免疫组化在肿瘤诊断的应用.ppt

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1、免疫组化在肿瘤诊断中的应用,(一)对“未分化”恶性肿瘤的分类 如在HE(苏木精-伊红染色法)切片上由于肿瘤的“未分化”而缺少肿瘤细胞起源的特征,不能分类,但临床上又必须根据肿瘤的种类作出治疗与预后判断,这种情况下可用到免疫组化。在进行免疫组化前病理医生应根据肿瘤发生部位、组织学的蛛丝马迹及临床特征正确地选择抗体。如发生于直肠的上皮样包含大细胞的未分化肿瘤,其鉴别诊断主要考虑为未分化癌、淋巴瘤、恶性黑色素瘤,可以使用表X-1列出的免疫组化抗体:,表X-1未分化癌、淋巴瘤和恶性黑色素瘤的免疫组化抗体 未分化癌 淋巴瘤 恶性黑色素瘤 细胞角蛋白(CK)+-上皮细胞膜抗原(EMA)+-波形蛋白(Vim

2、entin)-+/-+HMB45-+S-100-+白细胞共同抗原(LCA)-+-,1角蛋白(Keratin):一种中间丝蛋白,分为:(1)表皮角蛋白(Epidermal keratin,EK)鳞状上皮或高分化鳞癌标记;(2)细胞角蛋白(cytokeratin,CK)低分子角蛋白,对腺癌、移行细胞部及低分化鳞癌标记。一般用广谱型角蛋白抗体为好,常用。,2上皮膜抗原(Epithelial membrane antigen,EMA):这亦是常用的上皮细胞标记抗体,细胞膜阳性,用Zankers、Bouin或B5固定液中固定为好。其在低分化和未分化上皮中表达好,但亦可在间变性大细胞淋巴瘤、恶性横纹肌样瘤

3、中表达。,3波形蛋白(Vimentin,Vim):是一种细胞中间丝蛋白抗体,在多数软组织肿瘤均可表达,但纤维细胞较明显,在一些上皮性肿瘤也有阳性反应。常用作间叶源与上皮源肿瘤的第一线鉴别抗体 4.S-100蛋白:是一种周围神经雪旺氏细胞特异标记抗体,后发现对脂细胞、朗格罕氏细胞、肌上皮细胞、黑色素细胞及其肿瘤均可阳性。,1.结蛋白(Desmin,Des):平滑肌、横纹肌均可阳性。2.肌特异性肌动蛋白(muscle-specific actin,MSA):平滑肌为阳性。3.平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin,SMA):平滑肌为阳性。4.第8因子,CD34:对血管内皮细胞肿瘤,

4、胃肠道间质瘤标记较特异。注:(1)国际上将百余种标记抗体统称为CD(Cluster Designation)系列。(2)淋巴细胞标记与R-S细胞多数为膜阳性,而Ig与组织细胞标记为胞浆阳性。,(三)、对恶性间皮瘤的鉴别 病理医生常碰到的问题是发生于胸、腹膜的肿瘤是转移性腺癌或是其它浆膜腔肿瘤,还是恶性间皮瘤。可以鉴别腺癌与间皮瘤的一组抗体 可以鉴别间皮肿瘤和血管源性肉瘤的抗体,X-3 鉴别腺癌与间皮瘤的抗体 腺癌 间皮瘤细胞角蛋白(cytokeratin CK)+波形蛋白(Vimentin)+/-+/-癌胚抗原(CEA M7072)+/-LeuM1+/-B72.3+/-Ber-Ep4+/-钙网

5、膜蛋白(Calretinin)-+CK5-+HBME-1-+*血小板调节素(TM)-+*上皮膜抗原(EMA)+分泌成分+-人胎盘产乳素+-Lewis blood group antigen+-*血小板调节素(Thrombomodulin TM)在内皮细胞、间皮细胞、巨噬细胞、室管膜细胞、缄默细胞阳性。*EMA间皮瘤以胞膜阳性为主,腺癌以胞浆阳性为主。,X-4 鉴别间皮肿瘤和血管源性肉瘤的抗体 血管源性肉瘤 恶性(纤维型)间皮瘤 良性(局限纤维型)间皮瘤 CK-+-ACTIN+/-+-CD34+-+第八因子+-,(四)肿瘤细胞增殖活性与细胞凋亡标记抗体 瘤细胞增殖指数反应细胞增殖活性,是瘤细胞新

6、生(恶性)状况的客观指标,与凋亡指数呈反比关系。常用抗体有:1增殖细胞核抗原(proliferative neuclear Antigen,PCNA),核阳性。2Ki-67,Brdu抗体:原要求新鲜组织,新近有Ki-67石蜡切片标记抗体问世。,3细胞凋亡(Apoptosis)标记抗体:开始发现细胞凋亡发生于正常细胞受基因调控性自然性死亡。后发现肿瘤细胞亦可发生,而且某些药物放、化疗亦可诱发细胞凋亡,故成了研究肿瘤发生、发展、治疗的热点。其标记抗体有:(1)凋亡抑制基因蛋白抗体:Bcl-2、Bcl-XL、mtp53。(2)促凋亡基因蛋白抗体:Fas/FasL系统,wtp53、Bax、Bcl-xs、Fas等。Tunel标记。,(五)癌基因与抗癌基因,促转移与转移抑制基因蛋白抗体标记。目前应用很多,因方法比分子生物学技术简单,但是这种结果不能直接反应肿瘤基因的活性,只能间接反应肿瘤基因代谢活性,要注意正确评价它的价值。,谢谢,

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