续出版发行，其法文版和英文版为法定版本。1980年开始出第二版,并陆续分期出版，截止1990年6月已分期出至第14分册。该版药典共收载药品704种。,大学便民网,国际药典(Ph.Int)由联合国世界卫生组织主持编订。第一版于1951和1955年分两卷用英、法、西班牙文出版，于1959出版增补本
6、。第二版于1967年用英、法、俄、西班牙文出版。现行版为第三版，于1979、1981、1988年、1994、2003分5卷出版。,大学便民网,第1卷收载42项分析测试方法。第2、3两卷共收载药品383种。第4卷收载有关试验、方法的信息，以及药品原料、赋形剂的一般要求和质量说明，以及剂型。第5卷收载制剂通则以及药品原料和片剂的质量标准。,大学便民网,马丁代尔大药典（Martindale the Extra Pharmacopoeia）由英国大不列颠药物学会(The Pharmaceutical Society of Britain)的药物科学部(Department of Pharmaceuti
7、cal Science)所属的药典出版社(The Pharmaceutical Press)编辑出版的一部非法定药典。因其编者Milliam Martindale而得名。,大学便民网,全书分为三个部分，第一部分为医院制剂，按药物作用类别分类；第二部分为辅助药物部分，按字顺排序；第三部分为专利药物部分。书末附有厂商索引、药物临床用途索引和总索引。从1883年第一版起最新版为2007年的第35版。,大学便民网,该数据库收录了5,500多篇药物专论、6万种专利制剂、600种疾病治疗顾问、200篇草药专论、5000种草药制剂和32个国家的10,900多家生产商的信息。可方便快捷地检索药品的用法、副作用
8、、分子式、同义药名、制造商及商品名信息。,大学便民网,3.2优良药品制造规范指南 GMP（Good Manufacturing Practices for Drugs）,大学便民网,GMP的历史 是社会发展中医药实践经验教训的总结和人类智慧的结晶。在此之前，人类社会经历了12次较大药物灾难，特别是20世纪最大的药物灾难“反应停”事件后引起公众的不安和对药品监督的关心。,大学便民网,反应停于1953年首先由西德一家制药公司合成，1956年进入临床并在市场试销，1957年获西德专利，这种药物治疗早孕期间的孕吐反应，有很好的止吐作用，对孕妇无明显毒副作用，相继在51个国家获准销售。,大学便民网,从1
9、956年反应停进入市场至1962年撤药，全世界30多个国家和地区(包括我国台湾省)共报告了海豹胎1万余例，各个国家畸形儿的发生率与同期反应停的销售量呈正相关，如在西德就引起至少6000例畸胎，英国出生了5500个这样的畸胎，日本约1000余例，台湾省也至少有69例畸胎出生。,大学便民网,只有美国，由于官方采取了谨慎态度，没有引进这种药，因此，除自己从国外带入服用者造成数例畸胎外，基本没有发生这样病例。,大学便民网,反应停所造成的胎儿畸形，成为20世纪最大的药物导致先天畸形的灾难性事件，至今仍有法律纠纷。反应停是第一个被明确为人类致畸的药物。此后全世界进行了大规模的药物致畸的研究，结果发现了不少
10、药物有不同程度的致畸作用。,大学便民网,反应停对人与动物的一般毒性极低，如服用14克并不使人死亡。但其可选择性地作用于胚胎，对胚胎的毒性明显大于母体，其对胎儿的致畸作用可高达50%一80%，如在妊娠第3-8周服用，其后代畸形发生率可高达100%，对人胚胎的致畸剂量为1毫克/千克。,大学便民网,GMP最初由美国坦普尔大学6名教授编写制订,1963年颁布成为法令,1967年WHO国际药典的附录中收载,1969年第22届世界卫生会，WHO建议各国采用GMP制度,1973年，日本提出了自己的GMP，1974年颁布试行,1975年WHO正式公布GMP,1977年第28届世界大会WHO确定GMP为法规,1
11、978年，美国修订GMP,1980年日本正式实施GMP,到目前为止，已有100多个国家实行了GMP制度。,大学便民网,中国GMP认证的历史,大学便民网,过去“三检三把关”：三检：自检、互检、专职检验 三把关：把好原、辅、包材关，把好中间体质量关 把好成品质量关。,1982年中国医药工业公司制订了药品生产管理规范（试行本）,1985年，经修订后由国家医药管理局推行颁布 药品生产管理规范实施指南（85年版）,1988年 卫生部颁布药品生产质量管理规范,大学便民网,1992年，卫生部修订颁布药品生产质量管理规范,1993年中国医药工业公司修订药品生产管理规范实施指南,1995年，开始GMP认证工作。
12、,1998年，国家药品监督管理局颁布98修订版GMP,同时规定在3到5年内，血液制品、粉针剂、大输液、基因工程产品和小容量注射剂等剂型，产品的生产要达到GMP要求，并通过GMP认证。,实施GMP工作与许可证换发及年检相结合顺规定期限内未取得“药品GMP证书”的企业或车间，将取消其相应生产资格。,大学便民网,实施GMP目的1.提高制药企业的科学管理水平，促进企业人员素质提高和增强质量意识，保证药品质量。2.为制药企业提供一套药品生产和质量所遵循的基本原则和必需的标准组合。3.有利于药品的出口。4.国家限期的强制性的认证。,大学便民网,影响产品质量的五大因素人（Human）机器设备（Machine
13、）物料（Material）方法（Mwthod）环境（Environment）,大学便民网,GMP认证是全面质量管理在制药行业的体现，第十八条规定：“国家标准、行业标准分为强制性标准和推荐性标准。而药品标准属于强制性标准。,大学便民网,国家药品监督管理局是代表国家对药品独立地进行第三方公正评价的GMP认证机构。迄至1998年6月31日末取得认证的企业，药品监督管理部门将不再受理新药生产的申请。,大学便民网,3.2.4 GMP认证的内容1、机构与人员2、厂房与设施3、设备4、物料 5、卫生6、验证,大学便民网,7、文件 8、生产管理9、质量管理 10、产品销售与收回 11、不良反应与用户投诉 12
14、、自检,大学便民网,一、机构与人员检查项目*03010701共17项其中关键项目8项，一般项目9项,大学便民网,1、GMP的机构人员原则：人员是建立并保持良好的质量体系，实施GMP的第一要素。1）、足够的具有实践经验的合格人员（具有相应资力、经过培训）2）、明确职务分工及自身职责（职务授权、订立书面岗位职责）3）、所有人员都应理解GMP的原则（GMP教育、培训）,大学便民网,2、GMP对企业配备各级管理人员的资历要求：（*0401）主管生产和质量的企业负责人 具有医学、药学或相关专业大专学历；（相关理工科专业，如：化学、生物学、化学工程、生物工程等）具有药品生产和质量管理经验；（管理经验一般应
15、具有3年以上药品生产管理或质量管理实践）,大学便民网,（*0403）对中药生产企业主管生产和质量管理负责人的特别要求：具有中药专业知识（具备中药学中专及大专学历、经国家认可院校半年以上中药专业培训及资质、中药师、执业中药师）。,大学便民网,（*05010）企业生产部门和质量管理部门负责人资历要求：具有医学、药学或相关专业大专以上学历（相关专业同 上）；具有药品生产和质量管理实践经验（3年以上管理工 作）；具有判断处理实际问题的能力,大学便民网,（*0402）对生物制品企业、生产部门、质量管理部门负责人增加的特别要求：具有相应专业知识学习（细菌学、病毒学、生物学、分子生物学、生物化学、免疫学、医
16、学、药学）。具有丰富实践经验（3年以上生物制品生产、质量管理工作经验）。,大学便民网,（*0502）生产部门、质量管理部门负责人为关键人员必须为全职人员，不得兼职、不得相互兼任。,大学便民网,2、GMP对企业各类技术人员的知识技能要求：各类技术及工作人员应经相应专业技术培训后上岗 1）、（0603）对操作人员要求经基础理论及实际操作培训并考核合格后上岗。（有培训记录及考核合格记录）2）、（0604）对原料有生产人员要求经过原料药生产工艺知识特定操作技能培训并考核合格后上岗。（有培训记录及考核合格记录）,大学便民网,3）、（0605）对中药企业验收人员要求具有识别药材真 伪、优劣的技能，并经相关
17、知识（中药鉴定学、中药炮制学中与本企业有关药材的内容培训、药学中专学历视为培训合格）培训并考核合格证上岗。（有培训记录及考核合格记录）4）、（*0606）对QC人员要求：经药监部门认可的技术部门（如药检所）培训考核合格后上岗。（省、市级中药专业；分析检验专业大、中专学历视为合格；中学学历及其它专业人员须经省、市药检所培训1个月以上；有培训记录及考核合格证书）,大学便民网,5）、（0607）对特殊要求药品生产及检验人员的特别要求：须经所生产特殊药品生产知识及技能、安全防护知识及技能的专门培训并考核合格后上岗。（有培训记录及考核合格记录）6）、（0608）对生物制品企业人员的特别要求：须经所生产生
18、物制品生产知识及技能、安全防护及技能的专门培训并考核合格后上岗。（有培训记录及考核合格记录）,大学便民网,3、企业应建立有对各级员工的培训制度、培训计划和培训档案。1）、（*0602）企业负责人及各级管理人员应经药品管理法律、法规定期培训，有培训计划及培训记录。2）、（0701）企业全体员工应经GMP规范的定期培训和考核，有培训计划、培训记录及考核记录。3）、（0609）对所有进入洁净区人员须定期进行卫生和微生物学知识，洁净生产作业的培训及考核，有培训计划、培训记录、考核记录。,大学便民网,二、厂房与设施共72项，其中关键项目32项，一般项目40项检查项目08013003,大学便民网,大学便民
19、网,大学便民网,大学便民网,大学便民网,大学便民网,大学便民网,大学便民网,1、GMP的厂房设施原则：1）、空间面积适应生产需要，布局合理。2）、能有效控制差错和污染。3）、便于维护和清洁。,大学便民网,（0801）企业的生产环境应整洁；厂区地面、路面及运输等不应对药品生产造成污染；生产、行政、生活和辅助区总体布局应合理，不得互相妨碍。,大学便民网,（0901）厂房应按生产工艺流程及所要求的空气洁净度级别进行合理布局。厂房内按工艺中物流最短路线，顺流布局。辅助间位置合理，洁净生产区的级别划分应符合GMP附录的要求，布局尽可能做到“同一级别集中在同一个区，同一个级别在同一个平面。”,大学便民网,
20、（0902）同一厂房内的生产操作和相邻厂房之间的生产操作不得相互防碍。厂房按洁污合理分隔厂房内应按工序合理分隔,大学便民网,（1001）厂房应有防止昆虫和其它动物进入的有效设施。厂房直通外界的门、窗设有防止昆虫、动物进入的有效设施,大学便民网,（1101）洁净室（区）的内表面应平整光滑、无裂缝、接口严密、无颗粒物脱落、耐受清洗和消毒。（1102）洁净室（区）的墙壁与地面的交界处应成弧形或采取其他措施，以减少灰尘积聚和便于清洁。,大学便民网,（1601）洁净室（区）的窗户、天棚及进入室内的管道、风口、灯具与墙壁或天棚的连接部位应密封。（1101）对洁净室（区）内表面要求：墙面、地面平整无缝、光滑
21、耐磨、易清洁。,大学便民网,（1103）中药生产的非洁净厂房地面、墙壁、天棚等内表面应平整，易于清洁，不易脱落，无霉迹。,大学便民网,（1201）生产区应有与生产规模相适应的面积和空间用以安置设备、物料，便于生产操作，避免差错和交叉污染。,大学便民网,（1301）洁净室（区）内各种管道、灯具、风口以及其他公用设施应易于清洁。其他公用设施，如工具、模具、洁具、容器、物架（柜），其材质及选型应易于清洁（坐橙、地架、台车、衣柜、工具柜等不易清洁，尽可能不用，特别是无菌区更要严格控制使用）,大学便民网,（1401）洁净室（区）应根据生产要求提供足够的照明。主要工作室的照度应达到300勒克斯；对照度有特
22、殊要求的生产部位应设置局部照明。厂房应有应急照明设施。,大学便民网,（1501）进入洁净室（区）的空气必须净化，并根据生产工艺要求划分空气洁净度级别。药品生产洁净室（区）的空气洁净度划分为四个级别：,大学便民网,（1502）洁净室（区）空气的微生物数和尘粒数应定期监测，监测结果应记录存档。洁净室（区）在静态条件下检测的尘埃粒子数、浮游菌数或沉降菌数应符合规定。（1503）非最终灭菌的无菌制剂应在百级区域下进行动态监测微生物数。,大学便民网,（1504）洁净室（区）的净化空气如可循环使用，应采取有效措施避免污染和交叉污染。（1505）产尘量大的洁净室（区）经捕尘处理不能避免交叉污染时，其空气净化
23、系统不得利用回风。,大学便民网,（1506）空气净化系统应按规定清洁、维修、保养并作记录。（1602）空气洁净度等级不同的相邻房间（区域）之间或规定保持相对负压的相邻房间（区域）之间的静压差应符合规定，应有指示压差的装置，并记录压差。（1603）空气洁净度等级相同的区域内，产尘量大的操作室应保持相对负压。,大学便民网,（1701）洁净室（区）的温度和相对湿度应与药品生产工艺要求相适应。无特殊要求时，温度应控制在18-26，相对湿度应控制在45%-65%。（1801）洁净室（区）的水池、地漏不得对药品产生污染，100级洁净室（区）内不得设置地漏。,大学便民网,（1901）不同空气洁净度级别的洁净
24、室（区）之间的人员和物料出入，应有防止交叉污染的措施。（1902）10,000级洁净室（区）使用的传输设备不得穿越空气洁净度较低级别区域。（1903）洁净室（区）与非洁净室（区）之间应设置缓冲设施，洁净室（区）人流、物流走向应合理。,大学便民网,（2501）与药品直接接触的干燥用空气、压缩空气和惰性气体应经净化处理，符合生产要求。（2601）仓储区应保持清洁和干燥，应安装照明和通风设施。仓储区的温度、湿度控制应符合储存要求，按规定定期监测。（2602）如仓储区设物料取样室，取样环境的空气洁净级别应与生产要求一致。如不在取样室取样，取样时应有防止污染和交叉污染的措施。,大学便民网,（2801）质
25、量管理部门根据需要设置的实验室、中药标本室、留样观察以及其他各类实验室应与药品生产区分开。（2802）生物检定、微生物限度检定和放射性同位素检定等应分室进行。（2901）有特殊要求的仪器、仪表应安放在专门的仪器室内，应有防止静电、震动、潮湿或其它外界因素影响的设施。,大学便民网,（3001）实验动物房应与其它区域严格分开，实验动物应符合国家有关规定。（3002）用于生物制品生产的动物室、质量检定动物室应与制品生产区分开。（3003）生物制品所使用动物的饲养管理要求，应符合实验动物管理规定。,大学便民网,三、设备 GMP的设备原则 1）、精度适应生产要求（差错风险最低）。2）、便于进行有效清洁和
26、维护（避免污染）。3）、不对产品产生污染。,大学便民网,（3101）设备的设计、选型、安装是否符合生产要求，易于清洗、消毒或灭菌，是否便于生产操作和维修、保养，是否能防止差错和减少污染。,大学便民网,（3102）灭菌柜的能力是否与生产相适应，是否具有自动监测及记录装置。1.根据灭菌柜的容量计算理论批次量和实际的生产批量，检查能否在规定的时间内完成灭菌。2.灭菌柜是否有自动监测和记录装置。3.自动监测记录是否纳入批生产记录。,大学便民网,3201与药品直接接触的设备表面是否光洁、平整、易清洗或消毒、耐腐蚀，不与药品发生化学变化或吸附药品。3202洁净室（区）内设备保温层表面是否平整、光洁、无颗粒
27、性物质脱落。3204与药液直接接触的设备、容器具、管路、阀门、输送泵等是否采用优质耐腐蚀材质，管路的安装是否尽量减少连（焊）接处。,大学便民网,（3202）洁净室（区）内设备保温层表面应平整、光洁，不得有颗粒性等物质脱落。（3203）无菌药品生产中与药液接触的设备、容器具、管路、阀门、输送泵等应采用优质耐腐蚀材质，管路的安装应尽量减少连接或焊接。（3204）无菌药品生产中过滤器材不得吸附药液组份和释放异物，禁止使用含有石棉的过滤器材。,大学便民网,（3205）生产过程中应避免使用易碎、易脱屑、易长霉器具；使用筛网时应有防止因筛网断裂而造成污染的措施。（3206）原料药生产中难以清洁的特定类型的
28、设备可专用于特定的中间产品、原料药的生产或贮存。,大学便民网,（3208）设备所用的润滑剂、冷却剂等不得对药品或容器造成污染。（3301）与设备连接的主要固定管道应标明管内物料名称、流向。,大学便民网,（3401）纯化水的制备、储存和分配应能防止微生物的滋生和污染。（3402）注射用水的制备、储存和分配应能防止微生物的滋生和污染，储罐的通气口应安装不脱落纤维的疏水性除菌滤器，储存应采用80以上保温、65以上保温循环或4以下保温循环。生物制品生产用注射用水应在制备后6小时内使用；制备后4小时内灭菌72小时内使用。,大学便民网,（3403）储罐和输送管道所用材料应无毒、耐腐蚀，管道的设计和安装应避
29、死角、盲管，应规定储罐和管道清洗、灭菌周期。（3404）水处理及其配套系统的设计、安装和维护应能确保供水达到设定的质量标准。,大学便民网,（3501）用于生产和检验的仪器、仪表、量具、衡器等，其适用范围和精密度应符合生产和检验要求，应有明显的合格标志，应定期校验。（3601）生产设备应有明显的状态标志。,大学便民网,（3602）生产设备应定期维修、保养。设备安装、维修、保养的操作不得影响产品的质量。（3603）不合格的设备如有可能应搬出生产区，未搬出前应有明显状态标志。（3604）非无菌药品的干燥设备进风品应有过滤装置，出风品应有防止空气倒流装置。,大学便民网,（3701）生产、检验设备应有使
30、用、维修、保养记录，并由专人管理。（3702）生产用模具的采购、验收、保管、维护、发放及报废应制定相应管理制度，应设专人专柜保管。,大学便民网,药品生产企业GMP认证程序一、办理程序：1、申请2、材料审查3、受理4、现场检查5、报省局认证,大学便民网,二、范围：三、申报材料：1、药品生产许可证、企业法人营业执照复印件；2、自查报告；3、组织机构图；4、药品生产企业负责人、部门负责人简历；药学及相关专业技术人员、技术工人登记表；5、生产剂型和品种表；,大学便民网,6、企业周围环境图、总平面图、仓储平面布置图及质量检验场所平面布置图；7、药品生产车间概况及工艺布局平面图；空气净化系统送、回风平面布
31、置图；工艺设备平面布置图；8、申请认证剂型或品种的工艺流程图；9、验证情况；仪器、仪表校验情况；10、药品生产、质量管理文件目录；11、省辖市药品检验所出具的洁净室（区）性能检测报告；12、提供消防、环保证明,大学便民网,四、承诺时限：1、材料审查：收到真实完整的申请材料5个工作日内完成材料审查。2、受理：通过材料审查时即为受理日。3、现场检查：受理后5个工作日内，组织现场检查。4、上报省局：通过现场检查的5个工作日内，报省局申请认证。,大学便民网,药品制造车间,大学便民网,、洁净间、清洁、净化、消毒（CDS）、制造用水、文件,大学便民网,、洁净间.基本概念洁净间（区）（cleanroom(a
32、rea)）：需要对尘粒及微生物含量进行控制的房间（区域）。其建筑结构、装备及其作用均具有减少对该房间（区域）内污染源的介入，产生和滞留的功能。,大学便民网,空气净化（airpurification）：去除空气中的污染物质，使空气洁净的行为。洁净度（cleanliness）：洁净环境内单位体积空气中含大于或等于某一粒径的悬浮粒子的允许统计数。,大学便民网,局部空气净化：仅使室内工作区域特定局部空间的空气含悬浮粒子浓度达到规定的空气洁净度级别，这种方式称局部空气净化。,大学便民网,药品生产洁净室（区）的空气洁净度划分为四个级别：,大学便民网,.药品生产环境空气洁净度要求1、最终灭菌药品：100-1
33、0万级2、非最终灭菌药品：10万级-30万级3、其他灭菌药品：1万级供角膜创伤或手术用滴眼剂的配制和灌装。4、洁净工作服：10万级以上区域的洁净工作服应在洁净室（区）内洗涤、干燥、整理，必要时应按要求灭菌。,大学便民网,5、原料药生产环境空气洁净度要求（1）法定药品标准中列有无菌检查项目的原料药，其暴露环境应为1万级以下局部100级。（2）其他原料药的生产暴露环境应不低于30万级。6、生物制品生产环境空气洁净度要求：100-10万级。7、放射性药品生产环境空气洁净度要求：同灭菌药品、非灭菌药品和原料药中的规定；放射免疫分析药盒各组分的制备在30万级条件下进行。,大学便民网,.空气净化技术空气净
34、化不仅要除去空气中的生物粒子，也要除去其他各种颗粒，主要靠物理作用而不是靠化学方法。空气净化技术的目的是通过采用一整套洁净技术创造和保持一定空间内空气达到规定的洁净度。,大学便民网,.整体净化：可分为层流型和湍流型。层流是指空气由一侧全面地以同速流向另一侧，使室内产生的尘粒或细菌不会向四周扩散而被平推出室外，而达到好的除菌效果。,大学便民网,（1）高效过滤除菌技术：空气洁净主要靠高效或超高效过滤设备（高效空气过滤器HEPA)，向特定的环境内输送洁净空气并能保持空气的洁净度。过滤洁净原理：网截阻留；筛孔阻留；静电吸引阻留；惯性碰撞和布朗运动阻留。因此，过滤洁净技术是一种综合作用的结果。,大学便民
35、网,大学便民网,大学便民网,（2）滤材结构：生物洁净室所用滤材级别多数为高效或超高效滤材，所用滤材有：玻璃棉制滤材、高级纸浆制滤材、石棉纤维滤材、过氯乙烯纤维滤材等。高效滤材对空气中0.5m的颗粒的阻留率能达到90%99%，超高效滤材可阻留0.3 m的颗粒99.9%以上。,大学便民网,局部净化（1）洁净层流罩：洁净层流罩是医院局部空气净化装置。一般可构成垂直层流方式，四周用透明围幕。整个罩内可保持高洁净度（万级至百级）空气。这种洁净层流罩可用于免疫功能低下病人的治疗保护，所以也称无菌病床层流罩。（2）净化操作台：采用水平或垂直层流方式净化箱体内的空气，可使操作台内净化达到很高级别。,大学便民网
36、,1.4洁净室的设计1、洁净室设计应遵循的原则：远离或隔断污染源；控制污染源扩散或定向扩散；正确利用室内外压差；进出风量平衡。2、医用洁净室基本要求：高效过滤，纵向层流，双缓冲，压力递减。,大学便民网,3、医药行业洁净要求：外窗应双层密封；所有的连接部分均应密封；门应向洁净度高的方向开启；室内水池、地漏不得产生污染，100级内不得设置地漏；人、物出入应有防交叉污染措施；生产高致敏性药物、强毒微生物与芽孢菌制品的区域应相对负压，并有独立的空气净化系统。,大学便民网,1.5人员进出洁净生产区和无菌操作洁净生产区的一般程序：(1)人员进出洁净生产区的程序(2)人员进出无菌操作洁净生产区的程序,大学便
37、民网,（4）进入洁净室（区）的人员不能化妆和佩带饰物，不应裸手操作，当不可避免时，手部应及时消毒。（5）洁净工作服的质地应光滑，不产生静电，不脱落纤维和颗粒性物质。无菌工作服必须包盖全部头发、胡须及脚部，并能阻留脱落物。（6）药品生产人员应有健康档案。直接接触药品的生产人员每年至少体检一次。传染病、皮肤病患者和体表有伤口者不得从事直接接触药品的生产。,大学便民网,1.6污染源知识1、发尘量 发尘主要来自人，占90%左右。在人的发尘量上，由于服装材料和样式的改进，发尘绝对量也不断减少。(1)、材质：棉质发尘量最大，以下依次为棉、的确良、去静电纯涤纶、尼龙。,大学便民网,(2)、样式：大挂式发尘量
38、最大，上下分装型次之，全罩型最少；(3)、活动：动作时的发尘量一般达到静止时间3-7倍；(4)、清洗：用容剂洗涤的发尘量降至用一般水清洗的五分之一。,大学便民网,2、发菌量（）洁净室内当工作人员穿无菌服时：静止时的发菌量一般为10-300个/min.人躯体一般活动时的发菌量为150-1000个/min.人快步行走时的发菌量为900-2500个/min.人（）咳嗽一次一般为70700个/min.人喷嚏一次一般为400062000个/min.人大学便民网,大学便民网,（）穿平常衣服时发菌量330062000个/min.人（）无口罩发菌量:有口罩发菌量1:71:14,大学便民网,2、清洁、净化、消毒
39、清洁:去除脏物(有机、无机物)净化:灭活和去除一些不受欢迎的物质(内毒素、病毒）消毒:破坏和去除活的微生物,大学便民网,2.1制造区的清洁、净化、消毒：2.2加工仪器的清洁、净化、消毒：发酵设备、层析设备（NaOH 1M）,大学便民网,大学便民网,、制造用水 生活用水 纯净水 注射用水 一次水、二次水,大学便民网,注射用水：指符合中国药典注射用水项下规定的水 3.1注射用水的制备注射用水可通过蒸馏法、反渗透法、超过滤器法等获得，各国对注射用水的生长方法作了十分明确的规定，如：美国药典（24版）规定“注射用水必须由符合美国环境保护协会或欧共体或日本法定要求的饮用水经蒸馏或反渗透纯化而得”。,大学
40、便民网,欧洲药典（1997年版）规定“注射用水为符合法定标准得饮用水或纯化水经适当方法蒸馏而得。中国药典（2000年版）规定“本品（注射用水）为纯化水经蒸馏所得的水“。注射用水用纯化水经蒸馏而得是世界公认的首选方法。,大学便民网,大学便民网,大学便民网,.对贮罐的要求：采用不锈钢制作，内壁电抛光并作钝化处理；贮水罐上安装0.2m疏水性的通气过滤器（呼吸器），并可以加热消毒或有夹套；能经受至少121高温蒸汽的消毒；排水阀采用不锈钢隔膜阀；若充以氮气，须装0.2m的疏水性过滤器过滤。,大学便民网,.对管路及分配系统的基本要求管路分配系统的建造应考虑到水在管路中能连续循环，并能定期清洁和消毒。不断循
41、环的系统易于保持正常的运行状态。循环一般流速：ft/s，温度：85。使用前冷却至25。,大学便民网,3.4注射用水系统的运行方式 注射用水系统的运行徐考虑到管道分配系统的定期清洁和消毒，通常有两种运行方式。一种是将水像产品一样作成批号，即批量式运行方式。“批量式”运行方式主要是出于安全性的考虑，因为这种方法能在化验期内将一定量的水份隔开来，直到化验有了结论为止。另一种是连续制水的“直流式”运行方式，可以一边生产一边使用。,大学便民网,3.5注射用水系统的日常管理制水系统的操作、维修规程；关键的水质参数和运行参数的监测计划，包括关键仪表的校准；定期消毒灭菌计划；水处理设备的预防性维修计划；关键水
42、处理设备（包括主要的零部件）、管路分配系统及运行条件便更的管理方法。,大学便民网,、文件（）标准操作程序（SOP）（）制造规格（）制造方案、工艺和包装说明（）记录,大学便民网,4.1 SOP(Standard Operation Procedure):即标准作业程序,就是将某一事件的标准操作步骤和要求以统一的格式描述出来,用来指导和规范日常的工作。SOP的精髓,就是将细节进行量化,用更通俗的话来说,SOP就是对某一程序中的关键控制点进行细化和量化。,大学便民网,4.2 SOP的作用：1.将企业积累下来的技术经验,记录在标准文件中,以免因技术人员的流动而使技术流失;2.使操作人员经过短期培训,快
43、速掌握较为先进合理的操作技术;3.根据作业标准,易于追查不良品产生之原因;4.树立良好的生产形象，取得客户信赖与满意。5.是贯彻ISO精神核心(说，写，做一致)之具体体现，实现生产管理规范化、生产流程条理化、标准化、形象化、简单化。6.是企业最基本最有效的管理工具和技术数据。,大学便民网,4.3 标准操作规程(SOP)的内容 1、生产操作方法和要点；2、重点操作的复核、复查；3、中间产品质量标准及控制；4、安全和劳动保护；5、设备维修、清洗；6、异常情况处理和报告；7、工艺卫生和环境卫生。,大学便民网,4.4制造方案与工艺1、品名；2、成品有效期（可附稳定性考察总结，证明有效期 制订有据可查）
44、；3、产品规格和批量；4、所用原料清单（阐明每一原料的名称、代号和用量，对加工过程中可能消失的物料应作说明）5、最终物料平衡限度；,大学便民网,6、主要设备一览表及说明；7、关键设备的准备（如设备的清洗、组装、校验、灭菌等）方法；8、详细的加工步骤（如物料的核对、预处理，加入物料的顺序，混合时间，温度等）；9、中间控制方法及其合格限度；10、半成品的贮存要求，包括容器、标签及特殊贮存条件；11、必要的安全、避光等特别注意事项。,大学便民网,4.5记录1、生产管理、质量管理的各项制度和记录 2、厂房、设施和设备的使用、维护、保养、检修记录。3、不合格药品管理、物料退库和报废、紧急情况处理记录。4
45、、环境、厂房、设备、人员等卫生管理记录对人员进行规范和专业技术等培训记录。,大学便民网,4.6 制造记录（批生产记录）3.1 产品名称、生产批号、生产日期；3.2 操作者、复核者的签名；3.3 有关操作与设备；3.4 相关生产阶段的产品数量；3.5 物料平衡的计算；3.6 生产过程的控制记录；3.7 特殊问题记录如偏差记录、调查、评估等内容。,大学便民网,第四节生物药物的来源,大学便民网,体外表达：无细胞表达系统 原核表达系统：大肠杆菌表达系统 体内表达：酵母表达系统 真核表达系统 昆虫细胞表达系统 哺乳动物细胞表达系统 动物/植物表达系统（转基因动物/植物）,大学便民网,4.1原核表达系统(
46、大肠杆菌)组织纤溶酶原激活物(t-PA)、胰岛素、干扰素、粒细胞集落刺激因子、人生长激素,大学便民网,1、生物药物表达体系的选择依据2、原核表达系统的优势3、原核表达系统的局限性4、选择原核表达体系的条件5、原核表达系统的应用示例,大学便民网,生物药物表达体系的选择依据1、关于药物的考虑？2、关于规模的考虑？3、关于经济的考虑？,大学便民网,原核表达系统的优势、遗传背景清楚、表达效率高、发酵成本低，过程简便,大学便民网,原核表达系统的局限性1、翻译后加工修饰体系不完善2、异源蛋白质容易在细胞内积聚3、脂多糖及内毒素,大学便民网,包含体（inclusion body）：表达的外源蛋白质在细菌内与
47、细菌杂蛋白、核酸等成分形成不溶性聚合体。尤其当表达目的蛋白量超过细菌体总蛋白量10%时，就很容易形成包涵体。生成包涵体的原因可能有是蛋白质合成速度太快，多肽链相互缠绕，影响了多肽链的正确折叠，导致疏水基团外露等。,大学便民网,包含体的形成有利于防止蛋白酶对表达蛋白的降解，并且非常有利于分离表达产物。但包含体形成后，表达蛋白不具有生物活性，因此必须溶解包含体并对表达蛋白进行复性。,大学便民网,选择原核表达体系的条件1、蛋白质无糖基化或糖基化不影响其生物活性2、结构相对简单，无复杂的高级结构3、含有较少的二硫键,大学便民网,4.1.5 原核表达系统的应用示例,大学便民网,常见的商业化表达系统有：1
48、、pET system and pETBlue system（Novagen公司），是原核蛋白表达中应用最多的系统。具有可溶性蛋白生产、二硫键形成、蛋白外运和多肽生产等专用载体和宿主菌。目前共有包括40多种载体、15种不同宿主菌和配套齐全的用于有效检测和纯化目标蛋白的相关产品。,大学便民网,2、pBAD表达系统（Invitrogen公司），可控制蛋白质的生产水平低于其成为不溶性蛋白的域值。通过与硫氧还蛋白的融合来增加溶解度 3、QIAexpress Expression System（Qiagen公司）。,大学便民网,表达蛋白的部位：1、分泌表达；2、外周质及膜上表达；3、胞内表达。,大学便民
49、网,表达蛋白的形式1、融合表达2、非融合表达,大学便民网,融合表达：要表达的外源基因连接在一段原核基因的下游，蛋白质的N末端由原核DNA序列或其他DNA序列编码，C端由外源DNA的完整序列编码，这样的蛋白质由1条短的原核多肽或具有其他功能的多肽和外源蛋白质结合在一起，故称为融合蛋白。,大学便民网,融合的目的：转录和翻译起始从正常的大肠杆菌序列开始，故通常可以产生高水平的融合蛋白；融合蛋白往往比天然的外源蛋白更加稳定；有助于蛋白质的分离和纯化。,大学便民网,融合方式：His Tag融合半乳糖苷酶融合trpE融合蛋白 谷胱甘肽S转移酶（GST）融合硫氧还蛋白（Trx）融合麦芽糖结合蛋白（MBP）融
50、合碱性磷酸酶（phoA）启动子和信号序列,大学便民网,融合蛋白的裂解：1、化学裂解法：特异识别特定的氨基酸残基或一组氨基酸残基。但化学裂解法裂解位点的特异性低，有时可能对目标蛋白产生不必要修饰。,大学便民网,2、酶解法：反应条件温和，具有高度的特异性。常用的酶有Xa因子、凝血酶、肠激酶、凝乳酶、胶原酶等。但酶解法成本高，反应时间长，更重要的是蛋白酶本身不可避免地混入目标蛋白中，造成新的污染，提高纯化的复杂性。,大学便民网,3、IMPACT系统：该系统是由枯草杆菌来源的几丁质结合域（5kD，chitin binding domain，用于亲和纯化）和酵母蛋白质剪接元件 intein组成一个双效的
