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1、第三节 口腔正常菌群,oral normal flora,2,口腔正常菌群(oral normal flora)：口腔细菌与宿主在共同的进化过程中形成的细菌群体,即口腔内正常存在的微生物。,3,已经分离的菌属有40余个；能规律性分离具代表性的有25个菌属。,4,一、口腔正常菌群的获得与发展(Acquisition and development),5,(一)获得,出生时 无菌 乳杆菌、酵母菌,暂时,6,出生后母亲、近亲传播,7,8,(二)发展1.乳牙萌出前（5个月内）:定植于粘膜;需氧菌和兼性厌氧菌 出生1-3天时主要是“先驱菌”口腔链球菌、轻链球菌等 3个月后口腔内有产黑色素普氏菌等厌氧菌(
2、白色念珠菌在新生儿口腔的检出率达80。),9,2.乳牙列形成时期（5-32个月）：牙齿的出现，增加了细菌定植的环 境，口腔细菌的数量和种类增加，利于 各种细菌，包括厌氧菌的生长。血链球菌、变形链球菌定植。G+杆菌和G+丝状菌增多。发生龋病的第一个高峰期。,10,“窗口感染期”（window of infectivity）：出生后1931个月（平均26个月），变形链球菌最易在牙面定植感染。,3.恒牙列形成时期 专性厌氧菌增加明显；G-厌氧菌的数量到成年达高峰。青春期成年期老年期,11,二口腔正常菌群成员 Components of oral normal flora 主要介绍与口腔感染性疾病 有
3、关的口腔细菌。,12,微生物分类的传统等级,界(Domain)门(Phylum)纲(Class)目(Order)科(Family)属(Genus)种(Species)株(Strain),13,属(Genus):具有某些共同特征或密切相关的种归为一个高一级的分类单元。种(Species):具有高度特征相似性的菌株群，这个菌株群与其它类群的菌株有很明显的区别。株(Strain):从自然界分离得到的任何一种微生物的纯培养物都可以称为微生物的一个菌株。型（form或type）:常指亚种以下的细分，当同种或同亚种不同菌株之间的性状差异，不足以分为新的亚种时，可以细分为不同的型。,14,微生物命名,按照国
4、际细菌命名法规，采用林奈氏双名法。属名种名(命名人)如：Escherichia coli未确定种名或不指特定的种时，可在属名后加sp.表示。缩写形式 E.coli,15,口腔正常菌群成员分 类,16,1.G+需氧/兼性厌氧的球菌2.G+专性厌氧的球菌3.G-需氧/兼性厌氧的球菌4.G-专性厌氧的球菌 5.G+无芽胞不规则杆菌6.G+无芽胞规则杆菌7.G+芽胞杆菌8.G-兼性厌氧杆菌9.G-专性厌氧杆菌,17,18,革兰氏染色法,是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，染色后细菌与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴定。,阳性,阴性,19,1.G+需氧/兼性
5、厌氧的球菌,肠球菌属（Enterococcus）口腔球菌属（Stomatoccus）葡萄球菌属（Staphylococcus）链球菌属（Streptococcus）,2.G+专性厌氧的球菌,消化链球菌属(Peptostreptococcus)消化球菌属(Peptococcus),3.G-需氧/兼性厌氧的球菌,奈瑟菌属(Neisseria)布兰汉氏菌属(Branhamella),4.G-专性厌氧的球菌,韦荣菌属(Veillonella),5.G+无芽胞不规则杆菌,放线菌属(Actinomyces)罗斯菌属(Rothia)真杆菌属(Eubacterium)棒状杆菌属(Corynebacterium
6、)丙酸杆菌属(Propionibacterium)双歧杆菌属(Bifidobacterium)诺卡氏菌属(Nocardia),6.G+无芽胞规则杆菌,乳杆菌属(Lactobacillus),7.G+芽胞杆菌,芽胞杆菌属(Bacillus)梭菌属(又叫梭状芽胞杆菌属)(Clostridium),8.G-兼性厌氧杆菌,嗜血菌属(Haemophilus)放线杆菌属(Actinobacillus)艾肯菌属(Eikenella)弯曲菌属(Campylobacter)二氧化碳嗜纤维菌属(Capnocytophaga),9.G-专性厌氧杆菌,拟杆菌属(Bacteroides)卟啉单胞菌属(Porphyrom
7、anas)普雷沃菌属（Provotella）梭杆菌属(Fusobacterium)纤毛菌属(Leptotrichia)沃林菌属(Wolinella)月形单胞菌属(Selenomonas),菌落形态 菌细胞的染色特征 菌体形态、排列 生化特性检验 代谢产物分析,29,G+需氧/兼性厌氧的球菌,肠球菌属（Enterococcus）口腔球菌属（Stomatoccus）葡萄球菌属（Staphylococcus）链球菌属（Streptococcus）,粪肠球菌,顽固性根管感染根管治疗后的再感染,31,（一）链球菌属(Streptococcus),G+兼性厌氧球菌,33,变形链球菌群(Streptococ
8、cus mutans group)唾液链球菌群(Streptococcus salivarius group)咽峡炎链球菌群(Streptococcus anginosus group)轻链球菌群(Streptococcus mitis group),口腔链球菌属的菌群分类,34,1.变形链球菌群(Streptococcus mutans group)变形链球菌(Streptococcus mutans)远缘链球菌(Streptococcus sobrinus)仓鼠链球菌(Streptococcus cricetus)鼠链球菌(Streptococcus rattus)道恩链球菌(Strept
9、ococcus downei)野鼠链球菌(Streptococcus ferus)猕猴链球菌(Streptococcus macacae),35,在不同培养基中生长时形态可发生变异而得名；一群表型特征相近，但血清型和遗传型各异的链球菌。,36,主要分布于牙菌斑和唾液中。在人口腔中常见者为变形链球菌和远缘链球菌。,37,根据变形链球菌群细胞壁多糖抗原的血清型反应可分为ah 8个血清型。,38,*变形链球菌（S.mutans)：人口腔中检出率最高，以c血清型为最，达80。血清型包括c、e、f型,39,*远缘链球菌(S.sobrinus)：人口腔分离,检出率次于变形链球菌。血清型d、g 从遗传学上看
10、，S.sobrinus和S.mutans为远亲关系，故命名远缘链球菌。（也有命名茸毛链球菌，由于电镜下细胞表面毛状外膜层明显。）,40,仓鼠链球菌(S.cricetus)：仓鼠口腔中分离而得名。人口腔中也可检出，检出率低。血清型为a型,41,鼠链球菌(S.rattus)：主要来自实验大鼠口腔，人口腔中也可检出，检出率低，但野鼠中未分离出。血清型为b型,42,道恩链球菌(S.downei)：也有命名汗毛链球菌人口腔中分离，检出率低。血清型为h,43,野鼠链球菌(S.ferus)：野鼠口腔中分离，人口腔中未发现。血清型为c型,44,猕猴链球菌(S.macacae)：猕猴口腔中分离,人口腔中未发现。
11、血清型为c,45,46,变形链球菌群(Streptococcus mutans group)(1)生物学特性 形态（菌体、菌落）生长条件,47,光镜观察菌体形态：G+球菌，成对或链状排列，链长中等或短，不活动。直径0.61.0m。,48,液体培养基中，呈长链状。,49,偏酸性液体培养基中，菌细胞呈短杆状、球杆状。,SEM观察菌体形态：,不含蔗糖的液体培养基中：单个菌清晰，菌细胞表面光滑。含蔗糖的液体培养基中：菌细胞表面被胞外多糖覆盖。,TEM观察菌体形态：,细胞表面有一层薄的毛状外膜层（fuzzy coat），粘附素位于其中。含蔗糖的培养基中：形成胞外多糖。,MS（Mitis Salivari
12、us)上菌落形态：,S.mutans典型菌落：呈粗糙型高凸、坚硬、嵌于琼脂内，边缘不齐，色淡兰或灰兰，直径1mm，表面呈毛玻璃样，顶端有圆形透明的细胞外多糖水珠，久放后，菌落周围有多糖外溢。,52,S.sobrinus典型菌落：粘液型菌落表面常覆盖有粘液滴样帽状物。,MS上菌落形态：,53,变形链球菌群(Streptococcus mutans group)(1)生物学特性 形态（菌体、菌落）生长条件,54,微需氧或兼性厌氧，在含95N2+5%CO2中生长良好；与其他链球菌相比，更耐酸，pH4.3时仍生长；不受杆菌肽（除仓鼠链球菌、野鼠链球菌、猕猴链球菌）、磺胺噻唑抑制，培养基中加入这两者后可
13、作为选择型培养基。,55,代谢底物：糖变形链球菌需要特殊生长因子对氨基苯甲酸,56,57,58,变形链球菌群(2)致龋性 对牙面的粘附 合成胞外、胞内多糖 产酸力和耐酸性,59,对牙面的粘附细胞壁结构（如表面粘附素、表面抗原/、葡聚糖连接蛋白和脂磷壁酸等）-获得性膜内受体,合成胞外、胞内多糖a.细胞外酶，合成葡聚糖和变聚糖：促进菌斑形成、参与菌斑基质组成；生物屏障作用；作为胞外贮能形式b胞内贮能形式，当外源糖不足时，胞内多糖易被降解产酸，使产酸时间延长，且为代谢提供了能量。,产酸力和耐酸性a.能发酵多种糖产酸，主要产物是乳酸。b.产酸力强，产酸迅速，且耐酸，耐酸 力仅次于乳杆菌。,(3)变形链
14、球菌群 与龋病的关系 S.mutans和.sobrinus 目前公认的主要致龋菌。与人类龋病的发生 关系密切。,63,流行病学研究：无龋者口腔中分离的S.mutans数量明显低于患龋者，S.mutans数量与龋损的严重程度正相关。S.sobrinus与青少年的龋病密切相关。,64,2.唾液链球菌群(Streptococcus salivarius group)唾液链球菌(Streptococcus salivarius)前庭链球菌(Streptococcus vestibularis),65,（1）生物学特性 G+球菌，直径0.81.0m，排列呈长链或短链。兼性厌氧或微需氧菌。,66,MS平板
15、：较大的淡蓝色、饭团样粘性菌落，由于合成的果聚糖所致。不能合成不溶性细胞外多糖。,67,唾液链球菌(S.salivarius):主要定植部位于口腔粘膜表面和舌背部粘膜，是唾液中占最大比例的菌群。前庭链球菌(S.vestibularis):定植于口腔前庭粘膜。,68,（2）致病性目前未发现对人有致龋性。,69,3.咽峡炎链球菌群(Streptococcus anginosus group)中间链球菌(Streptococcus intermedius)星群链球菌(Streptococcus constellatus)咽峡炎链球菌(Streptococcus anginosus),70,（1）生物
16、学特性G+球菌，链状排列，链可长可短;厌氧或兼性厌氧。MS琼脂平板:菌落呈淡蓝色花瓣样。不能利用蔗糖合成胞外多糖。,71,（2）致病性与龋病的关系尚不明确，因能产生中间溶解素的蛋白酶样物质，与脓肿有关。,72,4.轻链球菌群(Streptococcus mitis group)血链球菌(Streptococcus sanguinis)格氏链球菌(Streptococcus gordonii)轻链球菌(Streptococcus mitis)副血链球菌(Streptococcus parasanguis)口腔链球菌(Streptococcus oralis)嵴链球菌(Streptococcus
17、scrista)肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae),73,(1)血链球菌(S.sanguinis)生物学特性 G+球菌，长链状排列，直径0.81.2m。兼性厌氧菌。,74,MS平板：粗糙型菌落（培养基含蔗糖）或光滑型菌落（培养基不含蔗糖）。,75,可为变形链球菌提供生长所需的对氨基苯甲酸。,76,致病性牙菌斑的先驱菌之一；致龋性很低，未发现该菌与龋病的显著关系；,77,78,产生血链素、H2O2抑制某些牙周炎可疑致病菌（如牙龈卟啉单胞菌、放线共生放线杆菌、中间普雷沃菌、具核梭杆菌、二氧化碳嗜纤维菌）构成宿主微生态屏障，维持口腔生态平衡，是对牙周健康有益的细菌。,79,数量减少可引起龈下菌群发生变化，导致菌群失调，可能引起牙龈炎和牙周炎等疾病，故目前对该菌在维持生态平衡中的机制及开发相应微生态制剂等方面的研究是热点之一；在亚急性细菌性心内膜炎患者中也可检出。,80,（2）轻链球菌（缓症链球菌）(S.mitis),81,生物学特性G+球菌，长链状排列，直径0.60.8m；MS平板：菌落呈光滑型，培养4天，有的菌落中心呈疣状突起。,82,致病性牙菌斑的先驱菌之一；目前尚无报告证实其与龋病的相关关系。,83,口腔链球菌属的鉴定特征（一）,84,口腔链球菌属的鉴定特征（二）,85,小 结,不同时期口腔正常菌群的组成特点口腔正常菌群成员：变形链球菌群,
