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1、临床检验实验室安全知识培训,检验科,生物安全柜(safety cabinet),一种专用的排风柜。通过对排到 大气中的气体过滤(filter)，防止 操作者和环境接触到处理有潜在 危险性和危险微生物时产生的气 溶胶。,生物安全柜产品的特点:,1、整个操作区内的三面墙体都为双 层墙体，其夹层互相贯通(包括台面下 部的夹层，形成互相连通的负压风道.2、安全柜内部墙体一体成型，三面 墙体间无接缝(seamless).3、采用进口的超高效过滤器(HEPA)，过滤效率高达99.999%.,生物安全柜的辅助装置保障操作者安全,1、负压报警装置：安全柜的负压不能达到要求时，自动报警。2、操作窗高度报警：操作
2、窗高度超过安全高度时，自动报警。提醒您注意调整。,3、过滤器报警：当其压力超过范围时自动报警可 提醒您通知厂家更换过滤器。4、蝶阀：安全柜内液体通过柜体下方蝶阀 安全排出，将交叉感染的可能降 到最低。,工作原理:1.物理屏障2.高效过滤3.空气屏障4.定向层流,诱捕效应 静电效应拦截效应 沉降效应 扩散效应,0.3 um 的颗粒过滤效率 99.999%;0.12 um 的颗粒过滤效率 99.99%.,垂直层流洁净台,I级生物安全柜:,1.保护操作者和操作环境。2.样品没有得到保护。3.通过样品区的空气，经高效过滤器的过滤之后，100%地排放到实验室环境中。,II 级生物安全柜-C A型(B3)
3、:,30%外排进入环境30%外界空气补充70%经过滤后循 环使用,II 级生物安全柜 C B1型,70%外排进入环境70%外界空气补充30%过滤后循环使 用,III级生物安全柜,样品、操作者、操作环境都得到保护(操作时戴全密封手 套）100%外排进入环境100%外界空气补充无循环使用的气流,如下情况使用生物安全柜：（1）致病微生物气溶胶或溅出的操作应在生物安全柜（级生物安全柜为宜）,（2）处理高浓度或大容量感染性材料均须在生物安全柜(级安全柜为宜）或物理抑制设备中进行，并使用个体防护设备。,（3）上述材料的离心操作如果使用密封的离心机转子 或安全离心杯，且它们只在生物安全柜中开闭和装载感染性材
4、料，则可在实验室中进行。,11操作步骤:开启电源和内外风扇；在机器预热时将所有必需的物品置于安全柜内；准备一块浸有75%的酒精的纱布；开始工作前及完成工作后，让安全柜工作15min来完成“净化”过程；手和双臂伸入到生物安全柜中等待大约一分钟，以使安全柜调整完毕才开始对物品进行处理；,接种环灭菌时，用电子加热器，而不应该使用明火；在实验结束时，生物安全柜里的所有物品都应清除表面污染，标本个培养基移出安全柜；每天实验结束时，用75%酒精擦拭工作台面、四壁及玻璃的内外侧等部位来清除污染；有标本溢出等污染时，用爱尔施消毒，然后用水再次进行擦拭。,1.2注意事项:每次开始实验之前将所需物品置于安全柜内，
5、以尽可能减少双臂进出次数；双臂应该垂直地缓慢进出前面的入口；尽量减少操作者身后的人员活动；生物安全柜在使用中不能打开玻璃观看挡板；在生物安全柜内操作时，不能进行文字工作；级生物安全柜千面的进气口格栅不能被纸、仪器设备或其他物品阻挡；,可产生气溶胶的设备(如混匀器、离心机等)应靠近安全柜的后部位置；生物危害性废弃物袋放在安全柜内右侧，袋中放入爱尔施消毒剂；房间中有人时要关闭紫外灯，以保护眼睛和皮肤，避免因不慎暴露而造成伤害；安全柜一直维持运行状态8小时工作期间，不能反复开关；当气流警报响起时，立刻停止工作，并报告生物安全负责人。,离心机的生物安全,1.高效微粒隔离膜（HEPA filter)材料
6、是聚偏氟乙烯（PVDF）,孔 径为0.2m.,.双重锁定转头盖(Dual Locking Rotor Lid)把转头从离心腔拿出至安全柜时，保持转头的密封,.生物安全转头(BiocontainmentRotor)样品瓶外套是转头的一部分 样品瓶可于安全柜内打开 保证漏出的样品保留在瓶内,、多重保护的试管盖部件包括密封圈，内盖及管/瓶盖,离心机使用操作规程(7)；,1.先检查离心管和盛标本的容器是否破损?2.称重平衡,正确放置十字轴和离心桶；3.空离心管用蒸馏水来平衡；4.管内容物不能装得过满，需留出一定空间;,5.离心的试管应加盖,离心时机器呈关闭态；6.每次用毕，清洁离心桶、转子和离心机腔的
7、污染；7.机器状态复位.,消毒隔离处理原则(先消毒,后处理),1、带有传染性标本的一次性用品，要焚烧处理。2、非一次性使用的，要高压灭菌后毁型、回收。,如何消毒?,针对有传染性的标本:1.按体积加漂白粉(5,24h;肝炎,结核等6h)倒入厕所。2.微生物培养标本,培养物高压 后弃.3.污染的液体、废液、洗涤液加漂白水(10%,过夜)入下水道。,针对实验室的空气：1.低臭氧紫外线灯消毒(无人).2.化学消毒:含有效氯消毒“消毒 灵”1.5g/L喷 洒消毒.3.静电吸附式空气净化器持续消 毒,室内有无人时均适用.,针对实验室的地面,台面和仪器:可用0.5%1%过氧乙酸 或“消毒 灵”1.5g/L
8、喷雾.,地面的清洁与消毒应达到以下要求：1)、地面应湿式清扫，保持洁净；当有血迹、粪便、体液等污染时，应及时以含氯消毒拖洗。2)、拖洗工具使用后应先洗净、消毒、再晾干。,针对化验报告单：应设立专门的清洁区打印报告单.,手卫生(hand of hygiene),目的：控制医院性感染的最重要 最简便易行 的措施之一。（包括保护个人自己）（避免交叉感染）,洗手、手消毒和外科洗手,洗手（handwashing）：指用普通肥皂和皂液通过流动水 洗手。为仅去除手部皮肤污垢、碎屑和部分致病菌的一个过程。,手消毒（hand antisepsis）：指用含抗菌剂肥皂/液，或消毒剂 擦洗手。在一般性洗手或刷手的基
9、 础上对残留手部的微生物作进一步 清除，除去或杀灭皮肤上的致病菌 的过程。,外科手消毒:(surgical hand antisepsis)要清除或消灭暂居菌和减少常驻菌 能降低术中因手套破损而导致细菌 侵入手术区域的风险。,暂居菌指寄生在皮肤表层,常规洗 手易被清除的微生物.接触病人或 被污染的物体表面时获得,如果没 有通过肥皂和水的冲洗和机械摩擦 或者用消毒手刷将其破坏,它可随 时通过手传播。,常居菌是能从大部分人的皮肤上 分离的微生物，这类微生物是皮 肤上持久固有的寄居者，不易被 机械性的摩擦清除固有的细菌包 括凝固酶阴性葡萄球菌、一些棒 状杆菌类、不动杆菌属、丙酸菌 属及某些肠道细菌族
10、成员等。,洗手指征：直接接触病人前后/无菌操作前后穿脱工作服等前后/再进入清洁区前接触特殊易感病人前后 接触或处理病人的血液、体液、分泌物后等等,正确的洗手方法：1、掌心对掌心 2、手指交叉掌心对手背 3、换一手后操作同上 4、两手互握互搓指背 5、拇指在掌中转动摩擦 6、指尖聚掌心中摩擦,标准：各区域工作的医务人员的手均不能检出致病性微生物。对于常驻菌（条件性）要求检出细菌菌落数；类区域和类区域:5cfu/cm2 类区域:10cfu/cm2 类区域:15cfu/cm2,手套的使用与要求:手套的种类:1、清洁手套 2、无菌手套 手套的使用:1、手术、护理特殊病人或入 体腔的操作（无菌手套）2、
11、手可能被污染时（清洁手套）,手套使用须注意 1、手套不能代替洗手 2、带手套只能接触可能污染的 物品 3、脱手套后要洗手,消毒(disinfection):杀灭物体上病原微生物的方法,并 不一定杀死含芽胞的细菌或非病原 微生物。,灭菌(serilization):指杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒的要求高，包括杀死细 菌芽胞在内的全部病原微生物和非 病原微生物。,抑菌(bacteriostasis):指抑制体内或体外细菌的生长繁殖 常用的抑菌剂为各种抗生素,用于 体内可抑制其生长繁殖;用于体外 是通过抑菌试验来验证细菌对抗生 素的敏感性。,防腐(antisepsis):防止或抑制体外细菌
12、生长繁殖的方 法。细菌一般不死亡。使用同一种 化学药品在高浓度时称为消毒剂，而以低浓度达到抑菌目的时又称之 为抑菌剂。,防腐(antisepsis):防止或抑制体外细菌生长繁殖的方 法。细菌一般不死亡。使用同一种 化学药品在高浓度时称为消毒剂，而以低浓度达到抑菌目的时又称之 为抑菌剂。,消毒灭菌的手段,一、物理消毒灭菌法二、化学消毒灭菌法三、生物消毒灭菌法,一、物理消毒灭菌法,(一)热力 湿热/干热,前者的效率更大.(二)辐射(三)滤过(四)超声波(五)干燥/低温,高压蒸气灭菌器：,1、灭菌原理：通过预先抽真空的方法将蒸汽引入柜室,穿透到物品中间以热力使菌体蛋白凝固。2、注意事项:操作人员须经
13、专业培训，合格后方能上岗;安全使用防灼伤;保证锅内空气流通并定期灭菌效果监测并记录;保持高压锅整洁。3、操作（见后）：,将拟灭菌的物品随同盛装的桶放入灭菌器内；盖好盖子，拧紧元宝螺丝，勿使漏气；锅下加热，打开排气活门，放出冷空气（一般般在水沸后排气10-15分钟左右）,关闭放气活门，使压力逐渐上升至103Kpa，温度达121.3，维持20分钟以上，排气至“0”时，慢慢打开盖子。切忌突然开盖，是冷空气大量量进入，蒸汽凝成水滴，使物品潮湿，且玻璃类易发生爆裂。待压力指针到“0”位置和热空气排尽后，才能打开柜门，去除物品；关紧进气阀。,二、化学消毒灭菌法,应用化学消毒剂注意事项:1.明确消毒剂的种类与作用特点 2.不同消毒剂的适宜使用对象 3.不同消毒剂间的配伍禁忌 4.影响消毒剂消毒灭菌效果的因素,影响消毒剂消毒灭菌效果的因素 1.消毒剂的性质,浓度与作用时间 2.微生物的种类与数量 3.消毒作用时的温度(高提高效果)4.消毒剂杀菌受酸碱度影响 5.消毒环境中存在有机物影响效果,三、生物消毒灭菌法,噬菌体(bacteriophage,phage)一种感染细菌,真菌或其他微生物 的病毒。其中毒性噬菌体能在宿主 菌细胞内复制增殖形成大量子代噬 菌体，并最终裂解宿主菌。,谢 谢,
