血细胞分析仪检测原理.ppt

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1、河北医科大学第四医院东院检验科杨红芳,血细胞分析仪检测原理,库尔特和血细胞分析仪,血球之父-库尔特,一电阻抗法检测原理(库尔特原理),1.白细胞检测,淋巴细胞,大单个核细 胞群,粒细胞,淋巴,嗜碱,单核,嗜酸,中性粒细胞,2.红细胞和血小板的检测,红细胞和血小板共用一个小孔管,正常人红细胞体积和血小板体积间有一个明显界限,血小板计数准确容易,CPU对血小板和红细胞分布图进行判断,红细胞、血小板体积分布直方图,二联合检测型原理,主要体现在白细胞分类,实质是选用较特异的方法将血含量较少的嗜酸、嗜碱性粒细胞检出,发现异常细胞。共有特点是:均使用了鞘流技术。,1.VCS检测技术,光散射,传导性,电阻抗

2、,每个细胞接受三维分析定义到三维散点图的相应位置,(1).Conductivity传导性针对细胞内部结构的测量方法,利用高频电磁波对细胞传导性的特点,检测:细胞核大小细胞核密度细胞核结构核浆比异淋和淋巴,全角度:10-70的全角度激光散射量它是准确区分嗜酸性细胞和中性粒细胞的一个重要参数。,(2)Laser Scatter激光散射针对细胞颗粒特性的测量方法,VCS白细胞分类,V C S,电阻抗技术,细胞内部结构,细胞内的颗粒性、核分叶性和细胞表面结构,MAPSS,0:前向散射光:细胞大小、数量,10:侧向散射光:细胞内部结构及核染色质的复杂性,90:垂直角度散射光:细胞内部颗粒及分叶状况,90

3、D:垂直角度去偏振散射光,鉴别E与N,2.多角度偏振光散射法(MAPSS),3.光散射与细胞化学技术联合应用,(1)过氧化物酶(Peroxidase,Perox)染色通道 过氧化物酶活性强度:ENM,L和B则无。(2)嗜碱性粒细胞/分叶核(baso/lobul-arity)通道:除B外其他细胞仅剩裸核,不同细胞的裸核结构不同,分叶越多散点越靠近横轴右侧,根据多分叶核和单个核的比例,可计算出左移指数。,4.电阻抗、射频与细胞化学联合,这类仪器是利用电阻抗、射频这一成熟细胞计数技术结合细胞化学技术,通过4个不同的检测系统对白细胞、幼稚细胞进行分类和计数。(1)嗜酸性粒细胞检测系统(2)嗜碱性粒细胞

4、检测系统(3)淋巴、单核和粒细胞检测系统(4)幼稚细胞检测系统,5.双鞘流动力连续系统(DHSS),用钨光源流式细胞光吸收、化学染色和电 阻抗法 WBC计数通道:电阻抗法 嗜碱性粒细胞通道:专用染液 WBC分类通道:双鞘流系统中,用流式细胞光吸收、电阻抗和细胞化学染色液联合检测除B以外的WBC。,白细胞分类散射图,联合使用多项技术(流式、激光、射频、电导、电阻抗、细胞化学染色)同时分析一个细胞,综合分析实验数据,从而得出较为准确的白细胞“五分群”结果。,三血红蛋白测定原理,血红蛋白测定采用光电比色原理 血细胞悬液中加入溶血剂后,红细胞溶解释放血红蛋白,后者与溶血剂中有关成分结合形成血红蛋白衍生物,进入血红蛋白测试系统 特定波长(530550nm)下进行光电比色,血红蛋白,血红蛋白衍生物,吸光度,Hb浓度,溶血剂,540nm,血红蛋白测定的溶血剂,溶血剂,含氰化物的溶血剂,不含氰化物的溶血剂,

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