利福霉素发酵生产工艺.ppt

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1、利福霉素发酵生产工艺,安升淑 程怡,利福霉素类药物介绍,利福霉素发酵工艺流程,种子培养发酵培养,补料控制,这里是标题哦,点击输入文字哦,这里是标题哦,点击输入文字哦,利福霉素英文名称:rifamycin分子式:C37H47NO12分子结构式:,点击输入文字哦,利福霉素类药物,从地中海链霉菌产生的、结构域功能相近的一组抗生素,它具有广谱抗菌作用,对结核杆菌、麻风杆菌、链球菌、肺炎球菌等革兰氏阳性细菌,特别是耐药性金黄色葡萄球菌的作用都很强。对某些革兰氏阴性菌也有效。,其作用机制是通过与依赖DNA的RNA聚合酶结合而抑制原核生物的转录起始。利福霉素类药物有:利福霉素B二乙酰胺、利福平等。目前在临床

2、应用的有利福平、利福喷汀及利福布汀。利福平是其中药效最好、目前应用最多的一种,不仅抗菌谱广,能用于多种细菌感染性疾病,而且与其他药物之间无交叉抗药性,对结核病的疗效尤为突出,是治疗结核病的第一线药物,利福霉素类药物,利福霉素钠别名:利福霉素SV 治疗结核杆菌,利福平胶囊利福霉素B得到的一种半合成抗生素,利福喷丁胶囊治疗结核杆菌比利福平高2-10倍,利福布汀 含有螺哌嗪基的利福霉素衍生物,利福霉素发酵工艺流程,点击输入文字哦,菌种(地中海拟无枝酸菌)种子培养发酵培养补料控制,菌种,地中海拟无枝酸菌(Amycolatopsis mediterranei)培养温度:28,培养基,1、斜面培养基()酵

3、母抽提物0.4,麦芽糖抽提物0.4,葡萄糖0.4,燕麦片2.0,琼脂2.02、种子瓶培养基()淀粉1.5,葡萄糖1.5,黄豆饼粉1.0,蛋白胨1.0,KNO30.1,KH2PO40.05,CaCO30.23、发酵瓶培养基()葡萄糖12.0,蛋白胨1.0,黄豆饼粉1.0,鱼粉0.5,巴比妥钠0.15,KNO30.8,KH2PO40.02,CaCO30.3,CoCl21ug/ml,消泡剂0.044、15L平板培养基 高氏一号培养基,培养条件,1、斜面培养条件:培养温度30,湿度30-60,培养时间7d。2、母瓶培养条件:培养温度30,装量120/750ml,摇床转速220r/min,培养时间2d。

4、3、子瓶培养条件:培养温度30,装量120/750ml,摇床转速220r/min,接种量5,培养时间1d。4、发酵瓶培养条件:培养温度30,装量25/250ml,摇床转速220r/min,接种量5,培养时间7-8d.5、15L自动发酵罐培养条件:通气1:1(vvm)搅拌,转速500r/min,接种量10%,培养温度030,分批补料,发酵周期8天。,发酵工艺,1、一级、二级种子罐培养基()同种子瓶培养基2、60m3发酵罐培养基()葡萄糖12.0,蛋白胨1.0,黄豆饼粉1.0,鱼粉0.5,(NH4)2SO40.5,KNO3,0.4,KH2PO40.05,CaCO30.3,CoCl21ug/ml,消

5、泡剂0.043、一级种子罐培养条件:培养温度30,罐压0.05Mpa,培养时间48小时左右。,发酵工艺,4、二级种子罐的培养条件:培养温度30,罐压0.05Mpa,接种量10,全程开搅拌,搅拌转速220r/min,培养时间24小时左右。5、60m3发酵罐培养条件:培养温度27,罐压0.05Mpa,接种量10,全程开搅拌,搅拌转速130r/min,培养至38h补加0.5的前体,流加补料,培养时间9天。,发酵工艺,点击输入文字哦,补料控制,1、补糖 在发酵培养80hr左右,当发酵液中还原糖低于3.0时开始补加葡萄糖,控制还原糖浓度在1.0-1.5。2、补氨水 当发酵液中的pH低于6.4时,自动补加氨水,控制pH在6.4左右。3、补料方式 流加补料:依据发酵液中还原糖的含量和补料糖的浓度,设定每小时的补料量,以均匀自动补入,控制发酵液中还原糖在1.0以上。分批补料:依据发酵液中还原糖的含量和补料糖的浓度,采用每隔6小时补一次糖,控制还原糖在1.0以上。,仪器设备,pH计分光光度计旋转摇瓶机离心机光学显微镜自动发酵罐pH电极溶氧电极,谢谢观赏,WPS Office,Make Presentation much more fun,WPS官方微博kingsoftwps,

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