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1、紫外可见分光光度计应用案例案例1.肉制品中亚硝酸盐的测定前处方式：称取5g（精准至0.01g）制成匀浆的试样，置于50mL烧杯中，加12.5mL 饱和硼砂溶液，搅拌均匀，以70OC左右的水约300mL将试样洗入500mL容量 瓶中，于滚水浴中加热15min掏出置冷水浴中冷却，并放置至室温。在振荡上 述提取液时加入5mL亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5mL乙酸锌溶液，以沉淀 蛋白质。加水至刻度，摇匀，放置30min ,除去上层脂肪，上清液用滤纸过滤， 弃去初滤液30mL,滤液备用。检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表1）：表1测量参数测量波长（nm）53
2、8比色皿光程（cm ）2检测界面（见图1）：图1肉制品中亚硝酸盐的检测界面上图标准曲线中，亚硝酸钠标准系列的质量依次为0.0凹、2.0凹、4.0凹、 6.0凹、8.0凹、10.0|jg、15.0|jg、20.0|jg、25.0pg （100mL 容量瓶中）。方式检出限：该方式检出限为1mg/kg，能够知足GB 5009.33-2020食物平安国家标 准食物中亚硝酸盐和硝酸盐的测定第二法分光光度法的检测要求。参考标准：GB 5009.33-2020食物平安国家标准食物中亚硝酸盐和硝酸盐的测定 第二法分光光度法案例2.啤酒中甲醛的测定前处置方式：吸取已除去二氧化碳的样品25.00mL移入500mL
3、蒸馏瓶中，加200g/L磷酸 溶液20.00mL于蒸馏瓶，接水蒸气蒸馏装置中蒸馏，搜集馏出液于100mL容量瓶中（约100mL），冷却后加水稀释至刻度。检测仪器:T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表2）：表2测量参数测量波长（nm）415比色皿光程（cm）1检测界面（见图2）：M卷洋5 -（懂用中）E.-监崩产.Ah.D. Z91 1 ,或目名弥ABeiOfiqi5. oo m1折淮详吕Ci. COJDa. koD. 000/22Ci. 5KI0a. tn?a.ccnD. 0E/ -33标准样吊moo11 05LI 0L5/q4z roou0.0330 033
4、/55标淮洋品s. anna.旌！D. 0420 075/G6析蜜林品i.anonowD. WOw/7标准样吊a moo0 L23LI/.AB, /未知样品D.CEL/fW.U.i:.邓AbsOgqi5. on m1未加详品Ci. EDMa. tnaD. 003-D.aiBf2未知洋品Ci.汹。a. tnrD.con-o4 L.43.1 4.9 6. E B.4 费度临:w;A* = EL* C) 4 PD-17 -71.5楣法EOD-o. DDL-3T1 1ELD.0IKH，口ED.393L图2啤酒中甲醛的检测界面上图标准曲线中，甲醛标准系列的质量依次为：0.0ug、0.5ug、1.0ug、
5、 2.0ug、3.0ug、4.0ug、8.0ug（25mL 比色管中）。方式检出限：该方式检出限为0.8ug，能够知足GB/T 5009.49-2020发酵酒及其配制 酒卫生标准的分析方式（4.4甲醛）的检测要求。参考标准：GB/T 5009.49-2020发酵酒及其配制酒卫生标准的分析方式（4.4甲醛）案例3.食用植物油中过氧化值的测定前处置方式：周密称取约0.01g1.0g试样（准确至刻度0.0001g）于10mL容量瓶内，加 三氯甲烷+甲醇（7+3）混合溶剂溶解并稀释至刻度，混匀。检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表3）：表3测量参数测量波长（
6、nm）500比色皿光程（cm）1检测界面（见图3）：图3食用植物油中过氧化值的检测界面上图标准曲线中，铁标准系列的质量依次为：0.0ug、2.0ug、5.0ug、 10.0 4g、20.01g、30.01g、40.0ug（10mL 比色管中）。方式检出限：该方式检出限为0.41g,能够知足GB/T 5009.37-2003食用植物油卫生标 准的分析方式（4.2过氧化值 第二法 比色法）的检测要求。参考标准：GB/T 5009.37-2003食用植物油卫生标准的分析方式（4.2过氧化值 第 二法比色法）案例4.棉籽油中游离棉酚的测定前处置方式：称取1.000g （精准至0.001g）精制棉油，置
7、于100mL具塞锥形瓶中，加入 20.0mL丙酮（70%），并加入玻璃珠3粒5粒，在电动振荡器上振荡30min，然后在冰箱中冷藏，放置留宿。取此提取液之上清液过滤，滤液供测定用。检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表4）：表4测量参数测量波长（nm）378比色皿光程（cm）1 （石英）检测界面（见图4）：盅里琳走 M2Q14 D329 jud R谟=口瓦滞作品-宓m申】7-：.；拦0 6745知3?0 00 ma.5332/.1登标准林昂IIII5JJD0.000. CCiCOa. 0339咨舞2标准样日3in.noa.aejsD.L635q0. 0D
8、Q.1L53D. USQ.J91S/5W. 0Da.2Lgoo. eis：i6EO. 0D口.4鸵可0.42 &4CLW9Z677tfW品T 标隹样昂120 0Da S424D.B4Z4a.ioez/ -社就波长-a.azz【d378. OD m-B. LCI 20.40 4B. 0J 13. SO 99. 60 126. 00 灌度W1土抑洋上9壬却洋上S霍a.aws0.D54Sa.asie；o. D5S32场 E = Ki*ljc) + MD,I7iizr=.栏三M)0.00657幻0. OOS30.9999*1,FiT-图4棉籽油中游离棉酚的检测界面上图标准曲线中，棉酚标准系列的质量依次
9、为：0.0ug、5.0ug、10.0ug、 20.0 40.0ug、80.0 120.0ug（10mL 具塞比色管中）。方式检出限：该方式检出限为0.3ug （当测定试样1.000g时，最低检出浓度为0.06mg/100g），能够知足GB/T 5009.37-2003 （4.4.1紫外分光光度法）的 检测要求。参考标准：GB/T 5009.37-2003 （4.4.1紫外分光光度法）案例5.油脂中没食子酸丙酯的测定前处置方式：称取10.00g （精准至0.001g）试样，用100mL石油醚溶解，移入250mL分 液漏斗中，加入20mL乙酸铵溶液（16.7g/L），振摇2min，静置分层，将水层
10、放 入125mL分液漏斗中（如乳化，连同乳化层一路放下），石油醚层再用20mL乙酸铵溶液重复提取两次，归并水层。石油醚层再用水振摇洗涤两次，每次15mL，归并水层，振摇，静置。将水层通过干燥滤纸滤入100mL容量瓶中，用少量水洗 涤滤纸，加入2.5mL乙酸铵溶液（100g/L），加水至刻度，摇匀。将此溶液用滤 纸过滤，弃去20mL初滤液，搜集滤液供测定。检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表5）：表5测量参数测量波长（nm）540比色皿光程（cm）1检测界面（见图5）：X作虐样品-校正曲城行玄0.2931序号航nJ540 OD ro-标准样昂口 0Da
11、 amoD. MM./22标 ItTin50 0Da a7iD. D271Q.2ZS3 .33标准样昂im oda理5H *45/q4标准样昂200.0D0JL050.11C6/55标准样品3ffl 0D0.1652a 1685/6&标准样昂400.0D0.2L%D. E396/1I标准样品EDO. 0D0.27620.海/a. inri/a.afro-/:穿L :-/540 00 rn1 -ylfMW己；知样昂11 49O.OffiOD. DOBO 200ug. 300 ug 400ug. 500 ug（25mL 具塞比色管中）。方式检出限：该方式检出限为18.1ugPGo （测定试样相当于
12、2g时，最低检出浓度为 9.1mg/kg。），能够知足GB/T 5009.32-2003油脂中没食子酸丙酯（PG）的测定 的检测要求。参考标准：GB/T 5009.32-2003油脂中没食子酸丙酯（PG）的测定案例6.果汁饮料中总磷的测定前处置方式：称取必然量经混合均匀的果汁样品5.00 g10. 00 g于500 mL凯氏烧瓶中， 加入2粒3粒玻璃珠、10 mL15 mL硝酸（分析纯）、5 mL硫酸（分析纯）， 浸泡约2h。先用微火加热，待猛烈反映停止后，加大火力。溶液开始变成棕色 时，当即滴加硝酸（分析纯），直至溶液透明，颜色再也不变深为止。继续加热 数分钟至浓白烟逸出，冷却，警惕加入20
13、 mL水，再加热至白烟逸出，冷却至室 温。将溶液转移到50 mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，备用。检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表6）：表6测量参数测量波长（nm）400比色皿光程（cm）1检测界面（见图6）：图6果汁饮料中总磷的检测界面上图标准曲线中，磷标准系列的质量依次为：0.0mg/L、2.0mg/L、4.0mg/L、 6.0 mg/L、8.0 mg/L、10.0 mg/L （50mL 容量瓶中）。方式检出限：该方式检出限为0.1mg/L。能够知足GB/T 12143-2020饮料通用分析方式（9.5.3总磷）的检测要求。参考标准：GB
14、/T 12143-2020饮料通用分析方式（9.5.3总磷）案例7.茶饮料中茶多酚的测定前处置方式：称取均匀透明的样液1g5g （精准至0.001g）于25mL容量瓶中，加水4mL、 酒石酸亚铁溶液5mL，充分摇匀，用pH7.5磷酸缓冲溶液定容至刻度。检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表7）：表7测量参数测量波长（nm）540比色皿光程（cm）1检测界面（见图7）：上图中，A0.9598，A2=0.0092。结果计算:（牛）X 1.957X2X K X用式中：X样品中茶多酚的含量（mg/kg）； A1试液显色后的吸光度；A2试液底 色的吸光度；1.9
15、57用10mm比色皿，当吸光度=0.50时，1mL茶汤中茶多酚的含量相当 于1.957mg； K稀释倍数；m测按时称取试液的质量（g）。参考标准：GB/T 21733-2020茶饮料 （6.2.1茶多酚）案例8.白砂糖色值的测定前处置方式：称取样品100.0g于200mL烧杯中，加入pH7.00的三乙醇胺-盐酸缓冲溶液 135mL,搅拌至完全溶解。倒入己预先铺好0.45M孔径微孔膜的过滤器中，在真空下抽滤，弃去最初50mL左右的滤液，搜集滤液应很多于50mL。检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表8）：表8测量参数测量波长（nm）420比色皿光程（cm
16、）5检测界面（见图8）：图8白砂糖色值的检测界面上图中，A=0.1755。结果计算：C =- x 1000 b x c式中：C 色值，单位为国际糖色值单位（IU）； A 在420nm波长测得样液的吸光度；b比色皿光程，单位为厘米（cm）； c样液浓度由20C的折光锤度乘上一系数（白砂糖0.9862，绵白糖0.9854），然后查表求得，单位为克每毫升（g/mL）。参考标准:案例9.鸡精调味料中呈味核苷酸二钠的测定前处置方式：准确称取均匀的样品2g4g （精准至0.0001g）,用少量0.01mol/L的盐酸溶 液溶解并定容于100mL容量瓶中，混匀。将此溶液用滤纸过滤，弃去初滤液20mL。 吸取
17、滤液5.00mL于100mL容量瓶中，用0.01mol/L的盐酸溶液定容，混匀，此 溶液即为测试液。检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表9）:表9测量参数测量波长（nm）250比色皿光程（cm）1（石英）检测界面（见图9）：图9鸡精调味料中呈味核昔酸二钠的检测界面上图中，A=0.6021。结果计算：X = A 530 2000100m 11950 1000式中：X 样品中呈味核甘酸二钠的含量（含7.25分子结晶水）（g/100g）；A一样 品在波长250nm处的吸光度；m样品质量（g）； 530 含7.25分子结晶水呈味核昔酸 二钠的平均分子量；20
18、00 样品的稀释倍数；11950 呈味核甘酸二钠的平均摩尔吸光 系数。参考标准:SB/T 10371-2003鸡精调味料（5.2.4呈味核昔酸二钠）案例10食物中二氧化硫的测定前处置方式：称取适量（510g）粉碎混匀后的样品，浸泡提取生成稳固络合物后过滤，取适量滤液 与甲醛及盐酸副玫瑰苯胺作用生成紫色络合物，利用T9通过与标准系列比较定量。检测仪器：北京普析通用仪器有限责任公司T9型紫外可见分光光度计。仪器条件：具体参数见表1。表1仪器参数紫外参数测量方法单波长法光度模式吸光度（Abs）吸收波长550nm比色皿光程10mm检测谱图（见图1）:株挥样而序号府号At 5度长1.45 加1. 14
19、日 1 a.ea 0.5355 0.2351 -0.0625TT.00 丽+二钮成11标准样品标准样品o.aaaou uulili0.5000H0LL9D. DDDD0. 01193二氧何玮技标准样品i.aaaaoj：i3T9D. D3794顼瞄14标准样品s.aaaaclototD. D7D7;二堑愉巧，化础标堂样品折准样品 L4D4Q.aaaah 忌L4D4D. 2152T二瓦何玮1T标准样品e.aaaa0.2767D. 27B70二钮贤侬 二化5酒标准样品标准样品lo.aaaou 337920.000011703?0 33790. 703710二氧亿稣A标准样品a.aaaal.38331
20、. 3B33bsJ + B04未却样品校正方关环眉法5木却样品n 03TT .nenen.onosED0.03564E未却样吕0 05710.0C620.0062K13XE8T* r 卜R0.9994图1标准曲线谱图上面谱图显示R=0.9994。样品检出限：该方式知足GB 5009.48-2003的检测要求。参考标准：GB 5009.48-2003， GB 5009.36-2003案例12.食物中的杂醇油的检测前处置方式:酒中杂醇油比较复杂，以异戊醇和异丁醇为代表，异戊醇和异丁醇在浓硫酸作用下脱水 生成异戊烯和异丁烯，再与对二甲氨基苯甲醛作用显橙红色，与标准比较定量。检测仪器:北京普析通用仪器
21、有限责任公司T9型紫外可见分光光度计。仪器条件:具体参数见表1。表1仪器参数紫外参数测量方法单波长法光度模式吸光度（Abs）吸收波长520nm比色皿光程20mm检测谱图（见图1）:5=AAL3J5波长530.LO m却臆标L0. Q0M-0. 00D2-0. aOD2-0. Q0D2标苗样品HOLM0. 06450. QB4Sn ao4s标准程品0 OEDO0 1BE3fl 1BES0 MBStri折苗样品0.03DQ0. 254fl0. 25400. 25tt册4如品0 CMDOu 3237u 32370 3237trb米为样品o. asoo0. 412A0. 4L2Ao. q】网m.死.M
22、AAtsJLb=七尊茂式mg53J.C0 e业汗仇L丰部杵品1 1TSlltTnq0 00?fl0 057fl 02570 02573纬万程AhE = f (C)未如样品17柚样品O.DOI0. 0Z5B0. QZM方程次剧次:伊w - r- h ri 十 Til校正辰活度法NO0. OD25KS. LtR0. 9996上面普图显示R=0.9996，说明标曲线性良好，能够进一步进行定量测定。样品检出限：该方式检出限为1mg/kg，能够知足GB/T 5009.48-2003的检测要求。参考标准：GB/T 5009.48-2003案例13.食物中的组胺的检测前处置方式:称取适量（510g）粉碎混匀
23、后的样品，用三氯乙酸浸泡后正戊醇提取，遇偶氮试剂显橙色，利用T9通过与标准系列比较定量。检测仪器：北京普析通用仪器有限责任公司T9型紫外可见分光光度计。仪器条件：具体参数见表1。表1仪器参数紫外参数测量方法单波长法光度模式吸光度（Abs）吸收波长480nm比色皿光程10mm检测谱图（见图1）:衍准祥吊庠吕浪度AbsiKg480. 00 milL杖隹样品LI OULHj0. COOlD.DOul23柘准样吊杖隹样品4. LIOLIIJ8. 00000.11533a. inn?0.0520D.10071标准杆况12. riLlLlLl0. 1509D.15095杖隹样品16. 00000. 205
24、5D. 20556ELI riLlLlLl0.2533D. 2530卜木如样品-（使用中）AbsLg/mL480. 00 iuiL丰知样品L E-L410. 0207D. D2072天知样品1. 6371o.ceioD.D2L0：宿度|1 zinL参数曲共方程始=f(ri上程欢数一衣蝠-KL+(C： 4 E0校止方法浓度法KLI0. C0023K10. 012B8R0.碰9图1标准曲线谱图上面谱图显示R=0.9999。样品检出限：该方式知足GB 5009.45-2003的检测要求。参考标准：GB 5009.45-2003案例14.食物中的铝含量的检测前处置方式：将样品粉碎后置于85C烘箱中干燥
25、4h，称取1g于100mL锥形瓶中，加硝酸-高氯酸混 合液放置留宿再进行消解，至显现显现高氯酸烟雾时，再加入硫酸，待高氯酸烟除净后加水， 加热至沸腾，冷却后形容至50mL，取稀释样液1mL，加入缓冲溶液，抗坏血酸、漠化十六 烷基三甲胺溶液、铬天青混合后显色，然后T9测其吸光度分析。检测仪器：北京普析通用仪器有限责任公司T9型紫外可见分光光度计。仪器条件：具体参数见表1。表1仪器参数紫外参数测量方法单波长法光度模式吸光度（Abs）吸收波长640nm比色皿光程10mm晚目翻.想Abs.打HdMO. TAI IL和1O.ODDO0.IM1-O.HOL23以部:rL ODDO0X616105L64.四
26、律? nnmn imin irfii453. ODDO0.L55TD. 55T5&4. ODDO0. L觥0.丧宙G5S.dOM0.255GD.2S5G&彳邹-r6 ODDO。欧5浇桥准博品%上利旧曲.拦血叩&4D taiI土算tM”.f I低0.-15Z2O.DZfiiD.02&L2上;，一街 IT，一样0.Wo.cefi30.00633M三平-：0J3M宜耽0 01ffi4-r.|f：P0.14930.DLD9D 01M未未扣样品-（喉用柯上面普图显示R=0.9992，说明标曲线性良好。面= t(C；=g. - tTT + -0D.QD3T3幻O.D4O4SB0腋法.I-IJ样品检出限：该方式检出限为0.5ug，能够知足GB/T 5009.182-2003的检测要求。参考标准：GB/T 5009.182-2003
