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1、实验五 细胞融合,一、实验目的,了解细胞融合的原理 初步掌握聚乙二醇法诱导细胞融合的实验 方法。,二、实验内容,实验原理 细胞融合是指在自然条件或利用人工方法（生物的、物理的，化学的），使两个或两个以上的细胞合并成一个具有双核或多核细胞的过程。利用人工诱导方法，不仅可以使同种细胞发生融合，而且可以使不同种间细胞发生融合。人工诱导的方法很多，如：聚乙二醇（PEG）法、灭活的仙台病毒诱导法、电场融合法等。,聚乙二醇（polyethyleneglycol,PEG）法的原理：PEG分子能改变各类细胞的膜结构，使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组，由于两细胞接口处双分子层质膜的相互亲合以及彼此的
2、表面张力作用，使细胞发生融合。,实验方法 1.处死蟾蜍。2.取血：注射器内吸取1ml Alsver液，再吸取1ml蛙血，加入已盛有8ml Alsver液的玻璃离心管。3.分别取1ml细胞悬液移入塑料离心管中，加入0.85%生理盐水4ml混匀，1200r/min，离心5min。4.弃去上清液，再加入0.85%生理盐水至5ml，混匀，离心。5.重复步骤4。,6收集最后一次离心沉淀的血细胞，加入1mlGKN液混匀。（按压积红细胞体积配成10%的红细胞悬液）7再加入0.5ml预热的50%PEG混匀，室温下分别于2min、15min取一滴该悬液于干净的载玻片上，盖上盖玻片显微镜下观察。,细胞融合,三、作业,绘细胞融合过程图。,
