《临床检验基础知识培训.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《临床检验基础知识培训.ppt（56页珍藏版）》请在三一办公上搜索。
1、临床检验基础知识培训,1.临床检验的定义,临床检验是指将病人的血液、体液、分泌物、排泄物和脱落物等标本，通过目视观察、物理、化学、仪器或分子生物学方法检测，并强调对检验全过程（分析前、分析中、分析后）采取严密质量管理措施以确保检验质量；从而为临床对疾病提供诊断和治疗提供依据。,1.1临床检验的分类,血液检测,血液,血液是流动在心脏和血管内的不透明红色液体，主要成分为血浆、血细胞(包括红细胞，白细胞，血小板）、遗传物质（染色体和基因)。血浆约占血液总量的55%，下层是红细胞，两者交界处还有很薄的白色物质，这是白细胞与血小板。,全血：加入抗凝剂混匀后的均匀体。主要用于血细胞的分析。血细胞：红细胞（
2、RBC）、白细胞（WBC）、血小板（PLT）。红细胞：起运输氧气和二氧化碳营养作用。正常人红细胞的范围是400500万/up.偏高：心肺疾病、烧伤、长期生活在高原的人等。偏低：多种贫血，根据红细胞的数量可分为重度、重度、轻度贫血。,白细胞：吞噬、抵抗外来侵袭人体病原体，对人体起到保护作用。正常人白细胞的范围是400010000/ul。细菌性感染，白细胞数值升高；病毒性感染，白细胞数值正常或降低。血小板：在止血过程起着重要的作用。正常的血小板范围是1030万/up 血红蛋白：也称作血色素，是红细胞的成分，起着运输氧气和二氧化碳的作用。正常的范围110-160克/升注：up：立方毫米，ul：毫升,
3、1.2血液检验样品的基本概念,静脉血是最常用的样品。静脉穿刺抽取血液是最常用的方法。血清：不加抗凝剂，血液凝固后离心分离的上层淡黄色的液体。供生化、电解质、免疫等检测用。血浆：加抗凝剂混匀后离心分离的上层淡黄色液体。主要供凝血及血气分析等检测用。,血常规检查,血常规是最一般，最基本的血液检验。血液由液体和有形细胞两大部分组成，血常规检验的是血液的细胞部分。血液有三种不同功能的细胞红细胞(俗称红血球)，白细胞(俗称白血球)、血小板。通过观察数量变化及形态分布，判断疾病。是医生诊断病情的常用辅助检查手段之一。,血细胞分析仪,血细胞分析仪,检测方法：它集三种物理学检测技术于一体，在细胞处于自然原始的
4、状态下对其进行多参数分析。该方法也称为体积、电导、激光散射血细胞分析法。此技术采用在标本中首先加入红细胞溶血剂溶解掉红细胞，然后加入稳定剂来中和红细胞溶解剂的作用，使白细胞表面、胞浆和细胞体积保持稳定不变。然后将细胞推进到流动细胞计数池中，接受仪器三种技术的检测。仪器优点：开关机对取样器微孔和管路进行自动清洗，使检测不受任何污染，使检测准确稳定。而且是智能双通道，双通道检测，既省时又准确.装有高压灼热智能排堵系统和高压反冲洗系统，从而使全自动血细胞分析仪顺畅使用。仪器内置热敏打印机，不需要连接电脑，便可完成检测及报告单打印。还可以自由选择报告单模式。全液晶触摸屏操作，方便快捷。如果想连接电脑也
5、是可以操作的。,生化检测,2临床化学（生化）检验,一、定义 1、生化：生命化学简称。2、生化分析仪：用于检测、分析生命化学物质的仪器，给临床上对疾病的诊断、治疗和预后及健康状态提供信息依据。,生化检验的常规项目 通常称为临床生化检验。是采用化学的方法对临床标本（血清、脑脊液、尿液等）进行定性或定量分析，为临床对疾病的诊断和治疗提供依据。,生化检测的内容,生化全套检查就是指用生物或化学的方法来对人进行身体检查，生化全套检查内容包括：肝功能（总蛋白、白蛋白、球蛋白、白球比，总胆红素、直接、间接胆红素，转氨酶）；血脂（总胆固醇，甘油三酯，高、低密度脂蛋白，载脂蛋白）；空腹血糖；肾功能（肌酐、尿素氮）
6、；尿酸；乳酸脱氢酶；肌酸肌酶等。,生化全套检查是对身体进行一次全面的检查和对身体情况的一种了解，有时也可以检查出来潜伏的疾病，如肝功能检查，防止病情突然发作，及时进行治疗。,肝功能检测,肝功是通过各种生化试验方法检测与肝脏功能代谢有关的各项指标、以反映肝脏功能基本状况。肝具有解毒功能、代谢功能、分泌胆汁、免疫防御功能等 如果有下列三项以上状况则需查肝功：1、全身倦怠感日趋严重。2、食欲不振，有恶心感觉。3、持续性微热，或发恶寒。4、注意力不容易集中。5、酒量突然减少 6、脸色晦暗失去光泽。7、皮肤呈黄疸色、或觉搔痒。8、尿液变为啤酒色。9、头昏耳鸣。10、全身发黄。,肝功能主要五项指标,1、谷
7、丙转氨酶（ALT）：谷丙转氨酶主要存在于肝细胞细胞质中。正常值是040，偏高时说明肝脏损伤。2、谷草转氨酶（AST）：主要存在于肝细胞线粒体中。正常值是040，偏高时说明肝脏受损，可能是由肝脏疾病引起，也有可能是由酗酒、服药、过度劳累等原因引起。3、总胆红素（TBil）：包括直接胆红素和间接胆红素。正常值是1,717,1umol/l,偏高时易发生黄疸症状。4、间接胆红素（IBil）：在肝脏中由间接胆红素转变，从胆管排出。正常值是1,713,7umol/l,偏高时说明肝脏病变或胆道受阻。5、直接胆红素（DBil）：直接胆红素是红细胞死亡或破坏时，有血红蛋白释放到血液中。正常值是1,77umol/
8、l,偏高时说明肝脏病变或红细胞遭破坏。,肾功能检测,肾是脊椎动物的一种器官，属于泌尿系统的一部分，负责过滤血液中的杂质、维持体液和电解质的平衡，最后产生尿液经由后续管道排出体外；同时也具备内分泌的功能以调节血压。在人体中，正常成人具备两枚肾脏，位于腰部两侧后方。如果有下列三项以上状况则需查肾功：（一）眼皮和足踝浮肿；（二）血压高；（三）腰腹疼痛；（四）血尿；（五）蛋白尿；（六）尿路感染；（七）小便颜色及赤痛；（八）小便不顺；（九）尿量增多减少及夜尿；（十）小便排出小沙石。,肾功能主要三项指标,1、血尿素氮，正常情况：1.86.8mmol/L，增高：急慢性肾炎、重症肾盂肾炎、各种原因所致的急慢性
9、肾功能障碍，心衰、休克、大量内出血、烧伤、失水、肾上腺皮质功能减退症、前列腺肥大、慢性尿路梗阻等。2、血肌酐，正常情况：88.4159.1mol/L。增加：肾衰、尿毒症、心衰、巨人症、肢端肥大症、水杨酸盐类治疗等。减少：进行性肌萎缩，白血病，贫血等 3、血尿酸，正常情况：89357mol/L 增加：痛风、急慢性白血病、多发性骨髓瘤、恶性贫血、肾衰、肝衰、红细胞增多症、妊娠反应、剧烈活动及高脂肪餐后等。,血脂,血脂是血浆中的中性脂肪（甘油三酯和胆固醇）和类脂（磷脂、糖脂、固醇、类固醇）的总称，广泛存在于人体中。它们是生命细胞的基础代谢必需物质。血脂高症状 1.晨起头晕，不清醒，思维迟钝 2.蹲着
10、干活气喘 3.阵发性视力模糊,血脂的四项检测,总胆固醇：2.85.17mmol/L，总胆固醇的水平主要取决于饮食、体力劳动、环境、性别和年龄。女性绝经后会明显上升；新生儿期浓度很低，哺乳后很快接近成人水平；随年龄增长也有增高趋势。甘油三酯：0.561.7mmol/L，甘油三脂升高，是动脉粥样硬化和冠心病的危险因素。高密度脂蛋白：男性：0.961.15mmol/L;女性：0.901.55mmol/L，它的影响因素有很多，如年龄、性别、种族、饮食、肥胖、饮酒与吸烟、运动、药物等。低密度脂蛋白：03.1mmol/L【增高】常见于家族性高胆固醇血症,血糖,血清中的糖称为血糖，绝大多数情况下都是葡萄糖。
11、体内各组织细胞活动所需的能量大部分来自葡萄糖，所以血糖必须保持一定的水平才能维持体内各器官和组织的需要。正常人在空腹血糖浓度为3.616.11mmol/L。空腹血糖浓度超过7.0mmol/L称为高血糖。血糖浓度低于3.61mmol/L称为低血糖。糖尿病典型症状“三多一少”：多饮、多食、多尿和体重减轻,生化分析仪,生化分析仪又常被称为生化仪，是采用光电比色原理来测量体液中某种特定化学成分的仪器。第一代：分光光度计 利用紫外光、可见光、红外光和激光灯测定物质的吸收光谱，利用此吸收光谱对物质进行定性定量分析和物质结构分析的方 法，称为分光光度法或分光光度技术，使用的仪器称为人分光光度计。第二代：半自
12、动生化分析仪 半自动分析仪指在分析过程中的部分操作（如加样、保温、吸入比色、结果记录等某一步骤）需要手工完成，而另一部分操作 则可由仪器自动完成。这类仪器的特点是体积小，结构简单，灵活性大，即可分开单独使用，又可与其他仪器配合使用，价格便宜。,第三代：全自动分析仪 全自动生化分析仪，从加样至出结果的全过程完全由仪器自动完成。操作者只需把样品放在分析仪的特定位置上，选用程序开动仪器即可等取检验报告。全自动生化分析仪（简称ACA）是根据光电比色原理来测量体液中某种特定化学成分的仪器。由于其测量速度快、准确性高、消耗试剂量小，现已在各级医院、防疫 站、计划生育服务站得到广泛使用。配合使用可大大提高常
13、规生化检验 的效率及收益。,全自动生化分析仪（简称ACA-Automatic Clinical Analyzer）：,光学系统：是ACA的关键部分。ACA的分光系统因其光位置不同有前分光和后分光之分，先进的光学组件在光源与比色杯之间使用了一组透镜，将原始光源灯投射出的光通过比色杯将光束变成光速，这样，即使比色杯再小，点光束也能通过。点光束通过比色杯后，在经这一组还原透镜（广差纠正系统），将点光束还原成原始光束，在经光栅分成固定的若干种波长（约10种以上波长）。采用光/数码信号直接转换技术即将光路中的光信号直接变成数码信号。将电磁波对信号的干扰及信号传递过程中的衰减完全消除。同时，在信号传输过程
14、中采用光导纤维，使信号达到无衰减，测试精度提高近100倍。光路系统的封闭组合，又使得光路无需任何保养，且分光准确、寿命长。,全自动生化分析仪（简称ACA）,恒温系统：由于生物化学反应时温度对反应结果影响很大，故恒温系统的灵敏度、准确度直接影响测量结果。早期的生化仪器采用空气浴的方法，后来发展到集干式空气浴与水浴优点于一身的恒温液循环间接加温干式浴。其原理是在比色杯周围设计一恒温槽，在槽内加入一种无味、无污染、不蒸发、不变质的稳定恒温液，恒温液的容量大，热稳定性好、均匀。在比色杯不直接接触恒温液，克服了水浴式恒温易受污染和空气浴不均匀、不稳定的特点。,全自动生化分析仪（简称ACA）,样品反应搅拌
15、技术和探针技术：现在流行的搅拌技术是模仿手工清洗过程的多组搅拌棒组成的搅拌单元，当第一组搅拌棒在搅拌样品/试剂或混合溶液时，第二组搅拌棒同时进行高速高效的清洗，第三组搅拌棒也同时进行温水清洗和风干过程。在单个搅拌棒的设计上，采用新型螺旋型高速旋转搅拌，旋转方向与螺旋方向相反，从而增加了搅拌的力度，被搅拌液不起泡，减少微泡对光的散射。试剂及样品探针依照早期电容式传感的原理，但略加改进，增加了血凝块和蛋白质凝块的报警，依照报警级别的重测结果，减少吸样误差，提高测试结果的可靠性。,全自动生化分析仪（简称ACA）,特点技术领先的光路反应系统 高效无忧的自动冲洗系统 智能灵敏的液位探测系统 简易快捷的软
16、件操作系统 及时周到的全国服务网络,全自动生化分析仪（简称ACA）,加样、试剂针 1.加样针表面一般都经过了特氟龙材料处理过，防止在加样品或试剂过程中表面挂液造成交叉污染。特氟龙：一种有机溶剂，几乎不溶于所有的溶剂，亦成为了不沾锅和水管内层的理想涂料。2.具有液位探测功能，可自动检测试剂瓶内试剂余量 3.加样针试剂针都具有上下防撞功能，防止在误操作或机器出现故障的情况下，造成打针现象。,全自动生化分析仪（简称ACA）,试剂、样品盘 1.试剂盘都具有试剂冷藏功能，这是因为试剂在使用过程中需要保持在低温状态下。防止因为温度过高造成试剂失效影响测试结果。2.生化中速度在400速度以上的一般样品和试剂
17、盘都是分开，这样提高机器的测试速度。,全自动生化分析仪（简称ACA）,反应盘 反应盘是试剂和样品混匀后反应检测结果的位置。反应杯材质目前有2种一是有机玻璃二是石英玻璃。石英玻璃使用寿命较长但造价比较昂贵。冲洗功能采用8段自动清洗，清洗后都有自动烘干的功能。灯泡 全自动生化分析仪的光源一般是卤素灯泡，使用寿命大约是2000个小时。,二、生化仪检验的原理及工作流程：生化仪的工作原理是根据手工操作的流程设计制造的。检验某个生化项目，就是将一定量的样品和一定量的试剂混合后，在一定的温度下（37）条件下进行化学反应后产生颜色，测定其颜色吸光度（A）的大小，和已知的校准品（标准）进行比对，从而得计算出样品
18、的浓度。,生化操作流程,加样品,加试剂,混匀,孵育（37）,混匀,比色,计算结果,或加二试剂,填写报告单,3.生化仪的一些基本概念及术语解释：校准品：是和被检测样品（血清）属同一物质，但检验项目的浓度值是已知的。在测定过程中与未知浓度的样品一同检测，检出其吸光度A值后，用来比对计算被测样品浓度值，主要是起校准作用。质控品：日常工作中随样品一同检测，记录其结果变化情况，用于观察监测系统可靠性和稳定性。,双试剂：检测某个项目时，先加入试剂，与标本的干扰物质起反应，五分钟后再加入试剂启动真正的测试反应，从而使测定结果更加准确。目的是：消除干扰物质对检测的影响，从而使结果更加接近真值。结果准确性：检测
19、结果与真值之间的差异。速度：生化仪速度是指每小时检测多少个生化项目。,交叉污染：生化仪在加样过程中或加试剂过程中产生的携带从而对检测结果准确性产生的影响。生化仪的交叉污染率一般都小于0.1%。反应杯空白：在特定波长时，光通过蒸馏水为反应体系所检测的吸光度值。一般生化仪在工作之前都要做此项检测以确定I0的值。试剂空白：在特定波长下，光通过相应测定项目试剂为反应体系所测吸光度值。样品空白：在特定波长下，光通过样品和不具备与样品反应的液体为反应体系所测的吸光度值。,温度控制：被测样本和试剂只有在特定温度下（37）反应才能得到可靠的结果。发生反应时化学反应对温度要求很高。温度不稳定的将直接导致结果不准
20、确。生化仪采用多方法、高精密控制，使温度波动0.1.目前生化仪一般有两种温控方式：空气浴和水浴。空气浴就是使用帕尔贴进行温控。水浴是使用把水加热进行温控。,质量控制：在生化仪检测过程中，为了监控整个检测系统的稳定性和可靠性，发现和寻找检测过程中的误差及产生的原因，确保检测结果在允许误差范围内的一种手段。质控方法：对质控品连续检测20次，计算其平均值，将此值作为靶。同时计算出20次的标准差（SD）和变异系数（co%）绘制成质控图。每天在工作时，质控品随标本同时检测将其结果绘制在质控图中，观察其与靶值的偏离程度。每天质控品的结果应控制在2SD范围内。,免 疫 检 测,血清免疫学检查,免疫学检查是机
21、体识别“自身”与“非己”抗原，对自身抗体形成天然免疫耐受，对“非己”抗原产生排斥作用的一种生理功能的检测。正常情况下，这种生理功能对机体有益，可产生抗感染、抗肿瘤等维持机体生理平衡和稳定的免疫保护作用。在一定条件下，当免疫功能失调时，也会对机体产生有害的反应和结果，如引发超敏反应、自身免疫病和肿瘤等。注：病原体侵入人体后，刺激了淋巴细胞，淋巴细胞就会产生一种抵抗该病原体的特殊蛋白质叫抗体，引起人体产生抗体的物质（如病原体等异物）叫做抗原。主要检测项目：感染疾病检查：甲，乙，丙肝，艾滋等病毒标志物检查：甲，乙，丙肝抗体，淋病，梅毒肿瘤标志物检查：癌胚抗原等特种蛋白检查：免疫球蛋白，补体等5.激素
22、检查：甲状腺激素，性激素，糖尿病系列如胰岛素等,乙肝两对半,乙肝两对半检查是用来判断是否感染乙肝，粗略估计病毒复制水平的初步检查，虽然项目少，检查简单，但是意义非常重要。乙肝五项检查分别是：1.表面抗原(HBsAg)2.表面抗体(抗HBs)3.抗原(HBeAg)4.抗体(抗HBe)5.核心抗体(抗HBc）乙肝五项第145项阳性，其余两项阴性。俗称乙肝小三阳，说明是急、慢性乙肝，传染性相对较弱。乙肝五项第135项阳性，其余两项阴性。俗称乙肝大三阳，说明是急、慢性乙肝，传染性相对较强。乙肝五项第25项阳性，其余三项阴性。说明是接种了乙肝疫苗以后，或是乙肝病毒感染后已康复，已有免疫力。乙肝五项全阴说
23、明过去和现在未感染过乙肝，无抗体,酶 标 仪,1.酶标仪的定义 酶标仪即酶联免疫检测仪(ELISA Reader)是酶联免疫吸附试验的专用仪器.主要应用于酶联免疫吸附检测反应中检测吸光度值，其用途主要应用于ELISA试剂的测定，广泛用于各种实验室，包括临床实验室。应用范围:血液学检验、免疫学检验、肿癌免疫学检测、传染病免疫学检验、优生优育功能检测、基因检验及兽残、农残检验项目等。酶联免疫吸附剂测定法，简称酶联免疫法，或者ELISA法。它的中心就是让抗体与酶复合物结合，然后通过显色来检测。生活中常见的有如乙肝二对半、人类免疫缺陷病毒抗体（即爱滋病）的检测,检测原理:,使抗原或抗体结合到某种固相载
24、体表面，并保持其免疫活性。使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅来进行定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。,检测步骤,编辑ELISA用血清来检测，首先血液
25、要经过至少半个小时的凝集，然后取血清。将酶复合物用稀释液稀释后，加血清及阴性、阳性对照，还有就是质控品（这是严格的要求，它的范围必须在质控范围内）。经过一个小时的孵育，然后洗板，加底物，半个小时避光反应后加终止液即完成反应部分，然后就是读数。由数值来判断结果的阴性或阳性。,微孔板,酶标试剂盒,酶标的分类：酶标仪有单通道和多通道两种类型，单通道又分为自动型和手动型两种。在单通道酶标仪的基础上，又发展了多通道、全自动型酶标仪。多通道酶标仪一般都是自动型的，它设有多个光束和多个光电检测器。如8 通道的仪器，设有8 条光束（或8 个光源）、8 个检测器和8 个放大器,电源指示灯：仪器开机后，该指示灯点
26、亮。触摸显示屏：显示程序界面，用笔点击可进行各类操作。酶标板盖板：塑料盖板，可以阻挡灰尘进入酶标板和仪器内部。,微孔板:是一种用来盛装待测样本的透明塑料板，板上有多排小孔，如有40 孔板、55 孔板和96 孔板等多种规格。每个小孔可以盛放零点几毫升的溶液。根据仪器的不同，既可以一个孔一个孔地检测，也可以一排孔一排孔地检测。,洗板机,洗板机是将固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他多余的游离反应物质分开。即洗涤除去未结合的抗原及杂质，经洗涤后，固相载体上只留下特异性抗体。可以很好的防止手动拍板造成的交叉污染。,尿 液 检 测,尿液检查,尿液检查，包括尿常规分析、尿液中有形成分检测(如尿红细
27、胞、白细胞等)、蛋白成分定量测定、尿酶测定等。尿液检查对临床诊断、判断疗效和预后有着十分重要的价值。pH：正常5.0 8.0。蛋白：正常阴性。阳性为肾功受损尿糖：正常阴性。糖尿病的鉴别诊断 酮体：正常阴性。阳性为肾功受损隐血：正常阴性。肾炎的鉴别诊断胆红素：正常阴性。肝炎的鉴别诊断 尿胆原：正常阴性。黄疸的鉴别诊断 亚硝酸盐：正常阴性。尿路感染的 鉴别诊断 白细胞酯酶：正常阴性。尿路感染 的鉴别诊断,尿液分析仪,1.定义：尿液分析仪是测定尿中某些化学成分的自动化仪器，它是医学实验室尿液自动化检查的重要工具，此种仪器具有操作简单、快速等优点。,应用,50年代即有人采用单一干化学试带法测定尿中蛋白质和葡萄糖，利用肉眼观察试带颜色的变化与标准板时行比较，得出相应的数值。80年代，由于计算机技术的高度发展和广泛使用，尿液自动化分析仪也得到迅速发展，逐步由原来的半自动化发展到全自动化。,原理,此类仪器一般用微电脑了控制，采用球面积分仪接受双波长反射光的方式测定试带上的颜色变化进行半定量测定。试剂带上有数个含各种试剂的试剂垫，各自与尿中相应成分进行独立反应，而显示不同颜色，颜色的深浅与尿液中某种成分成比例关系，试剂带中还有另一个“补偿垫”，作为尿液本底颜色，了对有色尿及仪器变化待所主生的误差进行补偿。,尿液分析仪,谢 谢 大 家！,
