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1、第三章,灭菌与空气净化,1.概念2.常用的灭菌方法3.发酵工业培养基灭菌4.空气净化,第三章 灭菌与空气净化,灭菌：用物理或化学的方法杀灭或去除物料或设备中所有微生物的过程。消毒:用物理或化学的方法杀灭或去除物料或设备及环境中的病原微生物，不能杀死芽孢。,3.1 概念,3.2 常用的灭菌方法,1.干热灭菌2.湿热灭菌3.紫外线灭菌4.化学药品灭菌5.过滤除菌,适用范围：用于高温下不损坏、不变质、不蒸发物品的灭菌；用于蒸汽或气体不能穿透物品的灭菌，如玻璃、金属等制品的消毒灭菌。具体方法:（1）烧灼：用于耐高温物品、小件金属器械的灭菌。（2）干烤：用干热灭菌箱进行灭菌，灭菌条件为：160-170，
2、1-1.5 h。用于灭菌后器具的干燥保存,1.干热灭菌,干热灭菌法：是利用火焰或干热空气进行灭菌的方法，其原理是利用高温破坏菌体蛋白质与核酸中的氢键，使蛋白质变性或凝固、核酸破坏、酶失去活性，微生物死亡。,适用范围：用于耐高温、耐高湿的医疗器械和物料的灭菌。,.湿热灭菌,湿热灭菌法：是将待灭菌物品置于加压的饱和蒸气中进行灭菌的方法。饱和蒸气潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固、酶失活，灭菌效率较干热空气灭菌法高。,手提式压力蒸汽灭菌器灭菌方法：在主体内加入适量的蒸馏水，放入待灭菌物；将顶盖上的排气管插入内壁的管中，盖盖并拧紧；将灭菌器的热源打开，开启排气阀排完空气后关闭排气阀；温度达121
3、，维持到规定时间（20min30min）需要干燥的物品，打开排气阀，慢慢放气，待压力恢复到零位后开盖取物。液体类物品，待压力恢复到零位，自然冷却到60以下，再开盖取物。,灭菌前物品的准备（1）清洗：灭菌前应将物品彻底清洗干净，物品洗涤后，应干燥并及时包装。（2）包装：1）包装材料应允许物品内部空气的排出和蒸汽的透入。2）常用的包装材料包括全棉布；如纸包装；带孔的金 属或玻璃容器等。3）布包装层数不少于两层。用排气式压力蒸汽灭菌器 的物品包，体积不得超过30cm30cm25cm;4）盘、盆、碗等器皿类物品，尽量单个包装；包装时 应将盖打开；若必须多个包装在一起时，摞放时，器皿间用吸湿毛巾或纱布隔
4、开，以利蒸汽渗入；5）物品捆扎不宜过紧，液体物料不能太满。,（3）装载：）应尽量将同类物品放在一起灭菌，若必须将不同类物品装放在一起，则以最难达到的灭菌物品所需的温度和时间为准；）物品装放时，上下左右相互间均应间隔一定距离以利蒸汽置换空气；4）难以灭菌的大包放在上层，较易灭菌的小包放在下层；物品装放不能贴壁，以防吸入较多冷凝水；5）盘、碟、碗等应处于竖立的位置；纤维织物应使折叠的方向与水平面成垂直状态；玻璃瓶等应开口向下或侧放以利蒸汽进入和空气排出；,射线可直接破坏细菌DNA，导致微生物死亡 适用范围：用于室内空气、物体表面灭菌。（1）使用的紫外线波长范围是200nm275nm，杀 菌作用最强
5、的波段是250nm270nm。（2）紫外线辅照能量低，穿透力弱，仅能杀灭直接 照射到的微生物，因此消毒时必须使消毒部 位暴露于紫外线。（3）用紫外线灯消毒室内空气时，房间内应保持清 洁干燥，减少尘埃和水雾。（4）不得使紫外线光源照射到人，以免引起损伤。,3.紫外线灭菌,4.化学药品灭菌,化学消毒灭菌法:是指利用化学药物渗透细菌的体内，使菌体蛋白凝固变性，干扰细菌酶的活性，抑制细菌代谢和生长或损害细胞膜的结构，破坏其生理功能等，从而起到消毒灭菌作用。所用的药物称化学消毒剂。灭菌剂:某些药物杀灭微生物的能力较强，可以达到灭菌，又称为灭菌剂。化学消毒灭菌法一般用于环境或器械的消毒灭菌。,醇类：70%
6、-75%乙醇 蛋白质变性，损伤细胞膜，脱水；皮肤，器械酸类：醋酸 破坏细胞膜和蛋白质；房间消毒（防 呼吸道传染）醛类：0.5%-10%甲醛 破坏蛋白质；物品消毒，接 种箱、接种室的熏蒸 600mgL环氧乙烷 酶失活；手术器械，毛皮，食品，酚类：3%-5%石炭酸 蛋白质变性，损伤细胞膜；地面，家具，器皿 2%煤酚皂（来苏儿）蛋白质变性，损伤细 胞膜；皮肤,卤素及化合物 L氯气 破坏细胞膜、蛋白质；饮水，游泳池水10%-20%漂白粉 破坏细胞膜、蛋白质；地面，厕所2.5%碘酒 酪氨酸卤化，酶失活；皮肤表面活性剂 新洁而灭 蛋白质变性，破坏膜；皮肤，粘膜，手术器械龙胆紫 与蛋白质的羧基结合；皮肤，伤
7、口氧化剂 0.1%KMn04 氧化蛋白质的活性基团；皮肤，水果，蔬菜3%H202 氧化蛋白质的活性基团；污染物件的表面0.35%过氧乙酸 氧化蛋白质的活性基团；皮肤，塑料，玻璃，臭氧 氧化蛋白质的活性基团；食品,5.过滤除菌,过除菌法：滤过除菌法是用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌除去，以达到无菌目的，是一种机械除菌方法。这种机械称为除菌滤过器，适用范围：对热不稳定的药物溶液、气体、水等的除菌。供除菌用的滤器，要求能有效地从溶液中除净微生物，溶液能顺畅地通过，容易清洗，操作简便。常用除菌滤器有0.22m或0.3m的微孔滤膜。此法应配合无菌操作法进行。,微生物的热阻,生长温度：5-50 最适温
8、度：25-27 致死温度：杀死微生物极限温度致死时间：全部死亡的时间热 阻：在一定条件下的致死时间原则:高温瞬时,3.发酵工业培养基灭菌,分批灭菌：又称实消、间歇灭菌、实罐灭菌,罩,罐,大罐,通蒸汽,罩内通蒸汽,分批灭菌：将培养基加入发酵罐，直接通高压蒸气,罐,空消：将高压蒸气直接通发酵罐灭菌连续灭菌：又称连消，培养基先灭菌,后 通入空消的发酵罐,配料罐 连消塔 维持塔 冷却管 发酵罐,20s-30s126-132,5-7min,40-50,配液设备,（二）培养基灭菌设备2.加热设备：在配料罐里培养基被加热到70，然后，用泵送到加热设备，在20秒的时间内继续加热到130140。常用的加热设备有
9、塔式和喷射式两种。塔式加热设备又称连消塔，塔的有效高度23m，料液在塔中的流速是0.1ms，因此料液在塔内的滞留时间为230s。它是有多孔导入管和一外套管组成，多孔管的孔径是58mm。喷射式加热器有一喷嘴，蒸汽由喷嘴喷出，料液从侧面进入加热器而被蒸汽加热。,（三）维持设备维持设备使加热后的培养基保温定的时间，从而达到灭菌的目的。维持设备有两种：罐式和管式。罐式的是一个带有上下开口用于进出料的立式密封容器；管式的是用无缝钢管焊成，管内流速可取0.30.6ms。,(四)、冷却设备喷淋冷却器套管冷却器板式换热器螺旋板换热器,固体培养基的灭菌,转动的同时加入蒸汽,3.4.空气净化 空气中的微生物的含量
10、和种类随地区、高低、季节、空气中尘埃多少和人们活动情况而异。空气中的微生物一般附着在尘埃和雾沫上。,1.空气净化的方法2.空气净化的介质3.空气净化的流程4.空气净化的原理,1.空气净化的方法,加热静电除尘介质过滤,2.空气净化的原理,惯性碰撞作用 阻截作用 布郎扩散作用 重力沉降作用 静电吸附作用,2.空气净化的介质,纤维状或颗粒状过滤介质：棉花、玻璃纤维、活性炭,过滤纸类过滤器 烧结材料过滤介质 新型过滤介质,3.空气净化的流程,除尘 压缩 降温 除油水 加热空气 过滤器 发酵罐,两次冷却、两次分油水、适当加热流程,特点：两次冷却、两次分油水、适当加热。空气第一次冷却到3035，第二级冷却
11、至2025，经分水后加热到3035，,冷热空气直接混合式空气除菌流程,特点：省去一级冷却和分离设备及空气再加热设备，简化了流程，使冷却水用量也降低了。压缩空气从贮罐出来分两路，一部分进冷却器，经分离器分离水、油雾后与另一部分未处理过的高温压缩空气混合，使混合后的空气温度为3035，相对湿度为5060%。,1)设计合理的空气预处理设备，选择合适的空气净化流程，以达到除油、水和杂质的目的。2)设计和安装合理的空气过滤器，选用除菌效率高的过滤介质。3)保证进口空气清洁度，如加强生产场地卫生管理，正确选择进风口，加强空气压缩前的预处理。4)降低进入空气过滤器的空气相对湿度，如使用无油润滑的空气压缩机，加强空气冷却和去油，提高进入过滤器的空气温度。,提高过滤的方法,习题:消毒、灭菌、实消、连消、空消常用的灭菌方法及适用范围手提式压力蒸汽灭菌器灭菌方法例举常用化学消毒剂.空气净化的方法空气净化的流程,
